CTはスイス国立科学財団（SCORE助成金3232230から126233）によってサポートされていました。研究はArtères財団、財団アステラス欧州とBoninchi財団によってサポートされていました。

1。ドナーの操作<ol><li> 200体重、雄ラット±コーンマスク上のイソフルランと20グラム麻酔（誘導のために3％、動作時に2％、1リットル/分の空気の流れ、FIO2 70％）。 </li><li>大規模な中央と横開腹手術を行い、両側腹部血管を焼灼する。 </li><li>鎌状靱帯を切断し、suprehepatic大静脈から左横隔膜静脈を分離します。最後に、2つの7から0までの絹の字の間に横隔膜静脈を分割します。 </li><li>左の三角と胃肝靭帯を切った。 </li><li> 7から0字（凝固が有効な代替手段である）の間に肝食道靱帯、動脈に分割します。 </li><li>左腎静脈に肝臓下の下大静脈を分離します。周囲の組織から右腎静脈を分離し、それぞれ、その近位端および遠位端上に、10から0と7から0字の間に分割します。 </li><li> 7から0 ligaturの間に右副腎静脈を分割esと穏やかな牽引力で切断することによって、その後部靭帯から肝臓無料。 </li><li>胃脾の静脈を分離し、それぞれ、その近位端および遠位端に、10から0と7から0字の間に分割します。 </li><li> 7から0までの関係の間で固有肝動脈を分割します。 </li><li>十二指腸膵臓の静脈を分離し、10から0とその近位および遠位端の7から0字は、それぞれの間に分かれています。 </li><li>肝門部から1cmの距離で小さな切開を実践して総胆管に22G、3.5mmのステントを挿入します。 7から0字の位置にステントを固定します。 </li><li>陰茎背静脈を介して、通常の生理食塩水1mlに希釈したヘパリンの10のUIを、注入します。 </li><li> 21G針で静脈ポルタを（可能な限り門から）カニューレを挿入し、軽く冷リンゲル乳酸（または他の保存液）20mlで肝臓をフラッシュします。同時に、適切なoutflを可能にするために腎静脈下の下大静脈を切断OW。肝冷灌流は1と2分の間持続する必要があります。 </li><li>十二指腸、膵臓静脈下静脈ポルタをカットします。 </li><li>ステント周りの合字に遠位総胆管をカットします。 </li><li>肝臓下の下大静脈の切開を完了します。 </li><li>振動板に肝上の下大静脈スキムミルクをカットし、肝臓を削除します。 </li><li>冷リンゲル乳酸を充填し、氷のパッドの上に洗面器を置く盆地に肝臓を配置します。 </li></ol> 2。移植の準備<ol><li>その袖口に静脈ポルタを挿入し、内膜を露出させるエッジの周りに容器を裏返す。 7から0字と袖口にevertedセグメントを固定します。 </li><li>肝臓下の下大静脈に同じ操作を繰り返します。 </li><li>肝臓下の下大静脈の近位部にマイクロクランプ（4-6 mmの長さ）を置きます。この操作は、ポータル再灌流後の血液の損失を回避することができます。 </li><li>肝臓を覆すと2プロレン8から0縫合糸を挿入する肝上の大静脈の反対側端に、外部から内部へ。 </li><li> 0から4までの冷蔵庫に移植する（リンガーの乳酸溶液に浸漬）℃で保存</li></ol> 3。受信者の操作<ol><li> ±200の重量を量る雄ラットを麻酔コーンマスク上のイソフルランと20グラム（誘導のために3％、動作時に2％、1リットル/ minの空気の流れ、FIO2 70％）とウォームなパッドを続けています。注目すべきは、レシピエントとドナーの重みは（±40グラム）一致する必要があります。 </li><li>開腹する前に、皮下に生理食塩水10mlを注入し、ピペラシリン/タゾバクタム筋肉の0.03グラム。 </li><li>正中線xipho-恥骨開腹術を実行します。 </li><li>優れた肝臓を露出させるために、自動静的ピンセットで剣状突起を逆にしてください。 </li><li>前方の靭帯を切って、2 7から0までの関係の間に左横隔膜静脈を分割します。 </li><li> 7から0字（coagulatioの間に肝食道靱帯、動脈を分けるn）は有効な代替手段です。ビデオ（ドナー操作と同じ）には示されていません。 </li><li>右腎静脈に肝臓下の下大静脈を分離します。 </li><li> 7から0、リガチャや穏やかな牽引力で切断することによって、その後部靭帯から無料で肝臓（（ドナー操作と同じ）は、ビデオには示されていない）の間に右副腎静脈を分割します。 </li><li>ちょうどその部門の下、総胆管の周りに7から0字に配置します。以下の1ミリメートル別の字を入れて、間にカット。 </li><li>門部で肝動脈を分離し、7から0字の間に分割します。 </li><li>静かに左と右のポータル枝を分ける。総肝動脈または胃脾動静脈を損傷しないように注意を払う。 </li><li>右腎静脈に頭側、下大静脈の周りのリングを置きます。次に4つの基本的な9から0の縫合糸を配置することにより、リングに血管壁に固定します。 </li><li>静脈ポルタのポータルリングと同じ操作を繰り返します。 </li&gt; <li>陰茎背静脈を介して、通常の生理食塩水1mlに希釈したヘパリンの10のUIを、注入します。 </li><li> 0.25パーセントで麻酔し、100％にFIO2を設定します。 </li><li>ちょうど右腎静脈上の肝臓下の下大静脈をクランプし、ちょうど胃脾動静脈の上大静脈ポルタをクランプします。最後に、下大静脈は横隔膜の少なくとも2ミリメートルを含めるようにしている肝上のクランプします。 </li><li>実質の肝上の下大静脈の近くをカットします。 </li><li>左と右のポータル枝を切って、間にセプタムを分割します。 </li><li>以前に配置し縫合糸のいずれかを切開しないように注意を払って、実質の肝臓下の下大静脈の近くをカットします。肝臓を削除し、腹腔内に移植を配置します。 </li><li>肝上の移植の下大静脈と受信者間のエンドツーエンドの吻合を行います。左から右へ壁の実行中の縫合糸で始まり、右からLEへ前壁に進むフィートは、両端を締める前に、内部の管腔の寛大なフラッシュを可能にするために最後まで前方の縫合糸が緩んでいてください。 </li><li>ポータルリングハンドルに近似の尾の分岐を挿入し、スロットにその位置を見つけるポータルカフと、近似の頭蓋の支店のスリットにグラフトの静脈ポルタを挿入します。 </li><li>生理食塩水で、受信者の静脈ポルタのフラッシュ中に近似を閉じると、カフが血管に挿入することができます。 7から0、周タイでは、カフ周りに、受信者の静脈ポルタを固定します。 </li><li>近似​​を削除します。ためには肝上の大静脈と下大ポルタにクランプを開きます。ポータルフローは、現在確立されます。 </li><li>極細はさみで9から0の合字を切断することにより、ポータルリングを取り外します。 </li><li>静脈リングハンドルに近似の尾の分岐を挿入し、頭蓋のスリットに移植の肝臓下の下大静脈に挿入<html>スロットにその位置を見つける静脈カフと近似のブランチ、。 </li><li>生理食塩水で、受信者の肝臓下の下大静脈のフラッシュ中に近似を閉じると、カフが血管に挿入することができます。 7から0、周タイでは、カフ周りに、受信者の下大静脈を確保する。 </li><li>近似​​を削除します。