Die Bauchspeicheldrüsentransplantation ist eine kurative Behandlung für Menschen mit Diabetes. Die Organe sind jedoch knapp und es sind Strategien zur Verbesserung des Spenderpools notwendig. Die normotherme Ex-vivo-Perfusion hat sich bereits bei anderen Organen bewährt, die möglicherweise eine Beurteilung und Reparatur von Pankreasallotransplantaten ermöglichen könnten.
Die Bauchspeicheldrüse ist das am häufigsten zur Transplantation verworfene Organ. Diese Technik hat das Potenzial, den Organpool für Menschen mit kompliziertem Diabetes zu vergrößern. Diese Methode wird es uns auch ermöglichen, Ischämie-Reperfusionsschäden besser zu verstehen und Biomarker für Pankreasschäden zu identifizieren.
Der Aufbau kann etwas kompliziert sein, und wenn man bedenkt, dass die Bauchspeicheldrüse ein sehr empfindliches Organ ist, ist Übung für ihre Entnahme erforderlich. Desinfizieren und decken Sie zunächst das Operationsfeld ab. Führen Sie einen Mittellinienschnitt vom Xiphoid bis zur Schambeinfuge durch und erweitern Sie das Operationsfeld mit einem linken seitlichen Schnitt für eine bessere Belichtung.
Präpariere die untere Hohlvene von der Bauchschlagader. Befreien Sie die Aorta weiter vom umgebenden Gewebe und ligieren Sie die kleinen lumbalen Aortenäste. Identifizieren und platzieren Sie Ligaturen um beide Nierenarterien.
Sobald die Rückseite der Aorta frei ist, führen Sie zwei Ligaturen um sie herum, wobei die untere Ligatur schließlich knapp über der Bifurkation der Beckenarterie und die obere Ligatur fünf Zentimeter über der vorherigen Bindung gebunden wird. Nachdem Sie das Leberhilus präpariert haben, binden Sie alle Arterien so nah wie möglich an die Leber. Identifiziere dann den gemeinsamen Gallengang.
Platzieren Sie zwei Ligaturen in der Nähe der Leber und teilen Sie die Struktur. Als nächstes identifizieren und sezieren Sie den suprahepatischen Teil der Aorta und legen Sie eine Krawatte darum. Öffnen Sie als Nächstes den kleinen Sack, damit das Eis die Bauchspeicheldrüse abkühlen und die Bauchspeicheldrüse vor dem Spülen so wenig wie möglich mobilisieren kann.
Verabreichen Sie dann 500 internationale Einheiten Heparin pro Kilogramm Spendergewicht über den zentralen Zugang und beginnen Sie mit der Blutentnahme in Citrat-, Phosphat-, Dextrose-, Kochsalzlösungs-, Adenin-, Glukose- und Mannitolbeuteln mit dem Halskatheter. Nachdem Sie die untere Aortenligatur gebunden haben, kannulieren Sie die Aorta mit einer bündigen Linie über der Beckengabelung. Befestigen Sie die Kanüle mit dem oberen Kabelbinder und ligieren Sie beide Nierenarterien.
Sobald genügend Blut entnommen wurde, binden Sie die suprazöliakiekranke Aorta zusammen und platzieren Sie eine Klemme über der Krawatte. Initiieren Sie als Nächstes eine Spülung mit University of Wisconsin Preservation Solution. Schneiden Sie dann eine Öffnung in die Pfortader und Cava zum Entlüften.
Nach dem Spülen von einem Liter University of Wisconsin Solution untersuchen Sie den Bauchspeicheldrüsenschwanz und die Zwölffingerdarm-C-Schlaufe. Und sobald Sie ausreichend gespült sind, beginnen Sie mit der Dissektion, indem Sie die Mesenterialgefäße identifizieren und abklemmen. Entnahme des Pankreastransplantats und eines Segments der Vena cava oder Beckenvene zur Erweiterung der Pfortader.
Und legen Sie die Orgel in einen Orgelbeutel, der in ein mit Eis gefülltes Becken gestellt wird. Nachdem Sie die Spüllinie aus dem distalen Teil der Aorta entfernt haben, verschließen Sie sie mit einem Kabelbinder und füllen Sie den Organbeutel mit der restlichen UW-Lösung. Als nächstes führen Sie eine Pfortadererweiterung mit einer zuvor wiederhergestellten Cava- oder Beckenvene mit 6-0 Prolene durch und kannulizieren Sie die Pfortader und die proximale Aorta mit einem Viertel mal 3/8 Reducer.
Kannufixieren Sie dann den distalen Teil des Zwölffingerdarms mit einem Malecot-Katheter und binden Sie ihn zusammen. Als nächstes klemmen Sie das Ende des Katheters ab, um ein Verschütten des Zwölffingerdarminhalts zu vermeiden, und überwachen Sie die mesenterialen Gefäße mit 4-0 Prolene. Nachdem Sie das Gewicht des Transplantats registriert haben, bewahren Sie das Transplantat bis zum Beginn der Ex-vivo-Pankreasperfusion in einem statischen Kühllager auf.
