徐々に冷却プロトコルは、現在の実験方法よりも冷却速度が遅い。このモデルは、目標温度までの時間が人間の範囲に近いため、臨床的に関連しています。これらの技術の主な利点は、そのシンプルさと安価です。
さらに、これらのモデルは専門装置を必要としない。徐々にモデルから達成された冷却の臨床率は、脳卒中患者のための処置として低体温症の利点に関するより多くの情報に基づいた前臨床調査を可能にする。まず、麻酔をかけたラットを、鼻をコーンに入れた後、スピーヌの位置にある外科用ヒートマットの上に置くことから始めます。
外科用テープで鼻を固定します。右下腹部から毛皮を剃り、皮下に0.05%ブピバカインの200マイクロリットルを局所麻酔薬として注入する。剃りたての地域に消毒液を塗布します。
右腹部領域に沿って右腹部に近い右太根切開を右太ももに沿って2センチの深部にして、腹側大腿折り目のスペースを露出させ、止頭足と鉗子を使用して、データロガー装置を保持するのに十分な大きさの皮膚の下にポケットを作ります。温度監視データロガーデバイスをポケットに挿入し、5-0縫合糸を使用して筋肉と皮膚を閉じ、データロガーが加熱マットに対して休んでいないことを確認します。活性低体温症を誘導するために、まず1位のレトルトスタンドは、ラットの頭部から20センチメートル、下腹部から120センチメートルのクランプで、ラットの腰に向かってファンを向けたファンを持つ各スタンドに毎分設定して60ミリメートル12ボルトファンを取り付ける。
低体温症を起用する目的の目標温度にヒートマットを調整し、両方のファンをオンにします。傾向のある位置では、より速い冷却誘導のために毛皮をフリルしながら、そして直腸温度を注意深く監視しながら、ラットの腰に5分ごとに70%エタノールの3つまたは4つのスプレーを適用します。直腸温度が目標温度の1度以内の場合は、エタノールの塗布を停止します。
温度が目標の0.5度以内の場合は、ファンをオフにして、温度が過度に冷却することなく目標にゆっくりと下がるようにします。オーバー冷却の場合は、1つのファンを動物のヒートランプに交換し、ヒートランプを使用して動物を目標温度まで穏やかに暖めます。目標温度に達して安定したら、残りの低体温期間の温度を監視します。
低体温期の終わりに、ヒートマットを摂氏37度に設定し、動物が30分間にわたって熱調節できるようにします。臨床的に達成可能な徐々に低体温を誘導するために、コア温度調節ホーム温暖マットの温度を小さな増分で下げ、特定の所定期間内に低体温を達成する。目標温度に達したら、外部冷却を行わずに目的の間隔で目標温度を維持します。
低体温期の終わりに動物を再暖めするには、熱マットを調整して、ラットが所望の時間間隔で摂氏37度に再暖められるようにします。いずれかのタイプの低体温実験が完了したら、データロガーを取り外して、記録された体温を分析できるようにします。この解析では、実証したように、低体温は15分で32.5°Cの目標温度に急速に冷却して達成されました。
目標温度より約0.5°C以上の冷却を止めることができないため、わずかな温度オーバーシュートが観察されます。目標温度は30分間維持され、再温暖化は1.5時間で開始された。この実験では、徐々に低体温誘導アプローチを使用して、摂氏33度の目標温度に2時間で到達できるようにした。
目標温度は、2.5時間で再温暖化する前に30分間維持した。徐々に冷却技術は、より臨床的に関連する冷却速度がラットの虚血性脳卒中後の頭蓋内圧上昇を防ぐかどうかを調査する。