移植と順に、受信者の肝臓下の下大静脈にmicroclampsを開きます。血流は、現在確立されます。 </li><li>受信者の総胆管の部分的な切開を行い、頭に向かって穏やかなトラクションを適用し、以前にグラフトの胆管に挿入されたステントの自由側を挿入します。円周7から0タイでステントを固定します。 </li><li> 5から0縫合層によって動物を閉じます。覚醒から自由水と食料を許可します。 </li><li>ローカル機関のプロトコルに従って効果的な鎮痛を管理します。 24時間の最小持続時間が推奨されます。 </li></ol>_content &quot;ノートの&gt;：実験デザイン（動脈、ラット肝移植後の長期生存には必要ありません）によって、必要なときに、エンドツーエンドの肝動脈吻合は、実行することができます。 4。代表的な結果記載された技術は、正常の約10の​​訓練手術後、我々のチームでマスターすることができます。短い研修期間（同系肝移植レシピエントの数は、12歳以上のためにキープアライブされた後、それは、36の連続した​​ルイス·ツー·ルイスとダークアグーチ·ツー·ルイス移植の100％、長期（&gt; 21日間）の生存を許可ここ数ヶ月）。および中央アラニントランスアミナーゼ（ALT） - 84 U / L（92.7 51.7）：172.5 U / L（127.5から240.2）ポスト同系移植1日目肝機能検査では、中央値アスパラギン酸トランスアミナーゼ（AST）を示した。平均肝外性のフェーズでは、（静脈ポルタから再灌流移植にクランプ）14歳±肝上の下大静脈吻合という長いステップで2分、（sを実行するuture）時間9±2分。 クイックリンカシステムは、静脈ポルタ上で1.55ミリメートル口径袖口と下大静脈に2.40ミリメートル口径のカフス（200±20グラムの重量を量るの受信者）の位置決めを可能にした。対照的に、我々は鎌田の技術を使用して移植しようとしたとき、彼らは（株および重量のマッチングラット）は、それぞれ、1.40 mmおよび2.16 mmを超えることができませんでした。 図7に示すように、クイックリンカリングは近い·ツー·生理的血 ​​行動態の結果をもたらす最小のキャリパーと長さの消耗をできるように、ストレッチング、最適に受信者の船を維持するために設計されています。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="図1" /> 図1。リング対策。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="図2" /> 図2。Microclamps対策。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="図3" /> 図3。クイックリンカキット。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="図4" /> 図4クイックリンカ武装。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="図5" /> 図5。クイックリンカが閉じられました。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="図6" /> 図6。SHVCクランプ。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="図7" /> 図7。クラシック対クイックリンカアシストカフ吻合の循環動態。 <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="図8" /> 図8：ドナーとレシピエントの皮膚の準備と切開。

