We thank M. Kapitza, Margit Henry, Tamara Rotshteyn, Susan Rohani and Cornelia B&#246;ttinger for excellent technical support. This work was supported by grants from the German Research Foundation (RTG 1331) and the German Ministry for Research (BMBF).

<ol>
	<li>Liu, W. W., Deng, Y. G., Liu, Y., Gong, W. R., Deng, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+Cell+Models+for+Drug+Discovery+and+Toxicology+Studies.">Stem Cell Models for Drug Discovery and Toxicology Studies.</a> Journal of Biochemical and Molecular Toxicology. 27 (1), 17-27 (2013).</li><li>Zuba-Surma, E. K., Jozkowicz, A., Dulak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+Cells+in+Pharmaceutical+Biotechnology.">Stem Cells in Pharmaceutical Biotechnology.</a> Current Pharmaceutical Biotechnology. 12 (11), 1760-1773 (2011).</li><li>Leist, M., Hartung, T., Nicotera, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dawning+of+a+new+age+of+toxicology.">The dawning of a new age of toxicology.</a> ALTEX. 25 (2), 103-114 (2008).</li><li>Kuegler, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Markers+of+murine+embryonic+and+neural+stem+cells,+neurons+and+astrocytes:+reference+points+for+developmental+neurotoxicity+testing.">Markers of murine embryonic and neural stem cells, neurons and astrocytes: reference points for developmental neurotoxicity testing.</a> ALTEX. 27 (1), 17-42 (2010).</li><li>Yamada, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+oocytes+reprogram+adult+somatic+nuclei+of+a+type+1+diabetic+to+diploid+pluripotent+stem+cells.">Human oocytes reprogram adult somatic nuclei of a type 1 diabetic to diploid pluripotent stem cells.</a> Nature. , (2014).</li><li>Chambers, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+neural+conversion+of+human+ES+and+iPS+cells+by+dual+inhibition+of+SMAD+signaling.">Highly efficient neural conversion of human ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling.</a> Nature Biotechnology. 27 (3), 275-280 (2009).</li><li>Takasato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directing+human+embryonic+stem+cell+differentiation+towards+a+renal+lineage+generates+a+self-organizing+kidney.">Directing human embryonic stem cell differentiation towards a renal lineage generates a self-organizing kidney.</a> Nature cell biology. 16 (1), 118-126 (2014).</li><li>Zimmer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Developmental+Toxicants+and+Signaling+Pathways+in+a+Functional+Test+Based+on+the+Migration+of+Human+Neural+Crest+Cells.">Evaluation of Developmental Toxicants and Signaling Pathways in a Functional Test Based on the Migration of Human Neural Crest Cells.</a> Environmental Health Perspectives. 120 (8), 1116-1122 (2012).</li><li>Bosman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+Functional+Evidence+of+HCN4+and+Caveolin-3+Interaction+During+Cardiomyocyte+Differentiation+from+Human+Embryonic+Stem+Cells.">Molecular and Functional Evidence of HCN4 and Caveolin-3 Interaction During Cardiomyocyte Differentiation from Human Embryonic Stem Cells.</a> Stem Cells and Development. 22 (11), 1717-1727 (2013).</li><li>Sartiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+cardiomyocytes+differentiated+from+human+embryonic+stem+cells:+A+molecular+and+electrophysiological+approach.">Developmental changes in cardiomyocytes differentiated from human embryonic stem cells: A molecular and electrophysiological approach.</a> Stem Cells. 25 (5), 1136-1144 (2007).</li><li>Xu, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+defined+medium+supporting+cardiomyocyte+differentiation+of+human+embryonic+stem+cells.">Chemically defined medium supporting cardiomyocyte differentiation of human embryonic stem cells.