血小板中のスーパーオキシドアニオン生成を検出するための代替法

私たちの研究の範囲は、活性酸素種の生成がどのように血小板機能を調節し、止血反応を調節するかを理解することです。私たちの仕事には、主要な活性酸素種であるスーパーオキシドアニオンを確実に検出することが不可欠です。スーパーオキシドアニオンを検出する最も一般的な手法は、DCFDAを蛍光プローブとするフローサイトメトリーです。

これらが限界として、活性酸素種の放出を誘発し、信頼性の低いデータにつながります。異なる活性酸素種を区別することはできず、血小板活性酸素種を定量化することもできません。このビデオでは、血小板スーパーオキシドアニオンを検出するための2つの代替技術を紹介します。

最初の手法は、生きた血小板上のDHEを利用して、高速な速度論と単一細胞分解能でスーパーオキシドアニオンを検出します。2つ目の手法では、スピンプローブCMHを用いて、血小板によるスーパーオキシドアニオン生成速度を定量化します。全体として、このビデオで紹介されている技術は、ほとんどの既存の技術に比べて大きな利点を提供し、血小板のredux依存性調節を研究するために自由に使える実験ツールの大幅な進歩を表しています。