Pankreas nakli, diyabetli insanlar için iyileştirici bir tedavidir. Bununla birlikte, organlar azdır ve donör havuzunu iyileştirmek için stratejiler gereklidir. Normothermic Ex Vivo Perfüzyon, pankreas allogreftlerinin değerlendirilmesine ve onarımına potansiyel olarak izin verebilecek diğer organlar için zaten başarılı olmuştur.
Pankreas, nakil için en sık atılan organdır. Bu teknik, karmaşık diyabetle yaşayan insanlar için organ havuzunu artırma potansiyeline sahiptir. Bu yöntem aynı zamanda iskemi-reperfüzyon hasarını daha iyi anlamamızı ve pankreas hasarının biyobelirteçlerini tanımlamamızı sağlayacaktır.
Kurulum biraz karmaşık olabilir ve pankreasın çok hassas bir organ olduğu göz önüne alındığında, geri alınması için pratik yapılması gerekir. Başlamak için cerrahi alanı dezenfekte edin ve örtün. Ksifoidden kasık simfizine orta hat insizyonu yapın ve daha iyi pozlama için cerrahi alanı sol lateral insizyonla genişletin.
İnferior vena kavayı abdominal aorttan diseke edin. Aortu çevreleyen dokudan daha da serbest bırakın ve küçük lomber aort dallarını bağlayın. Her iki renal arterin etrafındaki bağları tanımlayın ve yerleştirin.
Aortun arkası serbest kaldıktan sonra, alt ligatürün sonunda iliak arter bifurkasyonunun hemen üstüne bağlanacağı ve üst ligatür önceki bağın beş santimetre yukarısına bağlanacağı iki bağ geçirin. Hepatik hilumu diseksiyon ettikten sonra, tüm arterleri karaciğere mümkün olduğunca yakın bağlayın. Sonra ortak safra kanalını tanımlayın.
Karaciğere yakın iki bağ yerleştirin ve yapıyı bölün. Daha sonra, aortun supra hepatik kısmının etrafını tanımlayın ve parçalara ayırın ve etrafına bir bağ yerleştirin. Daha sonra, buzun pankreası soğutmasına izin vermek için daha küçük çuvalı açın ve pankreası yıkamadan önce mümkün olduğunca az harekete geçirin.
Daha sonra merkezi hat boyunca donör ağırlığının kilogramı başına 500 uluslararası heparin birimi uygulayın ve juguler kateter kullanarak sitrat, fosfat, dekstroz, salin, adenin, glikoz ve mannitol torbalarında kan toplamaya başlayın. İnferior aort ligatürünü bağladıktan sonra, aortu iliak bifurkasyon bağının üzerinde düz bir çizgi ile kanüle edin. Kanülü üst bağ ile sabitleyin ve her iki renal arteri de bağlayın.
Yeterli kan toplandıktan sonra, supraçölyak aortunu bağlayın ve bağın üzerine bir kelepçe yerleştirin. Ardından, Wisconsin Üniversitesi Koruma Çözümü ile bir yıkama başlatın. Daha sonra havalandırma için portal ven ve kavada bir açıklık kesin.
Bir litre Wisconsin Üniversitesi Çözeltisi yıkandıktan sonra pankreas kuyruğunu ve duodenum C-döngüsünü değerlendirin. Ve yeterince yıkandıktan sonra, mezenterik damarları tanımlayarak ve sıkıştırarak diseksiyona başlayın. Portal venin uzaması için pankreas greftini ve kava veya iliak venin bir segmentini alın.
Ve organı buzla dolu bir havzanın içine yerleştirilmiş bir organ torbasının içine yerleştirin. Yıkama çizgisini aortun distal kısmından çıkardıktan sonra, bir bağ ile kapatın ve organ torbasını kalan UW Solüsyonu ile doldurun. Daha sonra, daha önce kurtarılmış kava veya iliak ven kullanarak 6-0 Prolene ile portal ven uzantısı yapın ve portal ven ve proksimal aortu dörtte bir kez 3/8 Redüktör ile kanüle edin.
Daha sonra duodenumun distal kısmını bir Malecot kateteri ve bağı ile kanüle edin. Daha sonra duodenal içeriğin dökülmesini önlemek için kateterin ucunu kelepçeleyin ve mezenterik damarları 4-0 Prolene ile denetleyin. Greftin ağırlığını kaydettikten sonra, Ex Vivo Pankreas Perfüzyonu başlayana kadar grefti statik soğuk depoda tutun.
