ロス手術のげっ歯類モデル:全身位置における同系肺動脈移植移植

先天性大動脈狭窄症は、先天性心疾患のサブグループであり、病変が弁膜レベルに位置する左心室管の閉塞を特徴とする。先天性大動脈狭窄症の矯正に利用可能な選択肢は多数ある。それぞれに独自の欠点があります。

小児集団における興味深い治療選択肢は、ロス手術という名前の大動脈位置への肺サインの移動である。この場合、肺弁はその後、ホモグラフトと交換される。肺のサインは成長の可能性によって特徴付けられ、生涯にわたる抗凝固療法のリスクを伴わない。

それにもかかわらず、その使用は、肺サインの拡張およびそれに続く大動脈逆流の可能性のために非常に限られたままである。本研究では、肺移植片の適応性を評価するために、全身位置における肺弁移植片移植のげっ歯類モデルの確立を目指した。必要なすべての材料のチェックリストは、各操作の前に実行されました。

誘導麻酔の後、毎分1リットルの酸素中に4%のセボフルランを入れ、鎮静させた動物をコルクトレイの上に置き、その腹部をカミソリで剃った。次いで、皮膚をヨウ素溶液を用いて滅菌した。動物を濡れから守り、手術中の熱分散を防ぐために、動物は透明なプラスチックラップで覆われました。

麻酔のレベルは、不快な刺激に対する応答の不在を評価することによって、Pfannenstiel恥骨切開を行う前に評価した。心臓周囲切除術およびアテレクトミーは、大動脈弓の完全なビューを得るために実施された。大動脈を取り囲む残りの脂肪組織も除去した。

マイクロプライヤーを血管の後壁の下に挿入し、肺動脈を単離した。移植片へのリンクを最大化するために、後者はマイクロハサミを用いてその分岐部にできるだけ近い位置で切断した。次いで、肺動脈を、先端のマイクロ鉗子をリングで優しく保持し、マイクロスプリングハサミを用いて右心室から分離した。

したがって、肺移植片は、いくつかの右心室筋を含む収穫された。手術台上の冷たい生理食塩水を含ませたガーゼの上に肺動脈を載せ、手術顕微鏡で肺根を検査した。周囲の組織の存在量は切り取られた。

心室筋はわずか1ミリメートルしか残っておらず、血管へのリンクは5ミリメートルに設定されていた。中央縦腹部切開を行い、腹部を開いたままにするために2つのミニリトラクターを使用した。腸を抽出し、腹部大動脈の可視化および曝露を可能にした。

2-0の絹縫合糸を使用して、血管を持ち上げ、腹部大動脈を下大静脈から分離するために腹部大動脈の周りにループを作り出した。2つのヤサルギルクリップを使用して腹部大動脈をクランプし、互いに1.5センチメートルの距離に置いた。腹部大動脈は、2つのクリップの間の中間点でトランスジェクトされた。

肺動脈を、動物の頭蓋部に向かって心室端部における両端の間に配置した。10-0 Prolene縫合糸を使用して、肺動脈を腹部大動脈に接続する2つの画期的なシングルステッチを実行しました。これらの縫合糸は、近位血管円周の反対側に配置した。

同様の手順を移植片の遠位端について行った。次いで、肺動脈と腹部大動脈との間の終端吻合を遠位端から開始して行った。外科医により遠位に位置する端部を後吻合に用い、レシピエントを用いてアウトイン、インアウトシーケンスを移植し、約6ステッチのランニング縫合糸を作成する。

縫合糸が近位ランドマークに到達すると、縫合糸および近位ランドマーク縫合糸の両端の1つを使用して正方形の結び目を作ることによって二重半ステッチが完成した。その後、保護された蚊を縫合糸に適用して牽引力を提供しました。同じ吻合を前壁に対して行った。

その後、全処置を肺動脈の近位端で実施し、縫合糸ラインにリーフレットを含めないようにするために特別な注意が払われた。遠位クリップは、肺移植片を逆行性血液で満たすために最初に解放された、すなわち吻合を確認するための低圧流である。遠位吻合が評価されると、同じ手順を近位端で行った。

操作の終わりに、ラットを加熱ランプの下に置き、覚醒するまで視覚的に監視した。フォローアップの間、動物は1週間、1ヶ月および2ヶ月で連続超音波研究を受けた。これらの研究は、血管直径、ピーク収縮期速度および拡張末期速度の測定を可能にする。

これらのパラメータは、移植片の内部および近位および遠位腹部大動脈のレベルで測定した。合計39匹の成体ルイスラットを利用した。17匹の動物を肺移植ドナーとして、17匹をレシピエントとして、および5匹の動物を偽手術として使用し、対照群を検討した。

操作時に致命的なイベントは発生しませんでした。手術後、2ヶ月で全生存率は91%で2人が死亡しました。動物の体重中央値は、レシピエントと比較した場合、ドナー群でわずかに低かった(328グラム対387グラム)。

1週間後に体重が6%度で実験を行い、その後、すべてのラットが2ヶ月後に397グラムの中央値に達して体重を取り戻しました。研究の結果、移植の最初の1週間以内に肺移植片径が急激に有意に増加し、その後2ヶ月間にプラトーが続いた。遺伝的位置における肺移植片の中央値は3.2ミリメートルであり、1週間後には直ちに4.0センチメートルに増加し、1ヶ月後には4.07ミリメートル、2ヶ月で4.27ミリメートルに維持された。

もう1つの結果は、移植の1週間後に2Dエコーを伴う移植片レベルでのピーク収縮期速度測定の急速な有意な減少があり、続いて過去2ヶ月間に増加し、偽手術ラットで得られた値に匹敵する値に達したことを実証することができた。グラフの占星術的分析と移植の時間を考慮すると、内皮血栓症または多重化の有意な徴候は見られなかった。げっ歯類モデルにおける全身位置への同系肺弁ドラフト移植のこの実験モデルは、安全で効果的で再現性があることを明らかにした。

それは私たちに全身圧に曝された後の肺動脈の修飾を特徴付ける可能性を与え、これは肺自家移植不全の原因を理解するための基礎を表すことができる。使用される動物の小さなサイズは、外科的および術後の管理を簡素化した。これにより、限られた細菌と動物の費用で有用なモデルを得ることができました。

結論として、現在の研究は、げっ歯類モデルにおける同系肺移植片における全身的位置は、移植片のこの拡張を減少させることを目的とした根強化および薬物療法などの新規外科的技術の開発および評価のための単純かつ物理的なプラットフォームを表し、おそらくロス手術の結果をさらに改善することを目的としていることを示した。