Produção e análise otimizadas de vesículas cheias de proteína recombinante de E. coli

Estamos tentando entender as interações dinâmicas entre moléculas dentro de células vivas. Para a análise bioquímica, pode ser necessário o uso de grandes quantidades de proteína recombinante. Estes podem ser extremamente difíceis de expressar de forma corretamente dobrada e funcional.

Se uma proteína fosse mal dobrada ou insolúvel quando expressa em bactérias, os pesquisadores teriam que recorrer a células de mamíferos, o que é caro e relativamente lento, ou usar polipeptídeos sintéticos. Nosso protocolo permite a expressão de alto rendimento, bem como a exportação de proteínas desafiadoras de E.coli. Adicionar uma curta sequência peptídica clivável ao terminal amino da proteína não só aumenta a produção e o rendimento de cada proteína que testamos até o momento, mas também exporta a proteína da célula para o meio.

Além de simplificar a expressão de proteínas, também simplifica a purificação de proteínas a jusante.