Legen Sie die Bauchspeicheldrüsenkammer auf einen Mayo-Tisch und führen Sie die arteriellen und venösen Schläuche durch die dafür vorgesehenen Löcher ein. Schließen Sie die externe Heizeinheit an und schalten Sie sie ein. Nachdem Sie den Absaugschlauch in die Rollenpumpe gelegt haben, verbinden Sie ein Ende mit dem Schlauch, der aus der Kammer austritt, um die Flüssigkeiten aufzufangen, und das andere Ende mit dem venösen Reservoir, um den gesamten Organverlust von Perfusat aufzufangen.
Verbinden Sie dann den Sauerstoffschlauch mit dem Gastank mit dem Kohlenstoffgemisch und dem Oxygenator. Verbinden Sie dann den Schlauch der Heizungspumpeneinheit mit dem Oxygenator. Klemmen Sie Arterius- und venöse Abflussleitungen sowie den Abfluss des venösen Reservoirs.
Nachdem das venöse Reservoir mit dem Perfusat gefüllt wurde, wird der Vasodilatator mit einer Spritzenpumpe kontinuierlich mit acht Millilitern pro Stunde in den arteriellen Zugang verabreicht. Anschließend wird der Enzyminhibitor mit einer zweiten Spritzenpumpe kontinuierlich direkt in das venöse Reservoir verabreicht. Nachdem Sie die Herz-Lungen-Maschine eingeschaltet haben, starten Sie die Druck-, Temperatur- und Timer-Panels.
Schalten Sie dann die Heizungspumpe ein, um die Perfusionslösung auf 38 Grad Celsius zu erwärmen, und öffnen Sie die Sauerstoff-Kohlendioxid-Versorgung. Entfernen Sie dann die Schlauchschelle, die sich am Auslauf des venösen Reservoirs befindet, und starten Sie die Kreiselpumpe, indem Sie sie auf 1.500 U/min erhöhen. Als nächstes klemmen Sie den Schlauch unter Umgehung des arteriellen Filters fest.
Und lassen Sie Luft aus dem arteriellen Filter ab. Setzen Sie anschließend die arteriellen und venösen Druckleitungen auf Null. Nach dem Öffnen des Organbeutels, in dem die Bauchspeicheldrüse aufbewahrt wird, mit 200 Millilitern Albumin durch die arterielle Kanüle spülen.
Nehmen Sie dann die Bauchspeicheldrüse aus dem Eis und positionieren Sie sie in der Organkammer, wobei Sie darauf achten, dass die arteriellen und venösen Schläuche luftfrei sind. Nachdem Sie die Klemme von der arteriellen Seite gelöst haben, klemmen Sie die Abkürzung zwischen dem arteriellen und dem venösen Schlauch. Sobald Blut aus dem arteriellen Schlauch austritt, verbinden Sie den Schlauch mit der arteriellen Kanüle.
Stellen Sie dann den arteriellen Druck auf 20 bis 25 Millimeter Quecksilbersäule ein, indem Sie die Drehzahl der Kreiselpumpe regulieren, und schließen Sie den Venenschlauch an, sobald Blut aus der Venenkanüle austritt. Als nächstes wird eine Durchstechflasche Verapamil direkt auf die arterielle Seite verabreicht, wenn die Bauchspeicheldrüse vollständig angeschlossen ist und keine Blutungen beobachtet werden. Nach Aufnahme der verschiedenen Parameter wie im Manuskript beschrieben.
Entnehmen Sie die Proben zur Analyse. Trennen Sie arterielle und venöse Schläuche, wenn die Perfusion beendet ist. Nachdem Sie das Transplantat aus der Orgelkammer entfernt haben, spülen Sie es mit kalter Lösung der University of Wisconsin und wiegen Sie es.
Bewahren Sie das Transplantat dann bis zum Zeitpunkt der Transplantation auf Eis in einem sterilen Organbeutel auf. Der Druck und der Durchfluss wurden während der gesamten Perfusion gemessen, und die Ergebnisse zeigten, dass sie stabil bleibt. Die metabolische Aktivität wurde durch Berechnung des mittleren Sauerstoffverbrauchs des Transplantats abgeschätzt.
Die Ergebnisse zeigen, dass pH-, Natrium-, Kalzium- und Bikarbonatmessungen während der gesamten Perfusion innerhalb der physiologischen Werte lagen. Es wurde beobachtet, dass der Laktat- und Kaliumspiegel während der Perfusion abnahm und nach drei Stunden nahezu normale Werte erreichte. Da es sich bei dem Kreislauf um ein geschlossenes System handelt, war zu erwarten, dass die Amylase- und Lipasespiegel während der Perfusion ansteigen.
Der Anstieg der Spiegel scheint jedoch nicht mit der Schädigung des Transplantats zu korrelieren. Es ist sehr wichtig, sich daran zu erinnern, dass die Bauchspeicheldrüse vor der Spülung und während der Extraktion so wenig wie möglich manipuliert werden muss. Wir hoffen, dass dieses Modell in Zukunft therapeutische Eingriffe zur Reparatur von Organen ermöglicht, die nicht für eine Transplantation geeignet sind.
Diese Technik wird es den Forschern ermöglichen, die Ischämie-Reperfusionsverletzung der Bauchspeicheldrüse weiter zu untersuchen, zu erhalten, zu beurteilen und schließlich zu reparieren.
