ヒトおよびマウス組織における好中球細胞外トラップの免疫蛍光イメージング

組織イメージングのための抗体選択の中でも、エピトープマスキングによる固定プロセスが課題となっています。したがって、抗体結合のためにこれらの抗原を曝露するために、カスタマイズされたレトリーバーステップが必要です。さらに、組織固有の自家蛍光は、高いバックグラウンド染色に困難を引き起こす可能性があります。

しかし、文献のプロトコルで異なるアプローチが使用されているため、画像間の標準化された比較が妨げられています。私たちの研究は、標準化された手順の需要に対処し、研究者がイメージングプロセス中の課題を克服するのを支援することを目的としています。私たちは、さまざまな異なるプロトコルを比較することにより、さまざまな組織に適用できる汎用性の高いイメージングプロトコルを確立しました。

そこで、抗体の使用からサンプルのマウントまで、ガイドとトラブルシューティングのヒントを提供し、潜在的な落とし穴を浮き彫りにします。本研究成果は、シトルリン化ヒソン3に対する新しい一次抗体と、バックグラウンド染色を最小限に抑えるための自家蛍光還元剤を導入することで、研究を前進させました。さらに、イメージングを成功させるためには、検体の慎重な取り扱いと、抗原賦活化のために一定の高温を維持することの重要性を強調しています。