Yöntemimiz, emülgatör tarafından kaplanan ve yağ fazına batırılmış tek bir su damlacığında sindirim sürecini simüle ederek duyguların nasıl sindirildiğini araştırmak için model sağlar. Farklı emülgatörlerin etkisini ve farklı sindirim bileşenlerinin etkisini değerlendirebilir ve gastrointestinal sistem içindeki farklı yerlerde sindirime direnebilecek veya sindirimi geciktirebilecek arayüzler tasarlayabiliriz. Tüm simüle edilmiş sindirim süreci boyunca C2'deki ara yüz gerginliğini ve sindirim adımının sonunda ara yüz tabakasının elastikiyetini ve viskozitesini ölçebiliriz.
Konsantrasyonlar ve sindirim koşulları, deneyin gereksinimlerine göre ayarlanabilir ve bu, sırayla uygulanabilir veya aynı anda sinerjizm ve kümülatif etkilerin değerlendirilmesine izin verilir. Ve tek bir damlacıkla çalışıyoruz, bu yüzden çok düşük miktarda numuneye ihtiyacımız var ve deneysel değişkenlerin yüksek hassasiyetli kontrolüne sahibiz. Bu tekniği, bunu devralacak bir strateji tasarlamak için uyguladık.
Bu yaklaşımlardan biri, lipoliz işlemini emekliye ayıran veya alan fosil tabakasında tasarım yapmaktır. Diğer bir yaklaşım lipaz yenilikçilerinin kullanımıdır ve lipazın ara yüz etki mekanizmasını araştırdık. Bu cihaz başlangıçta in vitro sindirimi incelemek için geliştirilmiştir.
Bununla birlikte, mono çalışma ve lipit ile etkileşim için kullanılabilir ve ayrıca kritik mikro konsantrasyonu otomatik olarak incelemek için uygulanabilir. Deneysel tekniğe erişilebilir. Bir el araştırmacısı bir hafta içinde kullanmak üzere eğitilmiştir.
Ekipmanı iyice temizlemeniz ve yüzey aktif kirleticilerin varlığını önlemek için numuneleri ve yağı saflaştırmanız gerekir. Yazılım bilgisayarına aşina olmanız ve ışıkları ve yetenek konumunu kontrol etmeyi öğrenmeniz ve küçük kabarcıklardan kurtulmanız gerekir. Başlamak için, oda sıcaklığında suyun yüzey gerilimini kontrol etmek için resmi su damlacığı.
Diferansiyel yoğunluğu sol diyalogda hava suyuna ayarlayın ve yüzey gerilimini gerçek zamanlı olarak ölçün. beş dakika boyunca. Temiz küvetini en az 0.002 litre temiz bitkisel yağ ile doldurun ve termostatik hücredeki küvet tutucuya yerleştirin.
Diferansiyel yoğunluğu bitkisel yağ suyuna ayarlayın ve saniyede 0,5 mikrolitre hızında 40 mikrolitre enjekte edin. Enjeksiyonun sonuna kadar her saniye gerginliği gerçek zamanlı olarak ölçün. Bu basit bir dinamik işlemdir.
Ardından, verileri kaydedin ve ara yüzey gerilimini damlacık hacminin ve bir veri sayfasının bir fonksiyonu olarak çizin. Damlacık hacmi aralığının, temiz su için damlacık hacminden bağımsız olarak ara yüzey gerilimi için bir değer sağladığından emin olun. Ara yüz alanını damlacık hacminin bir fonksiyonu olarak çizin.
Bu eğri daha sonra ses seviyesini karşılık gelen ara yüz alanıyla eşleştirmek için kullanılacaktır. Sol şırınga ile, hacmi sabit ara yüz gerginliği aralığında enjekte edin ve ara yüz gerginliğini beş dakika boyunca kaydedin. Bu, sistemde yüzey aktif bileşenlerinin yokluğunu kontrol etmek içindir.
İlk kontrolü gerçekleştirmek için, damla oluşumu için kılcal damara yaklaşık 10 mikrolitre emülgatör çözeltisi enjekte edin ve emilimi bir saat boyunca yaklaşık 20 milimetrekarelik sabit bir ara yüz alanına kaydedin. Hacim ve alanın tam değerleri, daha önce çizilen kalibrasyon eğrisinden elde edilebilir. Seyreltme reolojisini, salınım genliğini 10 saniyeye kadar olan periyotta 1.25 mikrolitreye ayarlayarak programlayın.
Ardından, seçilen ara yüz bölgesindeki emilimi 10 saniye boyunca programlayın. Daha sonra, gastrik sindirim programını kaydetmek için, seçilen ara yüz bölgesindeki emilimi 10 saniye boyunca kaydedin. Sol şırıngayı ikinci valften sıvı ile doldurun.
Sol şırınga ile saniyede beş mikrolitrede valften iki adet 125 mikrolitre enjekte edin ve aynı anda aynı hacmi sağ şırınga ile aynı oranda çıkarın. Bu, suyun metilen mavisi ile alt faz değişimi sürecinin bir görselleştirmesidir. Valf sekizden çıkmak için sağ şırıngayı boşaltın ve sol şırıngayı ikinci valften sıvı ile tekrar yükleyin.
