大腸菌からの組換えタンパク質充填小胞の最適生産と分析

私たちは、生きた細胞内の分子間の動的な相互作用を理解しようとしています。生化学的分析のためには、大量の組換えタンパク質を使用する必要があるかもしれません。これらは、正しく折りたたまれた機能的な形で表現することは非常に難しい場合があります。

タンパク質が細菌で発現したときに誤って折りたたまれたり不溶性であることが判明した場合、研究者は高価で比較的遅い哺乳類細胞に頼るか、合成ポリペプチドを使用する必要があります。私たちのプロトコルは、高収率の発現と大腸菌からの困難なタンパク質の輸出を可能にします。タンパク質のアミノ末端に短い切断可能なペプチド配列を追加すると、これまでにテストしたすべてのタンパク質の生産と収量が向上するだけでなく、細胞から培地にタンパク質が輸出されます。

タンパク質発現を簡素化するとともに、下流のタンパク質精製も簡素化します。