<ol>
	<li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver.">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447 (1965).</li><li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+liver+transplantation.">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47 (1979).</li><li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li><li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats:+A+surgical+guide.">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120 (2010).</li><li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system:+a+preliminary+result.">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li><li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li><li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation:+can+we+avoid+it.">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li><li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat.">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li><li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation:+role+of+portal+vein+clamping+time.">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li></ol>

利害の衝突が宣言されません。

現在のラット肝移植モデルを容易に確立することができます。我々の経験では、いくつかの重要なポイントは、死亡のリスク（≤20％）を最小限に抑えることができます。再灌流から最初の3時間以内に発生する早期死亡は、クランプ長いポータルの結果として、最も頻繁に腸梗塞によるものです。したがって、15分の理想的な制限（20分でも可）内肝外性の位相を維持することをお勧めします。中央の空気塞栓はまた、突然死の原因となることができ、それは前の吻合にすべての静脈をフラッシュするために必須です。 術後1と3の間に発生する死亡は、多くの場合、肝臓の障害や下大静脈の血栓症によるものである。一つは、したがって、ドナーの植（私たちは約60秒かけて20mlでフラッシュ）の前にフラッシング、任意の積極的な移植を回避し、適切な冷保存（0-4°Cリンガーの乳酸溶液に完全に浸漬）を確認する必要があります。血栓症のリスク内膜の操作を最小限に抑え、その整合性を保つことにより減少させることができる。我々は、手術後の抗凝固療法の使用をお勧めしません。 術後4と9の間の死亡は、多くの場合、細菌性胆管炎7に関連しています。我々の経験で、開腹手術は、一般的な胆管感染のリスクを最小限にするために十分である前に、与えられたpiperacilline /タゾバクタム（0.03 g）の単回投与に基づいています。 死は、10日後にまれなイベントです。しかし、動脈の流れの不在のため、いくつかの胆管の問題がcholastasis 8で観察することができます。治験責任医師のニーズに応じて動脈血は、9と考えられるかもしれません。ノートでは、冷虚血時間の24時間までは許容できる10として見なすことができます。 クイックリンカシステムは、当初は3カフ吻合（非常に短い肝外性の段階）で肝臓移植を実行するように設計されています。しかし、3カフTEchniqueは肝上の下大静脈（SHVC）カフのための非常に小さなキャリパーを使用する必要があり、それが広く肝臓流出問題11月14日の危険性があるため、受け入れられなかった。そこで我々は10分より短い温虚血時間が必要とされる唯一のクイックリンカアシスト三カフ技術を支持している。ほとんどの研究では、しかし、注入段階は、最大15から18分には、2つのカフテクニック、より生理的なSHVC排水を使用することができ、許容されます。このビデオの用紙に示されているように、我々は日常的にのみ注入の第二部でクイックリンカシステムを使用しています。いくつかの余分な手術時間はクイックリンカハンドルを配置するために必要とされる一方で、この手順の部分は、最小限のリスクに関連付けられており、簡単に袖口の挿入に重要な肝外性の位相のおかげで短縮することができます。クイックリンカシステムの他の利点は、優れた移植片レシピエントの血管の配置とに比べて優れた血行動態の結果と広い袖口の使用である前述の技術（鎌田らによって記述されたものを含む。）6（ 図7）。

<table border="1"><tbody><tr><td> ツール/試薬 </td><td> 会社 </td><td> カタログのn。 </td><td> コメント </td></tr><tr><td>ポータルカフ</td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a>または<a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">鍛冶-medical.com</a> </td><td>コイル01-96-1729 800/100/420 </td><td>ボア：1.55ミリメートル 壁：0.30ミリメートル 長さ：3.5ミリメートル</td></tr><tr><td>肝臓下の対静脈カフ</td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a>または<a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">鍛冶-medical.com</a> </td><td>コイル01-96-1733 800/100/540 </td><td>ボア：2.40ミリメートル 壁：0.30ミリメートル<br/&gt;長さ：3.5ミリメートル</td></tr><tr><td>総胆管ステント</td><td>一般的な22G venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7から0までシルクネクタイ</td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10から0プロレン</td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9から0プロレン</td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8から0プロレン</td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td>ストレートマイクロ鉗子</td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-および-t</a>。ネット</td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td>湾曲したマイクロ鉗子</td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-および-t.net</a> </td><td> FRS-15-RM-8 </td><td></td></tr><tr><td>解剖針ホルダー</td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-および-t.net</a> </td><td> B-15から8.2 </td><td></td></tr><tr><td>吻合の針ホルダー</td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td>マイクロクランプ</td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055から03 </td><td> 6×1ミリメートル</td></tr><tr><td>マイクロクランプアプリケータ</td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057から14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td>肝上の対静脈クランプ</td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td>クイックリンカリング</td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td>変更された外科用メスの刃</td></tr><tr><td>クイックリンカ近似</td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04から275 </td><td>変更されたコッヘルのforcep </td></tr></tbody></table>

orthotopic liver transplantation in rats

肝移植の分野での臨床経過は、主に動物モデル1,2によってサポートされています。鎌田ら3 1979の最初の同所性ラットの肝臓移植の出版以来、このモデルは、様々な提案された代替技術4にもかかわらず、金標準推移している。それにもかかわらず、その広範な使用は、急な学習曲線5によって制限されています。 このビデオ本稿では、鎌田の二つのカフテクニックのシンプルで簡単に確立するリビジョンを表示します。肝上の下大静脈吻合は、実行中の縫合糸を使用して手動で実行され、静脈ポルタと肝臓下の下大静脈吻合はクイックリンカカフシステム6を利用して行われます。製造クイックリンカーキットは、別のビデオの論文で示されています。