</a> Differentiation. 76 (9), 958-970 (2008).</li><li>Pal, R., Mamidi, M. K., Das, A. K., Bhonde, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+cardiomyocyte+differentiation+from+human+embryonic+stem+cells+under+3-D+and+2-D+culture+conditions.">Comparative analysis of cardiomyocyte differentiation from human embryonic stem cells under 3-D and 2-D culture conditions.</a> Journal of Bioscience and Bioengineering. 115 (2), 200-206 (2013).</li><li>Subramanian, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spheroid+Culture+for+Enhanced+Differentiation+of+Human+Embryonic+Stem+Cells+to+Hepatocyte-Like+Cells.">Spheroid Culture for Enhanced Differentiation of Human Embryonic Stem Cells to Hepatocyte-Like Cells.</a> Stem Cells and Development. 23 (2), 124-131 (2014).</li><li>Sivertsson, L., Synnergren, J., Jensen, J., Bjorquist, P., Ingelman-Sundberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+Differentiation+and+Maturation+of+Human+Embryonic+Stem+Cells+Cultured+in+a+Perfused+Three-Dimensional+Bioreactor.">Hepatic Differentiation and Maturation of Human Embryonic Stem Cells Cultured in a Perfused Three-Dimensional Bioreactor.</a> Stem Cells and Development. 22 (4), 581-594 (2013).</li><li>Jagtap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytosine+arabinoside+induces+ectoderm+and+inhibits+mesoderm+expression+in+human+embryonic+stem+cells+during+multilineage+differentiation.">Cytosine arabinoside induces ectoderm and inhibits mesoderm expression in human embryonic stem cells during multilineage differentiation.</a> British Journal of Pharmacology. 162 (8), 1743-1756 (2011).</li><li>Krug, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cell-derived+test+systems+for+developmental+neurotoxicity:+a+transcriptomics+approach.">Human embryonic stem cell-derived test systems for developmental neurotoxicity: a transcriptomics approach.</a> Archives of Toxicology. 87 (1), 123-143 (2013).</li><li>Leist, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Test+systems+of+developmental+toxicity:+state-of-the+art+and+future+perspectives.">Test systems of developmental toxicity: state-of-the art and future perspectives.</a> Archives of Toxicology. 87 (12), 2037-2042 (2013).</li><li>Itskovitz-Eldor, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+human+embryonic+stem+cells+into+embryoid+bodies+compromising+the+three+embryonic+germ+layers.">Differentiation of human embryonic stem cells into embryoid bodies compromising the three embryonic germ layers.</a> Molecular medicine. 6 (2), 88-95 (2000).</li><li>Khoo, M. L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+differentiation+of+embryoid+bodies+derived+from+human+embryonic+stem+cells:+Effect+of+glucose+and+basic+fibroblast+growth+factor.">Growth and differentiation of embryoid bodies derived from human embryonic stem cells: Effect of glucose and basic fibroblast growth factor.</a> Biology of Reproduction. 73 (6), 1147-1156 (2005).</li><li>Son, M. Y., Kim, H. J., Kim, M. J., Cho, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+Passaging+of+Embryoid+Bodies+Generated+from+Human+Pluripotent+Stem+Cells.">Physical Passaging of Embryoid Bodies Generated from Human Pluripotent Stem Cells.</a> Plos One. 6 (5), (2011).</li><li>Winkler, J., Sotiriadou, I., Chen, S., Hescheler, J., Sachinidis, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+embryonic+stem+cells+combined+with+-omics+technologies+as+model+systems+for+toxicology.">The potential of embryonic stem cells combined with -omics technologies as model systems for toxicology.</a> Current medicinal chemistry. 16 (36), 4814-4827 (2009).