Иммунофлуоресцентная визуализация внеклеточных ловушек нейтрофилов в тканях человека и мыши

Среди селекции антител для визуализации тканей сложность заключается в том, что процесс фиксации представляет собой проблему маскировки эпитопов. Таким образом, требуется индивидуальный шаг ретривера, чтобы подвергнуть эти антигены связыванию антител. Кроме того, присущая тканям автофлуоресценция может вызвать трудности вплоть до окрашивания на высоком фоне.

Однако использование различных подходов в протоколах в литературе препятствует стандартизированному сравнению изображений. Наше исследование направлено на удовлетворение спроса на стандартизированные процедуры и помощь исследователю в преодолении трудностей в процессе визуализации. Мы разработали универсальный протокол визуализации, применимый к различным тканям, путем сравнения различных протоколов.

Таким образом, наша работа предоставляет рекомендации и советы по устранению неполадок от использования антител до монтажа образца, подчеркивая потенциальные подводные камни. Наши результаты продвигают исследования, вводя новое первичное антитело к цитруллинированному гизону три, а также автофлуоресцентный восстановитель для минимизации фонового окрашивания. Кроме того, для успешной визуализации мы подчеркиваем осторожность при обращении с образцами и важность поддержания постоянной высокой температуры для извлечения антигена.