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Orthotopic Liver Transplantation in Rats

我々は簡単に確立するためにラット同所性肝移植のための古典的な2カフ法の改正を提示します。

ラット同所性肝移植

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Research

JoVE Journal

Medicine

29.6K ビュー.  University of Geneva Hospitals. 我々は簡単に確立するためにラット同所性肝移植のための古典的な2カフ法の改正を提示します。

ビデオ: Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and standardized not only for the study of allo-rejection but also between syngeneic strains for examining mechanisms of ischemia-reperfusion injury after lung transplantation. Although the application of the rat and other large animal model 2 contributed significantly to the elucidation of these studies, the scope of those investigations is limited by the scarcity of knockout and transgenic rats. Due to no effective therapies for obliterative bronchiolitis, the leading cause of death in lung transplant patients, there has been an intensive search for pre-clinical models that replicate obliterative bronchiolitis. The tracheal allograft model is the most widely used and may reproduce some of the histopathologic features of obliterative bronchiolitis 3. However, the lack of an intact vasculature with no connection to the recipient's conducting airways, and incomplete pathologic features of obliterative bronchiolitis limit the utility of this model 4. Unlike transplantation of other solid organs, vascularized mouse lung transplants have only recently been reported by Okazaki and colleagues for the first time in 2007 5. Applying the basic principles of the rat lung transplant, our lab initiated the obliterative bronchiolitis model using minor histoincompatible antigen murine orthotopic single-left lung transplants which allows the further study of obliterative bronchiolitis immunopathogenesis6.

Obliterative bronchiolitis is the key impediment to the long-term survival of lung transplant recipients and the lack of a robust preclinical model precludes examining obliterative bronchiolitis immunopathogenesis. Unlike other solid organ transplants, vascularized mouse lung transplantation has only recently been developed. Here we show our independently developed obliterative bronchiolitis model after murine orthotopic single-lung transplantation.

同所性肺移植のマウスモデルにおける閉塞性細気管支炎の開発

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

医学

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Small bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with short gut syndrome and failure of parenteral nutrition (irreversible intestinal failure). In specialized centers improved operative and managing strategies have led to excellent short- and intermediate term patient and graft survival while providing high quality of life 1,3. Unlike in the more common transplantation of other solid organs (i.e. heart, liver) many underlying mechanisms of graft function and immunologic alterations induced by intestinal transplantation are not entirely known6,7. Episodes of acute rejection, sepsis and chronic graft failure are the main obstacles still contributing to less favorable long term outcome and hindering a more widespread employment of the procedure despite a growing number of patients on home parenteral nutrition who would potentially benefit from such a transplant. The small intestine contains a large number of passenger leucocytes commonly referred to as part of the gut associated lymphoid system (GALT) this being part of the reason for the high immunogenity of the intestinal graft. The presence and close proximity of many commensals and pathogens in the gut explains the severity of sepsis episodes once graft mucosal integrity is compromised (for example by rejection). To advance the field of intestinal- and multiorgan transplantation more data generated from reliable and feasible animal models is needed. The model provided herein combines both reliability and feasibility once established in a standardized manner and can provide valuable insight in the underlying complex molecular, cellular and functional mechanisms that are triggered by intestinal transplantation. We have successfully used and refined the described procedure over more than 5 years in our laboratory 8-11. The JoVE video-based format is especially useful to demonstrate the complex procedure and avoid initial pitfalls for groups planning to establish an orthotopic rodent model investigating intestinal transplantation.

Small bowel transplantation has become an accepted treatment option for patients with irreversible intestinal failure. Our experimental model of orthotopic small bowel transplantation in rats serves as a reliable tool to address underlying immunologic and inflammatory processes that complicate intestinal transplantation.