</li><li>Gunaseeli, I., Doss, M. X., Antzelevitch, C., Hescheler, J., Sachinidis, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+as+a+model+for+accelerated+patient-+and+disease-specific+drug+discovery.">Induced pluripotent stem cells as a model for accelerated patient- and disease-specific drug discovery.</a> Current medicinal chemistry. 17 (8), 759-766 (2010).</li><li>Miller, M. T., Stromland, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Teratogen+update:+Thalidomide:+A+review,+with+a+focus+on+ocular+findings+and+new+potential+uses.">Teratogen update: Thalidomide: A review, with a focus on ocular findings and new potential uses.</a> Teratology. 60 (5), 306-321 (1999).</li><li>Newman, C. G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Teratogen+Update+-+Clinical+Aspects+of+Thalidomide+Embryopathy+-+A+Continuing+Preoccupation.">Teratogen Update - Clinical Aspects of Thalidomide Embryopathy - A Continuing Preoccupation.</a> Teratology. 32 (1), 133-144 (1985).</li><li>Stern, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+assessment+of+the+teratogenic+potential+of+drugs+in+humans.">In vivo assessment of the teratogenic potential of drugs in humans.</a> Obstetrics and gynecology. 58 (5 Suppl), 3S-8S (1981).</li><li>Lynch, H. T., Reich, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diethylstilbestrol,+Genetics,+Teratogenesis,+and+Tumor+Spectrum+in+Humans.">Diethylstilbestrol, Genetics, Teratogenesis, and Tumor Spectrum in Humans.</a> Medical Hypotheses. 16 (3), 315-332 (1985).</li><li>Satoh, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+teratology+of+mercury+and+its+compounds.">Behavioral teratology of mercury and its compounds.</a> Tohoku Journal of Experimental Medicine. 201 (1), 1-9 (2003).</li><li>Meganathan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Thalidomide-Specific+Transcriptomics+and+Proteomics+Signatures+during+Differentiation+of+Human+Embryonic+Stem+Cells.">Identification of Thalidomide-Specific Transcriptomics and Proteomics Signatures during Differentiation of Human Embryonic Stem Cells.</a> Plos One. 7 (8), (2012).</li><li>Balmer, N. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+changes+and+disturbed+neural+development+in+a+human+embryonic+stem+cell-based+model+relating+to+the+fetal+valproate+syndrome.">Epigenetic changes and disturbed neural development in a human embryonic stem cell-based model relating to the fetal valproate syndrome.</a> Human Molecular Genetics. 21 (18), 4104-4114 (2012).</li><li>Smirnova, L., Hogberg, H. T., Leist, M., Hartung, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+neurotoxicity+-+Challenges+in+the+21st+Century+and+In+Vitro+Opportunities.">Developmental neurotoxicity - Challenges in the 21st Century and In Vitro Opportunities.</a> ALTEX. 31 (2), 129-156 (2014).</li><li>Leist, M., Efremova, L., Karreman, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+for+thought+...+considerations+and+guidelines+for+basic+test+method+descriptions+in+toxicology.">Food for thought ... considerations and guidelines for basic test method descriptions in toxicology.</a> ALTEX. 27 (4), 309-317 (2010).</li><li>Zimmer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+waves+of+gene+expression+during+neuronal+differentiation+of+embryonic+stem+cells+as+basis+for+novel+approaches+to+developmental+neurotoxicity+testing.">Coordinated waves of gene expression during neuronal differentiation of embryonic stem cells as basis for novel approaches to developmental neurotoxicity testing.</a> Cell Death and Differentiation. 18 (3), 383-395 (2011).</li><li>Kraljevic, S., Stambrook, P. J., Pavelic, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerating+drug+discovery.">Accelerating drug discovery.</a> EMBO Reports. 5 (9), 837-842 (2004).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