Pankreas odasını bir Mayo masasına yerleştirin ve arteriyel ve venöz boruyu bu amaç için amaçlanan deliklerden geçirin. Harici ısıtıcı ünitesini bağlayın ve açın. Emme borusunu silindir pompasının içine yerleştirdikten sonra, sıvıları toplamak için bir ucunu odadan çıkan boruya, diğer ucunu da perfüzyonun tüm organ kaybını toplamak için venöz rezervuara bağlayın.
Daha sonra oksijen tüpünü karbon karışımını ve oksijenatörü içeren gaz tankına bağlayın. Ardından ısıtıcı pompa ünitesi borusunu oksijenatöre bağlayın. Kelepçe arterius ve venöz çıkış hatlarının yanı sıra venöz rezervuarın çıkışı.
Venöz rezervuarı perfüzyon ile doldurduktan sonra, bir şırınga pompası kullanarak, vazodilatöre saatte sekiz mililitrede arteriyel hatta sürekli olarak uygulayın. Daha sonra ikinci bir şırınga pompası kullanarak, enzim inhibitörünü doğrudan venöz rezervuara sürekli olarak uygulayın. Kalp-akciğer makinesini açtıktan sonra, basınç, sıcaklık ve zamanlayıcı panellerini çalıştırın.
Ardından, perfüzyon çözeltisini 38 santigrat dereceye ısıtmak için ısıtıcı pompasını açın ve oksijen karbondioksit kaynağını açın. Ardından, venöz rezervuarın çıkışına yerleştirilen boru kelepçesini çıkarın ve santrifüj pompayı 1.500 RPM'ye kadar alarak çalıştırın. Ardından, arteriyel filtreyi atlayarak boruyu sıkıştırın.
Ve havayı arteriyel filtreden serbest bırakın. Daha sonra, arteriyel ve venöz basınç çizgilerini sıfırlayın. Pankreasın depolandığı organ torbasını açtıktan sonra, arteriyel kanülden 200 mililitre albümin ile yıkayın.
Daha sonra pankreası buzdan çıkarın ve organ odasının içine yerleştirerek arteriyel ve venöz tüpün havasız olmasını sağlayın. Daha sonra, kelepçeyi arteriyel taraftan serbest bıraktıktan sonra, arteriyel ve venöz tüp arasındaki kısayolu kelepçeleyin. Kan arteriyel tüpten çıkmaya başladığında, hattı arteriyel kanüle bağlayın.
Daha sonra santrifüj pompanın hızını düzenleyerek arteriyel basıncı 20 ila 25 milimetre cıvaya ayarlayın ve venöz kanülden kan çıkmaya başladığında venöz tüpü bağlayın. Daha sonra, pankreas tamamen bağlandığında ve herhangi bir önlem kanaması gözlenmediğinde bir şişe verapamil'i doğrudan arteriyel tarafa uygulayın. Makalede açıklandığı gibi çeşitli parametreleri kaydettikten sonra.
Analiz için örnekleri alın. Perfüzyon bittiğinde arteriyel ve venöz tüplerin bağlantısını kesin. Grefti organ odasından çıkardıktan sonra, soğuk Wisconsin Üniversitesi Solüsyonu ile yıkayın ve tartın.
Daha sonra grefti nakil anına kadar steril bir organ torbasında buz üzerinde saklayın. Basınç ve akış tüm perfüzyon boyunca ölçüldü ve sonuçlar stabil kaldığını gösterdi. Greftin ortalama oksijen tüketimi hesaplanarak metabolik aktivite tahmin edildi.
Sonuçlar, pH, sodyum, kalsiyum ve bikarbonat ölçümlerinin tüm perfüzyon boyunca fizyolojik değerler içinde olduğunu göstermektedir. Perfüzyon sırasında laktat ve potasyum düzeylerinin azaldığı ve üç saatte normale yakın değerlere ulaştığı gözlendi. Devre kapalı bir sistem olduğu için perfüzyon sırasında amilaz ve lipaz düzeylerinin artması bekleniyordu.
Bununla birlikte, seviyelerdeki artışın greftteki hasarla ilişkili görünmemektedir. Pankreasın yıkamadan önce ve ekstraksiyon sırasında mümkün olduğunca az manipüle edilmesi gerektiğini hatırlamak çok önemlidir. Gelecekte, bu modelin nakil için uygun olmayan organları onarmak için terapötik müdahalelere izin vereceğini umuyoruz.
Bu teknik, araştırmacıların pankreas iskemi-reperfüzyon hasarını, korunmasını, değerlendirilmesini ve sonunda onarımını daha fazla incelemelerini sağlayacaktır.