ラット同所性小腸移植

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

血管疾患の研究のためのマウスにおける同所性大動脈移植

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

肝動脈再建を用いた部分同所性肝移植のラットモデルのための外科的処置

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation waiting list die without receiving an organ transplant or are delisted due to disease progression. Even after a successful transplantation, rejection and side effects of immunosuppression remain major concerns for graft survival and patient morbidity. 
Experimental animal research has been essential to the success of liver transplantation and still plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. In particular, the porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) is optimal for clinically oriented research for its close resemblance to human size, anatomy, and physiology. 
Decompression of intestinal congestion during the anhepatic phase of porcine OLTx is important to guarantee reliable animal survival. The use of an active porto-caval-jugular shunt achieves excellent intestinal decompression. The system can be used for short-term as well as long-term survival experiments. The following protocol contains all technical information for a stable and reproducible liver transplantation model in pigs including post-operative animal care.

Experimental animal research plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. The porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) closely resembles human conditions and is frequently used in clinically oriented research. The following protocol contains all information for a reliable porcine OLTx model using an active porto-caval-jugular shunt.

アクティブポルト大静脈シャントを使用して、ブタ肝臓調達と同所移植の技術

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and translational research in the field of transplantation medicine. A vast array of reagents is available exclusively in this setting, including mono- and polyclonal antibodies for both diagnostic and interventional applications. In addition, a vast number of genotyped, inbred, transgenic, and knock out strains allow detailed investigation of the individual contributions of humoral and cellular components to the complex interplay of an immune response and make the mouse the gold standard for immunological research. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) delineates a novel field of transplantation using allografts to replace "like with like" in patients suffering traumatic or congenital tissue loss. This surgical methodological protocol shows the use of a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis in an orthotopic mouse hind limb transplantation model. The model specifically allows for comparison between established paradigms in solid organ transplantation with a novel form of transplants consisting of various different tissue components. Uniquely, this model allows for the transplantation of a viable vascularized bone marrow compartment and niche that have the potential to exert a beneficial effect on the balance of immune acceptance and rejection. This technique provides a tool to investigate alloantigen recognition and allograft rejection and acceptance, as well as enables the pursuit of functional nerve regeneration studies to further advance this novel field of transplantation.

This novel model for orthotopic hind limb transplantation in the mouse, applying a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis, provides a powerful tool for in&#160;vivo mechanistic immunological research related to vascularized composite allotransplantation (VCA).

マウスで同所後肢移植

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

同所性同種のモデルラット Suprahepatic 上大静脈再建のため新規磁気吻合法を用いた肝移植

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

オルソトピック心臓移植の前臨床ブタモデル

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

ラット型異形肝移植モデルにおける動脈リコネクション後の合併症の減少

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. However, lung transplantation is limited by a shortage of available donor organs. As such, there is high waitlist mortality. Ex situ lung perfusion (ESLP) has increased donor lung utilization rates in some centers by 15%-20%. ESLP has been applied as a method to assess and recondition marginal donor lungs and has demonstrated acceptable short- and long-term outcomes following transplantation of extended criteria donor (ECD) lungs. Large animal (in vivo) transplantation models are required to validate ongoing in vitro research findings. Anatomic and physiologic differences between humans and pigs pose significant technical and anesthetic challenges. An easily reproducible transplant model would permit the&#160;in vivo&#160;validation of current ESLP strategies and the preclinical evaluation of various interventions designed to improve donor lung function. This protocol describes a porcine model of orthotopic left lung allotransplantation. This includes anesthetic and surgical techniques, a customized surgical checklist, troubleshooting, modifications, and the benefits and limitations of the approach.

This protocol describes a juvenile porcine model of orthotopic left lung allotransplantation designed for use with ESLP research. Focus is made on anesthetic and surgical techniques, as well as critical steps and troubleshooting.

ESLPのブタ幼体モデルにおける左肺同所性移植

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...