毒性試験への従来のアプローチは、このように試験が高コストと時間のかかる大規模な製造動物実験を伴います。また、種間の差異に起因する前臨床動物安全性試験は、ヒトに関連可能性のある薬剤の毒性効果を予測することは必ずしも有効ではありません。ヒト以外の霊長類は、最も予測可能であるが、まだ強い倫理的、および社会経済的需要が急速に生体外試験で高感度か?...

細胞の様々なタイプに分化するヒト胚性幹細胞（hESCの）の能力は、in vitro毒性試験1、疾患のモデリングおよび再生医療2の新時代を開きました。幹細胞はそれらの多能性状態を維持するために、および特殊化した細胞3,4に分化するように、自己複製する能力に恵まれています。ヒトES細胞（全ての主要な細胞型に分化する能力）の特性はまた、核移植5によって生成されたヒト誘導多能性幹細胞（hiPSC）または細胞などの他のヒト多能性幹細胞に見出されます。例えば、多くの異なるhESC株は、ニューロン6、腎細胞7、神経堤細胞8、心筋9-12、またはセル13,14のような肝細胞に分化されています。また、ヒトES細胞は自発的に胚様体（EB）19,20内のすべての3つの胚葉15-18の細胞に分化することができます。 Eアーリー胚発生は、マイクロアレイ技術15を用いてトランスクリプトによってmRNAレベルで捕捉された異なる胚葉に関連する種々の遺伝子の差次的発現により調節されます。これらの努力は、ヒトES細胞/ hiPSCとトランスクリプトーム解析（レビューのために21,22を参照）に基づいて、器官特異的毒性学的モデルの確立をもたらしました。実験動物を用いた前臨床研究は、常に人間の安全性の予測ではないように、これらのモデルは、毒性学的研究のための実験動物の伝統的な使用上の利点を有しています。患者に遭遇する薬剤誘発される毒性は、多くの場合、ヒトと実験動物の間で異なる代謝またはシグナル伝達プロセスに関連しています。種の違いは、ヒトにおける発生毒性の信頼性の早期検出を防止していて、例えば、そのようなサリドマイド23,24およびジエチル25,26のような薬剤は、催奇形性のために市場から撤退しました。ターリーdomideは、ラットまたはマウスのいずれかの発生毒性を示されていません。例えば、メチル水銀27などの環境化学物質は、種々の種における神経系に対する出生前発生毒性をもたらしたが、人間の症状は動物でモデル化することは困難でした。種特異性の問題の問題に対処するために、別のプロジェクトの下で働く科学者などに疑われる人の毒物を使用して、胚毒性、神経毒性、心毒性、肝毒性および腎毒性のために、異なるモデルの開発に従事している再保護、ESNATS、探偵のような幹細胞に基づきます人間に影響を与えます。欧州コンソーシアムプロジェクト「胚性幹細胞ベースの新しい代替試験戦略（ESNATS）」の下では5個の試験システムが確立されています。一つの試験システム、いわゆるUKK（UniversitätsK linikum K OLN）テストシステムは、部分的に初期ヒト胚発生をキャプチャします。このS INystemヒト胚性H9細胞は、15および胚葉特定の署名がアフィメトリクスマイクロアレイプラットフォームを使用して、トランスクリプトミクスプロファイルによって撮影された三胚葉（外胚葉、内胚葉および中胚葉）に区別されます。サリドマイド28、バルプロ酸、メチル水銀16,17、またはシトシンアラビノシド15のような種々の発生毒性物質は、このシステムで試験されている、及び毒物特定の遺伝子シグネチャーが得られました。第二の試験システムでは、そのように検査システム1 UKN1（K onsta N Z のU niversity）と呼ばれる、H9細胞を6日間神経外胚葉前駆細胞（NEP）に区別されます。これは、PAX6とOTX2などの神経遺伝子マーカーの高発現によって証明されている。6日間分化の間に、NEP細胞は、VPA、メチル水銀などの発達神経毒性物質にさらされています。毒物固有の脱規制トランスクリプトミクスプロファイルはobtaiされていますアフィメトリクスマイクロアレイプラットフォーム16,29を用いて、同様に定義さ。 21 世紀の毒物学のための新しいビジョンは、テスト·システムにのみ、長期的な毒物のインキュベーションの最後に、in vivoで組織病 ​​理学、またはトランスクリプトームの変化のような表現型の説明が得られていないことを想定しています。むしろアッセイは機構的情報3、およびこの情報は危険な影響30のための科学的根拠を提供し、いわゆる有害転帰の経路（AOP）にマッピングすることができることを提供することを示唆しています。このような情報を提供するために、適用されるテストシステムは非常に質が強固な標準操作手順によって文書として例えば、31を制御する必要があります。また、時間依存性の変化は、高分解能でマッピングされる必要があります。これは、同期の変化32とテストシステムを必要とします。ここで説明UKN1とUKKテストシステムは、これらの要件のために最適化されています。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>11320082</td>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium:Nutrient Mixture F-12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOSR</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>10828028</td>
			<td>Knockout Serum Replacement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>35050061</td>
			<td>GlutaMAX supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NEAA</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>11140050</td>
			<td>MEM Nonessential Amino Acids Solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>14190-0144</td>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Saline, without calcium, without magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mTeSR medium</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>5850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F-127</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P2443-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V bottom plate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>734-0483</td>
			<td>Plate,Microwell,V BTTM,96 Well,Sterile 1 * 50 ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vbottom plate lid</td>
			<td>VWR</td>
			<td>634-0011</td>
			<td>Lid, Microtitre plates, Cond. Ring 1 * 50 ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Penicillin- Streptomycin, Liquid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled Water</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15230-089.</td>
			<td>Sterile Distilled Water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human FGF-2 (bFGF)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>GF003AF-100UG</td>
			<td>Fibroblast Growth Factor basic, human recombinant, animal-free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter 0.22 &#956;m</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SCGPU02RE</td>
			<td>Stericup-GP, 0.22 &#956;m, polyethersulfone, 250 ml, radio- sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StemPro EZPassageTM Disposablte</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>23181010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD MatrigelTM, hESC qualified Matrix</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>354277</td>
			<td>5 ml vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D-2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAlater Stabilization Solution</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>AM7020</td>
