膵臓移植は糖尿病患者の根治的治療法です。しかし、臓器は不足しており、ドナープールを改善するための戦略が必要です。ノルマザーミックEx Vivo灌流は、膵臓同種移植片の評価と修復を可能にする可能性のある他の臓器ですでに成功しています。
膵臓は移植のために最も頻繁に捨てられる臓器です。この技術は、複雑な糖尿病を患っている人々の臓器プールを増やす可能性があります。この方法により、虚血再灌流障害をよりよく理解し、膵臓損傷のバイオマーカーを特定することもできます。
セットアップは少し複雑になる可能性があり、膵臓が非常に敏感な器官であることを考えると、その検索のための練習が必要です。はじめに、手術野を消毒して覆います。剣状突起から恥骨結合まで正中切開を行い、左側切開で術野を伸ばして露出を良くします。
腹部大動脈から下大静脈を解剖します。さらに大動脈を周囲の組織から解放し、小さな腰椎大動脈枝を結紮します。両方の腎動脈の周りに結紮糸を特定して配置します。
大動脈の後ろが自由になったら、その周りに2つの結紮糸を通過させ、下部結紮糸が最終的に腸骨動脈分岐部のすぐ上に結ばれ、上部結紮糸が前の結紮の5センチメートル上に結ばれます。肝丘を解剖した後、すべての動脈をできるだけ肝臓の近くに結びます。次に、総胆管を特定します。
肝臓の近くに2つの結紮糸を置き、構造を分割します。次に、大動脈の肝上部分を特定して解剖し、その周りにネクタイを置きます。次に、小さい袋を開けて、氷が膵臓を冷やし、フラッシュする前に膵臓をできるだけ動員しないようにします。
次に、中心線を介してドナーの体重1キログラムあたり500国際単位のヘパリンを投与し、頸静脈カテーテルを使用してクエン酸塩、リン酸塩、ブドウ糖、生理食塩水、アデニン、グルコース、マンニトールバッグで採血を開始します。下大動脈結紮糸を結んだ後、腸骨分岐部タイの上のフラッシュラインで大動脈をカニューレします。上紐でカニューレを固定し、両方の腎動脈を結紮します。
十分な血液が採取されたら、大動脈上を結び、ネクタイの上にクランプを置きます。次に、ウィスコンシン大学保存液とのフラッシュを開始します。次に、通気のために門脈とカバの開口部を切ります。
1リットルのウィスコンシン大学溶液を洗い流した後、膵臓の尾部と十二指腸のCループを評価します。そして、十分に洗い流されたら、腸間膜血管を特定してクランプすることによって解剖を開始します。門脈の延長のために、膵臓移植片、および大脳静脈または腸骨静脈のセグメントを回収します。
そして、氷で満たされた洗面器の中に置かれたオルガンバッグの中にオルガンを置きます。大動脈の遠位部からフラッシュラインを取り除いた後、ネクタイで閉じ、残りのUW溶液で臓器バッグを満たします。次に、以前に回収したカバまたは腸骨静脈を6-0プロレンで使用して門脈拡張を行い、門脈と近位大動脈を4分の1の3/8レデューサーでカニューレします。
次に、十二指腸の遠位部分をマレコットカテーテルとネクタイでカニュールします。次に、十二指腸の内容物がこぼれないようにカテーテルの端をクランプし、腸間膜血管を4-0プロレンで監督しました。移植片の重量を登録した後、Ex Vivo膵臓灌流の開始まで移植片を静的冷蔵保管してください。
膵臓室をメイヨーテーブルの上に置き、この目的のために意図された穴を通して動脈管と静脈管を導入します。外部ヒーターユニットを接続して電源を入れます。吸引チューブをローラーポンプ内に配置した後、一方の端をチャンバーから出てくるチューブに接続して液体を収集し、もう一方の端を静脈リザーバーに接続して、灌流液のすべての臓器損失を収集します。
次に、酸素チューブを炭素混合物と酸素供給器を含むガスタンクに接続します。次に、ヒーターポンプユニットチューブを酸素発生器に接続します。動脈と静脈の流出ライン、および静脈リザーバーの流出をクランプします。
静脈リザーバーを灌流液で満たした後、1つのシリンジポンプを使用して、1時間あたり8ミリリットルで血管拡張薬を動脈ラインに連続的に投与する。次いで第2のシリンジポンプを用いて、酵素阻害剤を静脈リザーバ内に直接連続的に投与する。人工心肺装置の電源を入れた後、圧力、温度、タイマーパネルを起動します。
次に、ヒーターポンプをオンにして灌流溶液を摂氏38度に温め、酸素二酸化炭素供給を開きます。次に、静脈リザーバーの流出部に配置されたチューブクランプを取り外し、遠心ポンプを始動して1, 500 RPMまで上げます。次に、動脈フィルターをバイパスしてチューブをクランプします。
そして、動脈フィルターから空気を放出します。その後、動脈と静脈の圧力線をゼロにします。膵臓が保存されている臓器バッグを開けた後、動脈カニューレを通して200ミリリットルのアルブミンで洗い流します。
次に、膵臓を氷から取り出し、臓器室内に配置して、動脈管と静脈管に空気がないことを確認します。次に、動脈側からクランプを解除した後、動脈管と静脈管の間のショートカットをクランプします。動脈管から血液が出始めたら、ラインを動脈カニューレに接続します。
次に、遠心ポンプの速度を調整して動脈圧を20〜25ミリメートル水銀柱に設定し、静脈カニューレから血液が出始めたら静脈チューブを接続します。次に、膵臓が完全に接続され、メジャー出血が観察されない場合、ベラパミルのバイアル1本を動脈側に直接投与します。.原稿に記載されているように様々なパラメータを記録した後。
分析のためにサンプルを取ります。灌流が終わったら、動脈と静脈のチューブを外します。移植片を臓器室から取り出した後、冷たいウィスコンシン大学溶液で洗い流し、重量を測定した。
その後、移植の瞬間まで滅菌臓器バッグに入れて氷の上に移植片を保管します。圧力と流量は灌流全体を通して測定され、結果はそれが安定していることを示しました。代謝活性は、移植片の平均酸素消費量を計算することによって推定した。
結果は、pH、ナトリウム、カルシウム、および重炭酸塩の測定が、灌流全体を通して生理学的値内にあることを示しています。乳酸およびカリウムレベルは灌流中に減少し、3時間で正常値に近い値を達成することが観察された。回路は閉鎖系であるため、アミラーゼとリパーゼのレベルは灌流中に増加すると予想されました。
しかしながら、レベルの増加は移植片への損傷と相関していないようである。フラッシュ前および抜歯中に膵臓をできるだけ操作しないようにする必要があることを覚えておくことは非常に重要です。将来的には、このモデルが移植に適さない臓器を修復するための治療的介入を可能にすることを願っています。
この技術により、研究者は膵臓虚血再灌流損傷、保存、評価、そして最終的には修復をさらに研究することができます。
