La transplantation du pancréas est un traitement curatif pour les personnes atteintes de diabète. Cependant, les organes sont rares et des stratégies pour améliorer le bassin de donneurs sont nécessaires. Normothermic Ex Vivo Perfusion a déjà été couronné de succès pour d’autres organes qui pourraient potentiellement permettre l’évaluation et la réparation des allogreffes du pancréas.
Le pancréas est l’organe le plus souvent jeté pour la transplantation. Cette technique a le potentiel d’augmenter le pool d’organes pour les personnes qui vivent avec un diabète compliqué. Cette méthode nous permettra également de mieux comprendre les lésions d’ischémie-reperfusion et d’identifier les biomarqueurs des lésions pancréatiques.
La configuration peut être un peu compliquée, et étant donné que le pancréas est un organe très sensible, la pratique pour sa récupération est nécessaire. Pour commencer, désinfectez et couvrez le domaine chirurgical. Effectuez une incision médiane de la xiphoïde à la symphyse pubienne et étendez le champ chirurgical avec une incision latérale gauche pour une meilleure exposition.
Disséquer la veine cave inférieure de l’aorte abdominale. Libérez davantage l’aorte des tissus environnants et ligaturez les petites branches aortiques lombaires. Identifier et placer des ligatures autour des deux artères rénales.
Une fois que l’arrière de l’aorte est libre, passez deux ligatures autour d’elle où la ligature inférieure sera finalement attachée juste au-dessus de la bifurcation de l’artère iliaque, et la ligature supérieure sera attachée cinq centimètres au-dessus de la liaison précédente. Après avoir disséqué le hile hépatique, attachez toutes les artères aussi près du foie que possible. Ensuite, identifiez le canal cholédoque.
Placez deux ligatures près du foie et divisez la structure. Ensuite, identifiez et disséquez autour de la partie supra hépatique de l’aorte et placez une attache autour d’elle. Ensuite, ouvrez le sac inférieur pour permettre à la glace de refroidir le pancréas et de mobiliser le pancréas le moins possible avant de rincer.
Ensuite, administrez 500 unités internationales d’héparine par kilogramme de poids de donneur à travers le cathéter central et commencez la collecte de sang dans des poches de citrate, de phosphate, de dextrose, de solution saline, d’adénine, de glucose et de mannitol à l’aide du cathéter jugulaire. Après avoir attaché la ligature aortique inférieure, canuler l’aorte avec une ligne affleurante au-dessus de la liaison de bifurcation iliaque. Fixez la canule avec la cravate supérieure et ligaturez les deux artères rénales.
Une fois que suffisamment de sang a été recueilli, attachez l’aorte supracœliaque et placez une pince au-dessus de la cravate. Ensuite, lancez un rinçage avec la solution de préservation de l’Université du Wisconsin. Ensuite, coupez une ouverture dans la veine porte et le cava pour la ventilation.
Après avoir rincé un litre de solution de l’Université du Wisconsin, évaluez la queue du pancréas et la boucle C du duodénum. Et une fois correctement rincé, commencez la dissection en identifiant et en serrant les vaisseaux mésentériques. Récupérer le greffon pancréatique et un segment du cava ou de la veine iliaque pour l’extension de la veine porte.
Et placez l’orgue dans un sac d’orgue qui est placé à l’intérieur d’un bassin rempli de glace. Après avoir retiré la ligne de rinçage de la partie distale de l’aorte, fermez-la avec une attache et remplissez le sac d’organe avec la solution UW restante. Ensuite, effectuez une extension de la veine porte en utilisant le cava ou la veine iliaque précédemment récupéré avec 6-0 Prolene, et canulez la veine porte et l’aorte proximale avec un quart fois 3/8 Réducteur.
Puis canuler la partie distale du duodénum avec un cathéter Malecot et attacher. Ensuite, serrez l’extrémité du cathéter pour éviter de renverser le contenu duodénal et surveillez les vaisseaux mésentériques avec 4-0 Prolene. Après avoir enregistré le poids du greffon, conservez le greffon dans un entrepôt frigorifique statique jusqu’au début de la perfusion du pancréas ex vivo.