			<td>It stabilizes and protect the RNA integrity in unfrozen samples.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#956;m Cell Strainer</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>352350</td>
			<td>Cell strainer with 70 &#956;m Nylon mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 &#956;m Lid cell strainer, 5 ml tube</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>352235</td>
			<td>5 ml polystyrene round bottom test tube, with a cell strainer cap (35 &#956;m)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml sterile Polypropylene tube</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>227261</td>
			<td>50 ml Polypropylene tube with conical bottom, Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 flask</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>658175</td>
			<td>CELLSTAR Filter Cap Cell Culture 75 cm2 Flasks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>10296010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well optical bottom plates</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>165305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellTiter-Blue</td>
			<td>Promega</td>
			<td>G8081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>PAA</td>
			<td>L11-007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Apotransferin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T-2036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Worthington Biochemicals</td>
			<td>LS002104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dorsomorphin</td>
			<td>Tocris Bioscience</td>
			<td>3093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Roth</td>
			<td>8043.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>PAA</td>
			<td>A15-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF-2</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>233-FB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G1890-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G7021-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>35050-038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>15630-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I-6634</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Knockout DMEM</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>10829-018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>354234</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noggin</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>719-NG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td>L1825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesteron</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P-5780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ROCK inhibitor Y-27632</td>
			<td>Tocris Biosciences</td>
			<td>1254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB431542</td>
			<td>Tocris Biosciences</td>
			<td>1614</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>161-0416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Selenium</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S-5261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Mercaptoethanol</td>
			<td>Gibco Invitrogen</td>
			<td>31350-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>List of Kits</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Mini Kit (250)</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>74106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GeneChip Hybridization, Wash, and Stain Kit</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td>900721, 22, 23</td>
			<td>This kit provides all reagents required for hybridization wash and staining of microarrays.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rnase-Free DNase Set</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>79254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">List of equipment.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td>IX71</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Genechip Hybridisation Oven - 645</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Genechip Fluidics Station-450</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Affymetrix Gene-Chip Scanner-3000-7 G</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectramax M5</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>List of softwares</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prism 4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Affymetrix GCOS</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Partek Genomic Suite 6.25</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Online tools for Functional annotation 
			DAVID 
			Onto-tools Intelligent Systems and Bioinformatics Laboratory</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

