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Method Article
このプロトコルは、表在性膀胱がんの同所性モデルを構築するための独自の方法を説明しています。
この研究は、高効率で正確な腫瘍局在化を備えた同所性マウス膀胱腫瘍モデルを確立するための革新的な方法を提示します。雌のC57BL/6Jマウスを仰臥位で麻酔した後、24Gの静脈注射針を膀胱に挿入して内容物を排出します。次に、34 G の分注針をカテーテルに通し、5 回回転させて膀胱ドーム粘膜に限局性損傷を生じさせ、その後抜去します。MB49細胞懸濁液は吸引され、30Gの分注針に接続され、カテーテル を介して 膀胱に挿入されます。腫瘍細胞は、圧力下で膀胱に粘膜下注入されます。この技術により、マウスへの外傷が最小限に抑えられ、腫瘍の取り込み率が高くなり、腫瘍の位置が固定されます。シンプルさと優れた再現性が特徴です。このモデルは、膀胱がんの膀胱内療法を開発するための理想的な実験プラットフォームを提供し、この悪性腫瘍の治療戦略の進歩と最適化を促進します。
膀胱がんは世界的に大きな健康負担となっており、発生率と予後には性差が顕著である。この悪性腫瘍は、それぞれが多様な病原性経路に関連する異なる分子サブタイプによって特徴付けられます。非筋層浸潤性膀胱がん(NMIBC)と筋層浸潤性膀胱がん(MIBC)では、分子的および病理学的特徴が大きく異なります1,2。NMIBCは症例の約75%を占め、転移や転移を伴わずに限局性が残る移行性上皮起源の腫瘍を特徴としています。一方、MIBCは、がん細胞が膀胱の筋肉層に浸潤することを特徴とし、播種のリスクが高いため、臨床現場では膀胱切除術が必要になることがよくあります3。
前臨床研究では、薬物療法の評価には、疾患の表在性を正確に表すモデルが不可欠です。したがって、表在性膀胱がんのin situモデルの確立は最も重要であり、臨床薬の開発や革新的な点滴療法のための重要な研究ツールとして機能します。
マウスの同所性膀胱がんモデルの開発は、伝統的に課題に直面してきました。化学的に誘導されたモデルは、多くの場合、表在性の腫瘍として開始されますが、浸潤性に進化する可能性があり、大規模な実験ではその有用性を制限する変動性があります4。従来の同所性移植モデルは、膀胱壁5からの腫瘍細胞の注入に依存しており、表在性膀胱がんを忠実に再現するのに苦労しています。腫瘍細胞点滴6,7,8,9,10と組み合わせた粘膜損傷を含む代替方法が試みられてきたが、高い死亡率と低い腫瘍摂取率によって制限され、それらの広範な適用を妨げている。
この研究は、既存のモデルと比較して、より高い安定性、低い死亡率、および固定された腫瘍の位置を示す表在性膀胱がんモデルを構築するための新しい方法を開発することを目的としています。現在のモデルは、疾患の初期段階をより正確に表現することで、予防的および治療的介入の厳密な評価を強化し、それによって膀胱がんの治療を前進させる態勢を整えています。
すべての動物実験のプロトコルと手順は、中国天津の天津医科大学の動物実験倫理審査委員会によって承認されました(承認番号SYXK:2020-0010)。この研究では、6〜8週齢の雌C57BL / 6Jマウスを使用しました。動物は、12時間の明暗サイクル、21〜25°Cの範囲の温度、30%〜70%の調整可能な湿度レベル、特に指定がない限り食物と水への無制限のアクセスなど、制御された環境条件下で飼育されました。使用した試薬や機器の詳細は 、資料表に記載されています。
1. 細胞調製
2.動物の調理
3. 動物同所性腫瘍モデル作製
4. 術後モニタリング
粘膜下注射の有効性は、最初にトリパンブルーの投与によって評価されました。.注入後、粘膜下層内の色素の分布が明確に可視化され、注入された物質の正確かつ制御された送達が確認されました(図1)。
腫瘍の発生は細心の注意を払って追跡されました。着床後約14日で、膀胱腫瘍を示す重篤な症状である血尿の顕著な発?...
膀胱がんの研究は、基礎研究と応用研究の両方に不可欠な動物モデルに依存しています。腫瘍の成長環境をよりよく模倣するために、同所性膀胱腫瘍モデルは、皮下腫瘍モデル11と比較して優れたアプローチを提供します。
現在、同所性膀胱がんモデルは、実験目的に基づいて、免疫不全マウスを利用するもの(PDX)モデル
著者は、競合する利益がないことを宣言します。
この研究は、天津市健康産業主要プロジェクト基金(助成金番号。TJWJ2022XK014)、天津市教育委員会の科学研究プロジェクト基金(助成金番号2022ZD069)、天津泌尿器科学研究所人材資金プログラム(助成金番号。MYSRC202310)、天津医科大学第二病院臨床医学研究プロジェクト基金(助成金番号2023LC03)、天津医科大学第二病院青少年基金(助成金番号2022ydey15)、天津医科大学第二病院泌尿器科人材育成プロジェクト(助成金番号2022ydey15)、天津医科大学第二病院泌尿器科の人材育成プロジェクト(助成金番号。MNRC202313)。スポンサーは、原稿の準備、レビュー、承認に役割を果たしました。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
34 G dispensing needle | Suzhou Haorun Fluid Technology Co., Ltd., Suzhou, China | SGL-362 | |
30 G dispensing needle | Suzhou Haorun Fluid Technology Co., Ltd., Suzhou, China | SGL-362 | |
Avertin | Sigma-Aldrich LLC | T48402 | |
Trypan blue | Sigma-Aldrich LLC | 302643 |
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