肺高血圧症と右心室不全の大型動物モデル:羊の左肺動脈結紮と進行性主肺動脈バンディング

このプロトコールは、右心室の適応および障害を研究するための大型動物モデルである。したがって、このモデルは、肺高血圧症を治療するためのRV標的治療薬の開発に不可欠です。このモデルは、RV適応を滴定するための戦略として使用することができる負荷後に正しいRVを徐々に増加させる。

以前の大型動物モデルは、RV表現型に対してこのような制御を有していない。その外科的処置を実証するのは、マシュー・バケッタ博士、研究室長、外科フェローの医師ジョン・ストークス、ケリー・ウー、ヤトリック・パテルです。肺動脈バンディング手順を実演する。

麻酔後、羊の首から上腹部まで手術場を剃ることから始めます。石鹸またはスクラブブラシを使用して、手術場の汚れやその他の汚染物質をきれいにしてください。胸部の首をクロルヘキシジンまたはベタイン溶液で準備し、手術野を滅菌方法でドレープする。

メディアスタイルの露出を得るために、切開長が8センチメートル未満の左第4肋間腔で筋肉温存ミニ開胸術を行う。小型または中型のフィノキエットリトラクターを使用して、肋間腔内のフィノキエットに垂直に座るように凝灰岩リトラクターで肋骨を分離し、肋間腔内の軟部組織を後退させ、横隔神経を傷つけることなく曝露を改善し、心膜内部を切開し、2/0シルク縫合糸で心膜ウェルを作成して主肺動脈および右心室を露出させる。被ばく中の左心房付属器を主肺動脈の周りの肺動脈分岐部解剖のレベルの目印として特定し、臍テープで隔離する。

左肺動脈の心膜内郭清を行い、臍帯テープで囲む。主肺動脈の周りに頑丈なシリコーン血管オクルーダーを置きます。キースの針に0シルク縫合糸を使用した。

血管オクルーダの端部をUステッチで固定します。主肺動脈の周囲に固定されると、主肺動脈に沿ってオクルーダーを遠位にスライドさせる。右心室圧ラインを確立するには、選択した場所を囲むプレジェットで5/0モノフィラメント非吸収性ポリプロピレンパーサー縫合糸を配置し、血管スネアを見ることから始めます。

心筋への挿入を容易にするために、滅菌された36インチ圧力チューブの雄端を30度の角度で切断することによって、右心室圧ラインを準備する。次に、2/0シルクタイを使用して、右心室内に配置するのに最適な深さで圧力線をマークします。生検パンチを使用して、右心室流出管または以前に配置されたパーサーストリング縫合糸内のRVOTフリーウォールで小さな心臓切除を行う。

手動圧力で出血を制御するか、パーサー縫合糸のスネアを締め付けます。圧力チューブの切断端をRVOTに挿入して固定します。財布の紐を縛り、財布の紐を圧力チューブに固定して圧力ラインを固定します。

追加の圧力チューブをRVOT圧力ラインに接続して、RVOTチューブを延長します。ベースライン、右心室圧の測定のためのモニター。左肺動脈の周りを慎重に解剖する 左肺動脈を臍帯テープで囲んで結紮します。

RVOT圧力線と肺動脈閉塞チューブを胸部から胸部開頭部の1つの肋間腔から取り出します。留置口の部位をマークするために、羊の左背骨の筋膜層に沿って、滅菌フィールド内で可能な限り脊椎に向かって後方まで2つの硬膜下ポケットを形成する。胸部チューブポーラーを使用して、胸部切開部から左背甲門部位までRVOT圧力ラインとオクルーダーチューブをトンネルします。

オクルーダチューブと右心室圧ラインの両方をポートのバーブ接続に固定します。オクルーダと圧力チューブをポートコネクタの周りに固定し、追加のネクタイを付けます。ポートの移動を防ぐために、3/0ポリプロピレン縫合糸で縁の周りの3つの場所にポートを下層の筋膜に固定します。

皮下組織真皮および皮膚をポリグラクチン910縫合糸で層状に再近似する。RVOTポートを5ミリリットルのヘパリンナトリウムで洗い流します。8つの数字の数字で開胸術を閉じます ポリグラクチン910縫合糸 次に、ランニングナンバー0のポリグラクチン910で胸筋層を閉じます。

最後に、ランニングナンバー2/0ポリグラクチン910縫合糸の層で皮下組織を閉じ、皮膚をホチキス止めする。監視用に2つの圧力トランスデューサ、右心室およびオクルーダカフ圧を準備します。動物が軽度に拘束された後、フーバー針を右心室圧トランスデューサから右心室口に挿入する。

5ミリリットルのシリンジを三方ストップコックに取り付け、右心室口からシリンジに血液を戻そうとします。右心室圧ラインが確立されたら、肺動脈カフトランスデューサからフーバー針を接続します。リップ心室および肺動脈のカフ圧の開始値をキャプチャし、以前の測定値からの劇的な変化に注意してください。

3%の高張生理食塩水をゆっくりとオクルーダーポートに注入し、心室と袖口の圧力に注意を払います。PAカフが所望の量まで膨張したらフーバー針をカフポートから取り外す。右心室ポートを10ミリリットルの生理食塩水で洗い流し、ヘパリンナトリウム1ミリリットルあたり1000単位の5ミリリットルでポートを洗い流す。

12匹の羊のうち。平均肺動脈カフ圧は、第1週から第9週までの時間の増加とともに増加した。より速い肺動脈バンディングは、静脈酸素飽和度のより急速な低下をもたらす。

対照的に、より緩やかな肺動脈バンディング戦略を経験したものは、肺動脈カフ圧を制御することによって70〜80%の間の静脈酸素飽和度の生理学的範囲を維持する。このモデルは、心室適応および表現型を制御し、そして滴定する能力を有する。