ラットにおける血液サンプル採取の代替方法として鎖骨下静脈穿刺.全身麻酔後、ラットをスペイン位置に置き、75%エタノールで破砕膜空間を殺菌する。穿刺前に優れた胸骨窩を特定する。
穿刺部位を見つけ、同じ側の鎖骨の外側の3分の1の領域に尾を向ける。針の方向は、上胸骨窩に向かって配置され、鎖骨にほぼ平行であるべきです, ちょうどそれに後部.採血後、穿刺部位を1~2分間押し、出血を止める。
十分な量の採血は動物実験で常に必要とされる。ラットの尾静脈からの採血は、レトロ眼窩叢サンプル採取などのいくつかの積極的な方法よりも人気があり、ストレスが少ない。ただし、この方法は成功率によって制限されます。
ここでは、鎖骨下静脈からの所望の血液量を有する採血方法について紹介する。我々の結果は、この方法が安全で実用的であり、尾静脈からの血液サンプリングが失敗した場合に考慮されるかもしれないことを示している。開始するには、粘着テープ、上着剤、75%エタノール、採血管、2点5ミリリットルシリンジ、ヘアヘイバー、電子スケール、ヘパリン、生理食塩水を調製する。
標準的な条件下でラットを収容し、食料と飲料水への自由なアクセスを伴い、木製シェービング寝具付きの530平方センチメートルのケージに保管されています。穿刺前に腹腔内注射を通して全ての動物に全身麻酔を誘発する。ラットを上肢の位置に置き、後肢を快適な位置に固定し、上肢を胴体のすぐ横に固定します。
毛皮と目に見える汚れを取り除くために、赤外線空間の両側をきれいにしてください。75%エタノールで首と胸部の皮膚を拭き、ガーゼで清潔に乾燥させておきます。鎖骨下静脈の両側は穿刺に適しており、ここでは穿刺のために右側を選択します。
右鎖骨の位置と方向をオペレータの左手の親指で特定し、人差し指で優れた胸骨窩を優しく見つけます。10単位/ミリリットルヘパリン溶液でシリンジをすすいでください。穿刺部位を見つけ、右鎖骨の外側の3分の1の領域に5ミリメートルの尾を向ける。
注射器を穿刺部位の皮膚にそっと動かします。針が破砕皮に入ったら、オペレータの右手を通してアクティブな圧力を加える。針の方向は、上胸骨窩に向かって配置され、鎖骨にほぼ平行に、ちょうどそれの後部であるべきです。
通常、鎖骨下静脈は、この方向に約2ミリメートルの針を挿入することによって到達することができる。針が静脈に入ると、血液は活発な圧力下で注射器に入ります。その後、血液の適切な量が引き出されるまで、アクティブな圧力を維持する必要があります。
採血後、穿刺針を取り出し、穿刺部位を1~2分間押して出血を止める。注意してください:圧力はチョークを防ぐために非常に穏やかでなければなりません。血液サンプルを1600GのEDTAと遠心分離機で10分間、血液サンプルを抗凝固真空管に10分間移し、血漿を採取します。
スーパーナテントを吸引してチューブを再洗浄し、マイナス18°Cで保管します。熟練したオペレータと初心者の間の成功率を比較するために、20匹のSDラットを無作為に2つのグループに分けた。結果は、右鎖骨下静脈を介して、熟練した群の9匹のラットと初心者群の8匹のラットがそれぞれ成功したことを示している。
その後、残りの3匹のラットからの採血は左側を通って成功した。成功率は、これら2つのグループの間に有意な差はなかった。この2つのグループでは、タイムコースが若干異なっていました。
手術中または手術後に気胸、血中神経胸、出血などの重篤な合併症は起こらなかった。すべての動物は血液採取後に生き残った。穿刺手順を学ぶことの難を実証するために、我々はさらに熟練者と初心者グループ間の引き出しの数を比較しました。
表2に示すように、熟練したグループの平均引き出し数は初心者よりもわずかに少ないが、統計的有意性はない。結論として、我々の結果は、血液採取のための鎖骨下静脈穿刺戦略がラットにおいて安全で実行可能であることを示している。この方法は、特に大量の血液が必要な場合に、貴重です。
従来の血液サンプリングが失敗した場合、この方法は最適な代替手段となる可能性があります。
