Este protocolo é um grande modelo animal para estudar adaptação ventricular direita e falha. Este modelo é, portanto, vital para o desenvolvimento de terapêuticas direcionadas a RV para tratar a hipertensão pulmonar. Este modelo aumenta progressivamente o RV direito após a carga que pode ser usado como estratégia para titular a adaptação do RV.
Nenhum modelo animal grande anterior tem esse controle sobre o fenótipo rv. Demonstrando que o procedimento cirúrgico será o Dr. Matthew Bacchetta, diretor do laboratório e os colegas cirúrgicos John Stokes, Kelly Wu e Yatrik Patel. Vou demonstrar o procedimento de banda da artéria pulmonar.
Após a anestesia, comece raspando o campo cirúrgico do pescoço da ovelha até o abdômen superior. Limpe o campo cirúrgico da sujeira e outros contaminantes usando sabão ou uma escova de esfoliante. Prepare o pescoço no peito com solução de clorexidina ou betaine e coloque o campo cirúrgico de forma estéril.
Para obter exposição ao estilo de mídia, realize uma mini toracotomia de poupança muscular no quarto espaço intercostal esquerdo com comprimento de incisão inferior a oito centímetros. Use um retrátil finochietto pequeno ou médio para separar as costelas em um retículo de tuffier para sentar-se perpendicular ao Finochietto dentro do espaço intercostal que irá retrair o tecido mole dentro do espaço intercostal, melhorando a exposição sem ferir o nervo frênico incisar o interior da pericárdia a ele e criar um poço pérdial com suturas de seda 2/0 para expor a artéria pulmonar principal e o ventrídeo direito. Identifique o apêndice atrial esquerdo dentro da exposição como um marco para o nível da bifurcação da artéria pulmonar dissecando ao redor da artéria pulmonar principal e isola-o com uma fita umbilical.
Realize a dissecação intrapericárdica da artéria pulmonar esquerda e circunda com uma fita umbilical. Coloque um oclúldio vascular de silicone pesado ao redor da artéria pulmonar principal. Usando uma sutura de seda 0 em uma agulha Keith.
Fixar a extremidade do oclúlgio vascular juntamente com um ponto U. Uma vez fixado ao redor da artéria pulmonar principal slide o occluder distally ao longo da artéria pulmonar principal. Para estabelecer uma linha de pressão ventricular direita, comece colocando uma sutura de bolsa de polipropileno não absorvível de 5/0 com penhores em torno do local selecionado e veja uma armadilha vascular.
Prepare a linha de pressão ventricular direita cortando a extremidade masculina de uma tubulação de pressão estéril de 36 polegadas em um ângulo de 30 graus para facilitar a inserção através do miocárdio. Em seguida, use uma gravata de seda 2/0 para marcar a linha de pressão em uma profundidade ideal para colocação dentro do ventrículo direito. Usando um soco de biópsia, faça uma pequena cardiotomia no trato de saída ventricular direito ou parede livre RVOT dentro da sutura de corda do purser anteriormente colocada.
Controle o sangramento com pressão manual ou apertando a armadilha na sutura do ensaíso. Insira e fixe a extremidade de corte da tubulação de pressão no RVOT. Amarre a corda da bolsa e depois fixe a corda da bolsa na tubulação de pressão para fixar a linha de pressão.
Estenda a tubulação RVOT conectando uma tubulação de pressão adicional à linha de pressão RVOT. Monitor para a medição da linha de base, pressão ventricular direita. Disseca cuidadosamente ao redor da artéria pulmonar esquerda, encoste a artéria pulmonar esquerda com fita umbilical amarrando-a para atrá-la.
Leve a linha de pressão RVOT e o oclusão da artéria pulmonar para fora do peito um espaço intercostal abaixo da incisão da toracotomia. Para marcar locais para portas habitantes formam dois bolsões subdurais ao longo da camada de fáscia no dorso esquerdo das ovelhas, tão posteriormente em direção à coluna vertebral quanto possível dentro do campo estéril. Use um tubo polar torácico para escavar a linha de pressão RVOT e tubos de oclusão do ocúrio até os locais da porta dorsum esquerda.
Segure tanto a tubulação de oclusão quanto a linha de pressão ventricular direita às conexões de barb do porto. Ancore o oclundo o ocluante e a tubulação de pressão ao redor dos conectores da porta com laços adicionais. Para evitar que a migração do porto ancore os portos em três locais ao redor de suas bordas para a fáscia subjacente com suturas de polipropileno 3/0.
Reaproximar a derme do tecido subcutâneo e a pele em camadas com suturas de poliglactina 910. Lave a porta RVOT com cinco mililitros de sódio de heparina. Feche a toracotomia com a figura de oito suturas de poliglactina número dois 910, em seguida, feche a camada muscular peitorais com um poliglactin número 0 em execução 910.
Finalmente, feche o tecido subcutâneo em camadas de poliglactina de corrida 2/0 e grampeie a pele. Prepare dois transdutores de pressão para monitoramento, pressões de punho ventricular e ocluora direita. Depois que o animal estiver levemente contido, insira a agulha Huber do transdutor de pressão ventricular direita para a porta ventricular direita.
Conecte uma seringa de cinco mililitros ao galo de parada de três vias e tente retirar sangue de volta para a seringa da porta ventricular direita. Uma vez estabelecida a linha de pressão ventricular direita, conecte a agulha Huber do transdutor da artéria pulmonar. Capture os valores iniciais das pressões de punho ventricular e pulmonar, observando quaisquer mudanças drásticas em relação às leituras anteriores.
Injete lentamente 3% de soro fisiológico hipertônico na porta do oclusão, enquanto presta atenção às pressões ventriculares e de punho. Uma vez que o manguito PA é inflado à quantidade desejada, remova a agulha Huber da porta da braçadeira. Lave a porta ventricular direita com 10 mililitros de soro fisiológico e depois lave a porta com cinco mililitros de 1000 unidades por mililitro de sódio heparina.
Entre as 12 ovelhas. A pressão média do manguito pulmonar aumentou com um aumento no tempo da primeira para a nona semana. A banda mais rápida da artéria pulmonar leva a um declínio mais rápido na saturação venosa de oxigênio.
Em contraste, aqueles que experimentaram uma estratégia de banda arterial pulmonar mais gradual mantêm uma faixa fisiológica de saturação de oxigênio venoso entre 70 e 80% controlando a pressão do manguito da artéria pulmonar. Este modelo tem capacidade de controlar e titular adaptação ventricular e fenótipo.