Placez la chambre pancréatique sur une table Mayo et introduisez le tube artériel et veineux à travers les trous prévus à cet effet. Branchez et allumez l’appareil de chauffage externe. Après avoir placé le tuyau d’aspiration à l’intérieur de la pompe à rouleaux, connectez une extrémité au tube qui sort de la chambre pour recueillir les fluides, et l’autre extrémité au réservoir veineux pour recueillir toutes les pertes d’organes de perfusat.
Ensuite, connectez le tube d’oxygène au réservoir de gaz contenant le mélange de carbone et l’oxygénateur. Connectez ensuite le tube de la pompe chauffante à l’oxygénateur. Pince artérielle et veineuse sortante ainsi que l’écoulement du réservoir veineux.
Après avoir rempli le réservoir veineux avec le perfusat, à l’aide d’une pompe à seringue, administrer en continu le vasodilatateur à raison de huit millilitres par heure dans la ligne artérielle. Ensuite, à l’aide d’une deuxième pompe à seringue, administrer en continu l’inhibiteur enzymatique directement dans le réservoir veineux. Après avoir allumé la machine cœur-poumon, démarrez les panneaux de pression, de température et de minuterie.
Ensuite, allumez la pompe chauffante pour réchauffer la solution de perfusion à 38 degrés Celsius et ouvrez l’alimentation en dioxyde de carbone en oxygène. Ensuite, retirez la pince de tuyauterie placée sur le débit sortant du réservoir veineux et démarrez la pompe centrifuge en la portant à 1 500 tr / min. Ensuite, serrez le tube en contournant le filtre artériel.
Et libérer l’air du filtre artériel. Ensuite, zéro les conduites de pression artérielle et veineuse. Après avoir ouvert le sac d’organe où le pancréas est stocké, rincer avec 200 millilitres d’albumine à travers la canule artérielle.
Ensuite, retirez le pancréas de la glace et placez-le à l’intérieur de la chambre de l’organe, en veillant à ce que les tubes artériels et veineux soient exempts d’air. Ensuite, après avoir relâché la pince du côté artériel, serrez le raccourci entre le tube artériel et veineux. Une fois que le sang commence à sortir de la tubulure artérielle, connectez la ligne à la canule artérielle.
Ensuite, réglez la pression artérielle à 20 à 25 millimètres de mercure en régulant la vitesse de la pompe centrifuge et connectez la tubulure veineuse une fois que le sang commence à sortir de la canule veineuse. Ensuite, administrez un flacon de vérapamil directement sur la face artérielle lorsque le pancréas est complètement connecté et qu’aucune mesure ne saigne n’est observée. Après avoir enregistré les différents paramètres décrits dans le manuscrit.
Prélever les échantillons pour analyse. Débranchez les tubes artériels et veineux lorsque la perfusion est terminée. après avoir retiré la greffe de la chambre de l’organe, rincer avec une solution froide de l’Université du Wisconsin et peser.
Conservez ensuite le greffon sur de la glace dans un sac d’organes stérile jusqu’au moment de la transplantation. La pression et le débit ont été mesurés sur toute la perfusion, et les résultats ont démontré qu’elle reste stable. L’activité métabolique a été estimée en calculant la consommation moyenne d’oxygène du greffon.
Les résultats montrent que les mesures de pH, de sodium, de calcium et de bicarbonate étaient dans les valeurs physiologiques pendant toute la perfusion. Il a été observé que les niveaux de lactate et de potassium diminuaient pendant la perfusion et atteignaient des valeurs proches de la normale à trois heures. Comme le circuit est un système fermé, les niveaux d’amylase et de lipase devraient augmenter pendant la perfusion.
Cependant, l’augmentation des niveaux ne semble pas corrélée avec les dommages causés au greffon. Il est très important de se rappeler que le pancréas doit être manipulé le moins possible avant le rinçage et pendant l’extraction. Nous espérons qu’à l’avenir, ce modèle permettra des interventions thérapeutiques pour réparer les organes impropres à la transplantation.
Cette technique permettra aux chercheurs d’étudier plus avant les lésions d’ischémie-reperfusion du pancréas, leur préservation, leur évaluation et, éventuellement, leur réparation.
