この作品は、カナダ衛生研究所（CIHR）、ピーターライード医学研究財団、Neuroengineeringのマギルプログラムからの補助金によって支えられて、フォンデルシェルシュエンサンテケベック（FRSQ）、およびイノベーションのためのカナダ基金（CFI ）。セバスチャンD.ラングロワはデラルシェルシュエンサンテケベック（FRSQ）と健康研究（CIHR）のカナダの協会からフレデリックバンティングとチャールズベストカナダ大学院奨学金で修士賞フォンからマスターのトレーニング賞によってサポートされていました。我々は数字の支援のためのジェシカMTファムに感謝しています。

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	<li>Charron, F., Stein, E., Jeong, J., McMahon, A. P., Tessier-Lavigne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+morphogen+sonic+hedgehog+is+an+axonal+chemoattractant+that+collaborates+with+netrin-1+in+midline+axon+guidance.">The morphogen sonic hedgehog is an axonal chemoattractant that collaborates with netrin-1 in midline axon guidance.</a> Cell. , 113-1111 (2003).</li><li>Fabre, P., Shimogori, T., Charron, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+ipsilateral+retinal+ganglion+cell+axons+at+the+optic+chiasm+requires+the+Shh+Receptor+Boc.">Segregation of ipsilateral retinal ganglion cell axons at the optic chiasm requires the Shh Receptor Boc.</a> Journal of Neuroscience. 30, 266-275 (2010).</li><li>Helms, A. W., Johnson, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progenitors+of+dorsal+commissural+interneurons+are+defined+by+MATH1+expression.">Progenitors of dorsal commissural interneurons are defined by MATH1 expression.</a> Development. 125, 919-928 (1998).</li><li>Kaech, S., Banker, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+hippocampal+neurons.">Culturing hippocampal neurons.</a> Nature Protocols. 1, 2406-2415 (2006).</li><li>Okada, A., Charron, F., Morin, S., Shin, D. S., Wong, K., Fabre, P. J., Tessier-Lavigne, M., McConnell, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Boc+is+a+receptor+for+sonic+hedgehog+in+the+guidance+of+commissural+axons.">Boc is a receptor for sonic hedgehog in the guidance of commissural axons.</a> Nature. 444, 369-373 (2006).</li><li>Yam, P. T., Langlois, S. D., Morin, S., Charron, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+hedgehog+guides+axons+through+a+noncanonical,+Src-family-kinase-dependent+signaling+pathway.">Sonic hedgehog guides axons through a noncanonical, Src-family-kinase-dependent signaling pathway.</a> Neuron. 62, 349-362 (2009).</li></ol>

我々は、ラット胚脊髄から交連神経細胞を細かく分析し、文化に方法を記載している。この手順は、定期的に確実に軸索ガイダンスの細胞および分子メカニズムを研究する神経細胞を準備する私たちのラボで使用されています。細胞生物学および免疫化学実験、一腹の子の解剖のために十分なニューロンを生成します。より多くの細胞がこのような多くの生化学の実験のように、必要な場合?...

ラット胚の背側脊髄の解剖（表Iも参照） <ul><li> E13ラットの妊娠は、上演</li><li> 70％エタノール</li><li>手術用はさみ、ファイン科学ツール</li><li>鉗子、デュモン＃5、ファイン科学ツール</li><li>ペトリ皿</li><li> L - 15培地</li><li>解剖顕微鏡、ライカ</li><li>プラスチック製のトランスファーピペット</li><li> Microscissors、ファイン科学ツール</li><li>タングステン針とピンホルダー（つのフックの形をした針、1つのL形状の針、1本の直線針）、ファイン科学ツール</li><li>熱不活化ウマ血清（HiHS） </li><li> 15ミリリットルプラスチックチューブ</li></ul>交連ニューロンの文化（I表も参照） <ul><li>組織培養インキュベーター（37℃、5％CO 2、湿度制御） </li><li>ドイツDesagのガラス製カバースリップおよび/またはプラスチック製組織培養ディッシュ</li><li>ポリ- L -リジン、シグマ</li><li>滅菌ミリQ H 2 O </li><li> Neurobasal、インビトロジェン</li><li>熱不活化ウシ胎児血清（HiFBS） </li><li> L -グルタミン</li><li> B27、インビトロジェン</li><li>ペニシリン/ストレプトマイシン系抗生物質</li><li> 37 ° Cの水浴</li><li>滅菌パスツールピペット</li><li>ブンゼンガスバーナー</li><li> HBSS、Ca 2 +の /のMg 2 +フリー、Invitrogen社</li><li> DNアーゼ、ワーシントン</li><li> MgSO 4を </li><li>遠心</li><li>血球計</li><li>トリパンブルー溶液</li></ul>

dissection and culture of commissural neurons from embryonic spinal cord

交連ニューロンが広く胚脊髄の開発中に軸索誘導のメカニズムを調査するために使用されている。これらのニューロンの細胞体は背側脊髄に位置しており、その軸索は、胚発生時にステレオタイプ化された軌道に従っています。交連軸索は、最初にfloorplateに向かって腹側に投影する。正中線を交差した後、これらの軸索が脳に向かって前方およびプロジェクトにします。これらの各ステップは、いくつかの指導の手がかりの作用によって調節されている。高度交連ニューロンに富んだ文化を理想的に回転アッセイ、免疫化学、生化学を含む軸索の経路探索のメカニズムを、対処する多くの実験に適しています。ここでは、E13ラット背側脊髄から交連神経細胞を細かく分析し、文化に方法を説明します。最初に、脊髄が隔離され、背板はグレー解剖されています。背側組織は、トリプシン処理し、機械的破砕により細胞懸濁液にして解離している。神経細胞はポリ- L -リジンでコーティングされたガラス製カバースリップまたは組織培養皿に播種されています。 30時間後<em&gt; in vitroで</em&gt;、ほとんどのニューロンは軸索を拡張している。文化の純度（ヤム<em&gt;ら。</em&gt; 2009）、通常は90％以上、交連ニューロンのマーカーDCC、LH2とTAG1（ヘルムズとジョンソン、1998）で免疫標識によって評価することができる。この神経細胞の準備はするのに便利なツールです。<em&gt; in vitroで</em&gt;脊髄の開発時の交連軸索成長とガイダンスの細胞および分子メカニズムの研究。

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Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

このビデオでは、E13ラット背側脊髄から交連神経細胞を細かく分析し、文化に方法を示しています。解離交連ニューロンの軸索成長とガイダンスの細胞および分子メカニズムを研究するのに便利です。

胚の脊髄から交連ニューロンの解剖と文化

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

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16.7K ビュー.  Institut de Recherches Cliniques de Montréal. このビデオでは、E13ラット背側脊髄から交連神経細胞を細かく分析し、文化に方法を示しています。解離交連ニューロンの軸索成長とガイダンスの細胞および分子メカニズムを研究するのに便利です。