human pluripotent stem cell based developmental toxicity assays for chemical safety screening and systems biology data generation

-omics技術と組み合わせて、様々な組織にヒト多能性幹細胞を区別するための効率的なプロトコルは、潜在的な薬剤のインビトロ毒性試験のための新しい展望を開きます。このようなアッセイのための強固な科学的基礎を提供するためには、開発の時間経過にとシステム生物学のアプローチにより、基礎となる調節機構の定量的な情報を得ることが重要となります。 2つのアッセイは、したがって、これらの要件のためにここに調整されています。 UKK試験システムでは、ヒト胚性幹細胞（hESCの）（または他の多能性細胞）が自然にすべての3つの胚葉の細胞の生成を可能にするために、胚様体における14日間分化するように残されます。このシステムは、初期ヒト胚発生の重要なステップを再現すると、細胞が分化の間の化学物質にさらされている場合には、ヒト特異的な初期胚毒性/催奇形性を予測することができます。 UKN1試験システムはpopulatに分化するヒトES細胞に基づいています6日間の神経外胚葉前駆（NEP）は、細胞のイオン。このシステムは、初期の神経発達を再現すると、初期の発達神経毒性と化学物質によって引き起こさエピジェネティックな変化を予測します。両方のシステムは、トランスクリプトームのマイクロアレイ研究と組み合わせて、毒性のバイオマーカーを同定するのに適しています。さらに、それらはシステム生物学の分析のための入力データを生成するために組み合わせて使用​​することができます。これらの試験系は、動物を大量に必要とする伝統的な毒性試験を超える利点を有します。試験システムは、薬物開発及び化学物質安全性評価のためのコストの低減に寄与し得ます。それらの組み合わせは、特に具体的に神経発達に影響を与える可能性がある化合物に光を投げかけて。

UKKテストシステム中のメチル水銀暴露細胞毒性アッセイは、メチル水銀の毒性（ 図1）のためのIC 10値（10％生存性の減少）を得るH9のEBを用いて行きました。また、ベースのマイクロアレイ（Affymetrix社のプラットフォーム）バイオマーカーの研究を行いました。 H9 EBは14日間メチル水銀（0.25および1μM）に暴露されました。 14日目に、試料は、トリゾ?...

Watch this Scientific Journal Video about Human Pluripotent Stem Cell Based Developmental Toxicity Assays for Chemical Safety Screening and Systems Biology Data Generation at JoVE.com

Human Pluripotent Stem Cell Based Developmental Toxicity Assays for Chemical Safety Screening and Systems Biology Data Generation

プロトコルは、ヒト胚性幹細胞およびトランスクリプトーム研究に基づいて、2つのin vitro発生毒性試験システム（UKKとUKN1）を記述します。試験系は、ヒトの発生毒性の危険性を予測し、動物実験、コストおよび化学安全性試験のために必要な時間を短縮するために寄与することができます。

化学物質安全性のスクリーニングおよびシステム生物学データの生成のために発生毒性アッセイベースのヒト多能性幹細胞

Efficient protocols to differentiate human pluripotent stem cells to various tissues in combination with -omics technologies opened up new horizons for in ...

human-pluripotent-stem-cell-based-developmental-toxicity-assays-for

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

12.4K ビュー.  University of Cologne. プロトコルは、ヒト胚性幹細胞およびトランスクリプトーム研究に基づいて、2つのin vitro発生毒性試験システム（UKKとUKN1）を記述します。試験系は、ヒトの発生毒性の危険性を予測し、動物実験、コストおよび化学安全性試験のために必要な時間を短縮するために寄与することができます。 