Imagerie par immunofluorescence des pièges extracellulaires des neutrophiles dans les tissus humains et murins

Parmi la sélection d’anticorps pour l’imagerie tissulaire, le processus de fixation pose un défi par masquage d’épitopes. Par conséquent, une étape de récupération personnalisée est nécessaire pour exposer ces antigènes à la liaison aux anticorps. De plus, l’autofluorescence inhérente aux tissus peut causer des difficultés jusqu’à une coloration de fond élevée.

Cependant, l’utilisation d’approches différentes dans les protocoles de la littérature empêche une comparaison standardisée entre les images. Notre étude vise à répondre à la demande de procédures standardisées et à aider le chercheur à surmonter les défis pendant le processus d’imagerie. Nous avons établi un protocole d’imagerie polyvalent applicable à différents tissus en comparant différents protocoles.

Notre travail fournit donc des conseils d’orientation et de dépannage, de l’utilisation des anticorps à l’assemblage des échantillons, en mettant en évidence les pièges potentiels. Nos résultats font progresser la recherche en introduisant un nouvel anticorps primaire contre l’hisone trois citrulliné, ainsi qu’un agent réducteur autofluorescent pour minimiser la coloration de fond. De plus, pour une imagerie réussie, nous mettons l’accent sur la manipulation soigneuse des échantillons et sur l’importance de maintenir une température élevée et constante pour la récupération de l’antigène.