Sıvı ve valf iki ve gastrik enzimlerle tam alt faz değişimini sağlamak için bu iki adımı 10 kez tekrarlayın. Ardından, seçilen ara yüz alanındaki absorpsiyonu bir saat boyunca kaydedin ve daha önce gösterildiği gibi seyreltici reolojiyi kaydedin. Seçilen ara yüz bölgesinde emilimi kaydettikten sonra bağırsak sindirimini kaydetmek için, sol şırıngayı üçüncü kapaktan sıvı ile doldurun ve gastrik sindirimi kaydetmek için daha önce gösterilen adımları izleyin.
Benzer şekilde, desorpsiyonu kaydetmek için, seçilen ara yüz bölgesinde emilimi kaydettikten sonra, sol şırıngayı beşinci kapaktan sıvı ile doldurun ve gastrik sindirimi kaydetmek için kullanılan adımların geri kalanını tekrarlayın. Mikro santrifüj tüplerini yapay sindirim ortamı ile doldurun ve her birini ilgili boru ile ilgili valfe bağlayın. Boruyu iki ila sekiz valf içinde doldurun ve valf iki, valf üç, valf dört ve valf beşten valf sekizinci olan dış çıkışa temizleyin.
Valf birinden altı kılcal damara beş kez temizleyerek boruyu valf bir içine doldurun. Kılcal damarı yağ fazına yerleştirin ve sol şırıngayı valf ile yükleyin. İlk kontrol gastrik sindirimini, bağırsak sindirimini ve desorpsiyonunu sırayla işlemeye başlayın ve her işlemin sonunda verileri kaydedin.
Emülgatörlerin gastrik sindirimi için elde edilen deneysel sonuçlar bu şekillerde gösterilmiştir. İnsan serum albümininin gastrik proteolizi burada sunulmuştur. Sindirim ortamı, 37 santigrat derecelik çözeltilerle alt faz değişimi ile uygulanır.
Burada mavi, protein içeren ilk tamponu temsil eder ve kırmızı, pepsin ile basitleştirilmiş SGF'yi temsil eder. Basitleştirilmiş SGF ve pepsin ile alt faz değişimi sırasında, ilk protein tabakasını seyrelten proteinin hidrolizi nedeniyle ara yüz gerginliği artar. Grafik görüntü, narenciye pektininin gastrik lipolizini temsil eder.
Burada, mavi narenciye pektin ile ilk tamponu, sarı gastrik lipaz ile basitleştirilmiş SGF'yi ve gri basitleştirilmiş SGF'yi temsil eder. Gastrik lipaz ile alt faz değişimi yüzey gerilimini azaltırken, basitleştirilmiş SGF ile alt faz değişimi, ara yüz gerginliğinin boş bir cevabını sağlar. Burada bağırsak sindirim profillerinin bir örneği gösterilmektedir.
Absorpsiyon, desorpsiyon, biyo tuzların profilleri, lipaz ve lipaz artı safra tuzları basitleştirilmiş SIF'de 37 santigrat derecede sunulmaktadır. Grafik görüntü, iki plueronik F127 ve F68 varyantının lipolizi üzerine ara yüz gerginliğinin evrimini göstermektedir. Lipaz ve safra tuzlarının emilimi ve yağ suyu arayüzünde daha önce oluşturulmuş F68 ve F127 ara yüz filmlerine serbest yağ asitlerinin üretilmesi nedeniyle ara yüz gerginliğinde dik bir azalma görülebilir.
Desorpsiyon adımı, safra tuzları, F68 ve F127'den basitleştirilmiş SIF ile alt faz değişimini gösterir. AS48 emilen filmin in vitro sindirim profili, insan su arayüzünde hava suyu arayüzünde emilen film ve sığır serum albümini zeytinyağı su arayüzünde emilir. Temsili görüntüler, zeytinyağı su arayüzünde beta laktoglobulin emilen filmin in vitro sindiriminin ara yüz gerginliğini, dilatasyon elastikiyetini ve dilatasyon viskozitesini göstermektedir.
Dilatasyon parametreleri, sindirilen arayüz her adımda dengelendikten sonra 1 hertz, 0.1 hertz ve 0.01 hertz'de ölçüldü. İşlemi karşılık gelen santrifüj tüpleri, kılcal damar veya eksen ile programlarken topları eşleştirmek önemlidir, daha sonra düşme bölgesi dağılımının evrimi, daha sonra, elektroforetik hareketlilik damlacıkların potansiyelini belirler ve lipolizde üretilen amino serbest yağ asidi, ara yüz gerginliğinden elde edilen bulgularla karşılık gelen tamamlayıcı bilgiler sunar. Bu teknik, gastrointestinal sistem içinde farklı yerlerde besin ve ilaç vermek ve ayrıca yeni kapsülleme sistemleri geliştirmek için farklı sindirilebilirlik profillerine sahip ara yüz katmanları sağlar.
