インビトロ 模擬胃腸液の多相交換 による 単一液滴中のエマルジョンの消化

本手法は、乳化剤で覆われ、油相に浸漬された単一の水滴の消化過程をシミュレートすることにより、感情がどのように消化されるかを調べるモデルを提供します。さまざまな乳化剤の影響、さまざまな消化成分の作用を評価し、消化管内のさまざまな場所で消化に抵抗または遅延できるインターフェースを設計できます。シミュレートされた消化プロセス全体を通してC2の界面張力を測定し、消化ステップの最後に界面層の弾力性と粘度を測定できます。

消化の濃度および条件は、実験の要件に合わせて調整することができ、これを順次適用することも、同時に相乗効果および累積効果を評価することもできる。また、単一の液滴を扱うため、必要なサンプルの量は非常に少なく、実験変数を高精度に制御できます。この手法を適用して、これを引き継ぐための戦略を設計しました。

それらのアプローチの1つは、脂肪分解のプロセスを引退または受領する化石層で設計することです。もう一つのアプローチはリパーゼイノベーターの使用であり、我々はリパーゼの界面作用機序を研究してきた。この装置はもともとin vitroでの消化を研究するために開発されました。

それにもかかわらず、それは研究モノおよび脂質との相互作用に使用することができ、またまた、臨界微量濃度を自動的に研究するために適用することができる。実験手法にアクセスできます。手動の研究者は、1週間で使用するように訓練されています。

表面活性汚染物質の存在を防ぐために、機器を完全にクリーンアップし、サンプルとオイルを精製する必要があります。ソフトウェアコンピューターに精通し、ライトと機能の位置を制御し、小さな泡を取り除く方法を学ぶ必要があります。まず、室温で水の表面張力を確認するための正式な水滴。

左のダイアログで微分密度を空気水に設定し、表面張力をリアルタイムで測定します。5分間。清潔なキュベットに少なくとも0.002リットルのきれいな植物油を入れ、サーモスタットセルのキュベットホルダーに入れます。

差動密度を植物油水に設定し、毎秒0.5マイクロリットルの速度で40マイクロリットルを注入します。注入が終了するまで毎秒リアルタイムで張力を測定します。これは単純な動的プロセスです。

次に、データを保存し、液滴体積とデータシートの関数として界面張力をプロットします。液滴の体積範囲が、きれいな水の液滴体積とは無関係に界面張力の値を提供することを確認します。界面領域を液滴体積の関数としてプロットします。

この曲線は、後で体積を対応する界面面積と一致させるために使用されます。左のシリンジで、一定の界面張力の範囲内で容量を注入し、界面張力を5分間記録します。これは、系内に表面活性成分がないことを確認するためである。

初期制御を行うには、液滴形成のために約10マイクロリットルの乳化剤溶液をキャピラリーに注入し、約20平方ミリメートルの一定の界面領域で1時間吸収を記録します。体積と面積の正確な値は、以前にプロットされた検量線から得ることができます。10秒の期間に振動の振幅を1.25マイクロリットルに設定して、希釈レオロジーをプログラムします。

次に、選択した界面領域での吸収を10秒間プログラムします。次に、選択した界面領域での吸収を10秒間胃消化プログラムに記録する。左側のシリンジにバルブ2からの液体を入れます。

左のシリンジでバルブ2から毎秒5マイクロリットルで125マイクロリットルを注入し、同時に右のシリンジで同じ体積を同じ速度で抽出します。これは、水とメチレンブルーのサブフェーズ交換のプロセスを視覚化したものです。右側のシリンジをアンロードしてバルブ8を終了し、左側のシリンジにバルブ2からの液体を再度ロードします。

これらの2つのステップを10回繰り返して、液体およびバルブ2および胃酵素との完全なサブフェーズ交換を保証します。次に、選択した界面領域での吸収を1時間記録し、前に示したように希釈反応を記録します。選択した界面領域での吸収を記録した後に腸の消化を記録するには、左側のシリンジにバルブ3からの液体を満たし、前に示したのと同じ手順に従って胃の消化を記録します。

同様に、脱着を記録するには、選択した界面領域での吸収を記録した後、左側のシリンジにバルブ5からの液体を満たし、胃消化を記録するために使用される残りのステップを繰り返します。マイクロ遠心チューブに人工消化媒体を満たし、対応するチューブでそれぞれをそれぞれのバルブに接続します。バルブ2、バルブ3、バルブ4、バルブ5からバルブ8の外部出口まで清掃して、バルブ2から8のチューブを満たします。

バルブ1からバルブ6の毛細管まで5回洗浄して、バルブ1のチューブを満たします。キャピラリーを油相に入れ、左側のシリンジにバルブ1をロードします。初期制御胃消化、腸管消化、脱着の順次処理を開始し、各処理の最後にデータを保存する。

乳化剤の胃消化について得られた実験結果をこれらの図に示す。ヒト血清アルブミンの胃タンパク質分解がここに提示されます。消化媒体は、摂氏37度の溶液とのサブフェーズ交換によって適用されます。

ここで、青はタンパク質を含む初期バッファーを表し、赤はペプシンを含む簡略化されたSGFを表します。簡略化されたSGFおよびペプシンとのサブ相交換中に、タンパク質の加水分解により界面張力が増加し、初期タンパク質層が希釈されます。グラフィック画像は、柑橘類ペクチンの胃脂肪分解を表しています。

ここで、青色は柑橘類ペクチンによる初期緩衝液を表し、黄色は胃リパーゼによる簡略化されたSGFを表し、灰色は簡略化されたSGFを表す。胃リパーゼとのサブ相交換は表面張力を低下させ、一方、単純化されたSGFとのサブ相交換は界面張力のヌル応答を提供する。ここに示されているのは、腸の消化プロファイルの例です。

ここでは、摂氏37度の簡易SIFにおける吸収、脱着、バイオ塩、リパーゼ、およびリパーゼと胆汁酸塩のプロファイルを示します。グラフ画像は、プルエロニックF127とF68の2つの変異体の脂肪分解時の界面張力の変化を示しています。リパーゼと胆汁酸塩の吸収、および油水界面で以前に形成されたF68およびF127の界面膜への遊離脂肪酸の生成により、界面張力の急激な低下が見られます。

脱離ステップは、胆汁酸塩、F68、およびF127からの簡略化されたSIFとのサブ相交換を示す。ヒトおよびウシ血清アルブミン吸収膜の空気水界面でのAS48吸収膜のin vitro消化プロファイル オリーブオイル水界面で。代表的な画像は、オリーブオイル水界面でのベータラクトグロブリン吸収膜のin vitro消化の界面張力、膨張弾性、および膨張粘度を示しています。

拡張パラメータは、消化された界面が各ステップで平衡化された後、1ヘルツ、0.1ヘルツ、および0.01ヘルツで測定されました。プロセスをプログラミングする際には、対応する遠心管、毛細管、または軸、ドロップサイト分布の進化、電気泳動移動度が液滴の可能性を設定し、脂肪分解で生成するアミノ遊離脂肪酸が界面張力からの所見に対応するための補完的な情報を提供することが重要です。この技術は、異なる消化率プロファイルを持つ界面層を提供して、胃腸管内のさまざまな場所に栄養素と薬物を送達し、新しいカプセル化システムを開発します。