Este protocolo es un modelo animal de gran tamaño para estudiar la adaptación y el fallo del ventrículo derecho. Por lo tanto, este modelo es vital para desarrollar terapias dirigidas a RV para tratar la hipertensión pulmonar. Este modelo aumenta progresivamente el RV correcto después de la carga, que se puede utilizar como estrategia para valorar la adaptación del RV.
Ningún modelo animal grande anterior tiene este control sobre el fenotipo RV. Demostrando ese procedimiento quirúrgico estarán el Dr. Matthew Bacchetta, el director del laboratorio y los becarios quirúrgicos john stokes, Kelly Wu y Yatrik Patel. Voy a demostrar el procedimiento de bandas de la arteria pulmonar.
Después de la anestesia, comience afeitando el campo quirúrgico desde el cuello de la oveja hasta la parte superior del abdomen. Limpie el campo quirúrgico de la suciedad y otros contaminantes con jabón o un cepillo exfoliante. Prepare el cuello en el pecho con solución de clorhexidina o betaína y cubra el campo quirúrgico de manera estéril.
Para obtener una exposición de estilo medio, realice una mini toracotomía con preservación muscular en el cuarto espacio intercostal izquierdo con una longitud de incisión inferior a ocho centímetros. Use un retractor Finochietto pequeño o mediano para separar las costillas en un retractor de tuffier para sentarse perpendicular al Finochietto dentro del espacio intercostal que retraerá el tejido blando dentro del espacio intercostal, mejorando la exposición sin dañar el nervio frénico incidir el interior de la pericardia y crear un pozo pericárdico con suturas de seda 2/0 para exponer la arteria pulmonar principal y el ventrículo derecho. Identifique el apéndice auricular izquierdo dentro de la exposición como un punto de referencia para el nivel de la bifurcación de la arteria pulmonar diseccionar alrededor de la arteria pulmonar principal y aislarlo con una cinta umbilical.
Realizar disección intrapericárdica de la arteria pulmonar izquierda y rodear con cinta umbilical. Coloque un oclusor vascular de silicona de alta resistencia alrededor de la arteria pulmonar principal. Usando una sutura de seda 0 en una aguja Keith.
Asegure el extremo del oclusor vascular junto con un punto en U. Una vez asegurado alrededor de la arteria pulmonar principal, deslice el oclusor distalmente a lo largo de la arteria pulmonar principal. Para establecer una línea de presión ventricular derecha, comience colocando una sutura de polipropileno no absorbible de 5/0 monofilamento con prendas que rodean la ubicación seleccionada y vea una trampa vascular.
Prepare la línea de presión ventricular derecha cortando el extremo masculino de un tubo de presión estéril de 36 pulgadas en un ángulo de 30 grados para facilitar la inserción a través del miocardio. Luego use una corbata de seda 2/0 para marcar la línea de presión a una profundidad óptima para su colocación dentro del ventrículo derecho. Usando un punzón de biopsia, haga una pequeña cardiotomía en el tracto de salida del ventrículo derecho o en la pared libre de RVOT dentro de la sutura de la cuerda de sobrecarcha colocada previamente.
Controle el sangrado con presión manual o apretando la trampa en la sutura del sobrecargo. Inserte y asegure el extremo cortado del tubo de presión en el RVOT. Ate la cuerda del bolso y luego asegure la cuerda del bolso al tubo de presión para asegurar la línea de presión.
Extienda el tubo RVOT conectando un tubo de presión adicional a la línea de presión RVOT. Monitoree la medición de la presión ventricular derecha basal. Diseccionar cuidadosamente alrededor de la arteria pulmonar izquierda Rodear la arteria pulmonar izquierda con cinta umbilical atándola hacia abajo para ligarla.
Saque la línea de presión RVOT y el tubo oclusor de la arteria pulmonar fuera del tórax un espacio intercostal debajo de la incisión de la toracotomía. Para marcar los sitios para los puertos de morada se forman dos bolsas subdurales a lo largo de la capa de fascia en el dorso izquierdo de las ovejas tan posteriormente hacia la columna vertebral como sea posible dentro del campo estéril. Use un tubo torácico polar para tunelizar la línea de presión RVOT y el tubo oclusor desde la incisión torácica hasta los sitios del puerto del dorso izquierdo.
Asegure tanto el tubo del oclusor como la línea de presión del ventrículo derecho a las conexiones de púas del puerto. Anclar el oclusor y el tubo de presión alrededor de los conectores del puerto con lazos adicionales. Para evitar la migración del puerto, ancle los puertos en tres ubicaciones alrededor de sus bordes a la fascia subyacente con suturas de polipropileno 3/0.
Reapproximar la dermis del tejido subcutáneo y la piel en capas con suturas de poliglactina 910. Enjuague el puerto RVOT con cinco mililitros de heparina sódica. Cierre la toracotomía con la figura de ocho suturas de poliglactina número dos 910 Luego cierre la capa muscular pectoral con un número de carrera 0 poliglactina 910.
Finalmente, cierre el tejido subcutáneo en capas de suturas de poliglactina 910 número 2/0 y grape la piel. Prepare dos transductores de presión para monitoreo, presiones del ventrículo derecho y del manguito oclusor. Después de que el animal esté ligeramente sujeto, inserte la aguja Huber desde el transductor de presión ventricular derecho hasta el puerto ventricular derecho.
Conecte una jeringa de cinco mililitros a la polla de parada de tres vías e intente extraer sangre hacia la jeringa desde el puerto ventricular derecho. Una vez que se establece la línea de presión ventricular derecha, conecte la aguja Huber desde el transductor del manguito de la arteria pulmonar. Capture los valores iniciales de las presiones del manguito ventricular y de la arteria pulmonar, observando cualquier cambio drástico con respecto a las lecturas anteriores.
Inyecte lentamente solución salina hipertónica al 3% en el puerto del oclusor mientras presta atención a las presiones ventriculares y del manguito. Una vez que el manguito paginado se infla a la cantidad deseada, retire la aguja Huber del puerto del manguito. Enjuague el puerto ventricular derecho con 10 mililitros de solución salina y luego enjuague el puerto con cinco mililitros de 1000 unidades por mililitro de heparina sódica.
Entre las 12 ovejas. La presión media del manguito de la arteria pulmonar aumentó con un aumento en el tiempo de la primera a la novena semana. Las bandas más rápidas de la arteria pulmonar conducen a una disminución más rápida de la saturación venosa de oxígeno.
En contraste, aquellos que experimentaron una estrategia de bandas de la arteria pulmonar más gradual mantienen un rango fisiológico de saturación de oxígeno venoso entre el 70 y el 80% mediante el control de la presión del manguito de la arteria pulmonar. Este modelo tiene capacidad para controlar y valorar la adaptación ventricular y el fenotipo.
