初代ミクログリア培養のための新生児マウスからの脳分離

まず、各T75フラスコに1ミリリットルあたり10マイクログラムのポリ-L-オルニチン臭化水素酸塩を5ミリリットル加えます。5%二酸化炭素インキュベーターで摂氏37度で少なくとも1時間インキュベートします。マウスの首を切った後、頭をそっと持ち、首から鼻まで頭蓋骨に正中線切開を作成します。

組織鉗子で頭蓋骨の裏側をはがして、脳を露出させます。脳をすくい取るには、組織鉗子を脳の下に挿入し、脳を頭から持ち上げます。20ミリリットルのLeibovitzのL-15培地を入れたシャーレに脳を入れた後、解剖顕微鏡で微小鉗子を1対のマイクロ鉗子を用いて、脳幹と髄膜を慎重に取り除きます。

50ミリリットルのリーボビッツL15培地が入った5ミリリットルの円錐管に脳を集めます。