마우스 폐 삽관 법의 간단한 방법

요약

본 논문은 폐 기능 측정 또는 쥐가 복구 나중에 시간에 공부를 할 수 있습니다 폐 기지에 대한 쥐를 intubating의 striaghforward하고 효율적인 방법을 설명합니다. 절차는 직접 기관을 비춰 저렴한 fiberoptic 광원을 포함한다.

초록

폐 기능 측정을위한 쥐를 intubate하는 간단한 절차 제한된 숫자 나 값 비싼 동물과 세로 방향의 연구에 몇 가지 장점을 얻을 수 있습니다. 이 더 정기적으로 수행되지 않는 이유 중 하나는이 그것을 달성 할 수있는 방법을 설명하는 여러 출판 연구 임에도 불구하고, 상대적으로 어려운 것입니다. 이 논문에서 우리는이 삽관과 관련된 주요 장애물 중 하나 삽관 법의 전체 시간 동안기도를 시각화의를 제거하는 절차를 보여줍니다. 방법은 마우스 기관에 삽관 법의 캐뉼라를 직접 할 수있는 소개 자 역할을하는 0.5 mm fiberoptic 광원을 사용합니다. 우리는 적어도 몇 주 시간 과정을 통해 개인의 쥐 폐 기계를 측정하는이 절차를 사용하는 것이 가능하다는 것을 보여줍니다. 기술은 비교적 적은 비용과 전문 지식을 설정할 수 있습니다, 그리고 그것은 정기적으로 상대적으로 약간의 훈련을 수행 할 수 있습니다. 이 MAK해야합니다이 가능한 연구실은 정기적으로함으로써 이에 필요한 마우스의 수를 최소화하고 자신의 제어로 각 마우스를 사용하여 통계 전력을 증가, 개인 마우스의 종 방향 연구를 수 있도록,이 삽관 법을 수행 할 수 있도록 전자.

서문

1999 년 브라운 외이 있습니다. 마우스 폐 ¹ 삽관하는 방법을 설명하는 논문을 발표했다. 이러한 기술은 종 방향 연구 ² 개인 마우스에 반복 폐 기능 또는 bronchoalveolar 세척을하고있어서 상당한 유틸리티가 있습니다. 그 원래의 종이 있기 때문에, 마우스 삽관 ^3-9에 다른 방법을 설명했습니다 몇 가지 다른 논문도했습니다. 이러한 방법의 모든 성공적으로 사용할 수 있지만, 그들은 일반적으로 상당한 훈련 또는 비용이 필요합니다. 이러한 삽관과 주요 문제 중 하나는 삽관 법의 캐뉼라 방식으로 기관 중 삽입 가까워 것입니다, 캐뉼라 자체가 빛과 따라서이 가야 할 곳의 시각화를 차단합니다. 따라서, 삽입은 가장 중요한 시간에 맹인이된다. 이 논문에서 우리는 간단하고 저렴한 비용으로함으로써 상대적으로 약간의 훈련 또는과 성공적인 삽관을 확보,이 시각화 문제를 제거하는 방법을 보여줍니다경험.

프로토콜

1. 절차 준비

하나는 먼저 획득하고 다음 항목을 준비해야합니다 :

1. 캐뉼라. 20-35g 마우스의 삽관을 위해, 우리는 긴 1 또는 1.5 인치, 20 게이지 IV 카테터를 (BD Insylte, 스파크, MD 또는 Jelco Optiva, Carlsbad, CA)을 사용합니다. 새로운 멸균 카테터는 각 마우스에 사용할 수 있지만, 카테터는 하루 아침에 70 %의 에탄올에 몸을 담글 수에 의해 살균 후 재사용 할 수 있습니다. 마우스의 인두 나 기관도는 멸균 장갑과 악기의 사용을 포함한 멸균 적절한 청결 절차이지만, 준수해야합니다.
2. fiberoptic 케이블. 우리 오빠 광학에서 0.5 mm 광학 케이블의 ≈ 70cm를 사용하지만, 길이가 중요하지 않습니다. 이 레이저와 길이로 케이블을 절단 한 후, 에지가 상대적으로 좌회전되기 때문에 섬유, 그 가장자리 부드럽게이 있는지 확인하는 것이 중요합니다, 그것은 tracheal 벽 피어스에 많은 노력을하지 않습니다. 그러나, 전s은 (는) 매우 간단 1,000 그릿 멀리 종이를 (의 비디오 및 그림 1의 데모를 볼 터치 끝의 가장자리에 끝에서 2cm에 대한 섬유를 개최 한 후 몇 초 동안 작은 원을 만들어이 가장자리를 부드럽게하기 맥도널드, 외. ^10). 다른 쪽 끝은 고무 마개를 통해 삽입됩니다. 이것은 가장 쉽게 첫번째 다음 바늘을 인출, 마개를 통해 18 게이지 바늘을 밀어 바늘 구멍을 통해 광섬유를 삽입하여 수행됩니다. 고무 마개 (예 NCL-150, Volpi 미국, 또는 기타 나 광원, 심지어 미만 150w) 150 와트 할로겐 라이트 소스에 연결되어 있습니다. 그것은 뜨거운 광원에 너무 가까이 위치하고 때 일반 고무 또는 코르크 굽기 수 있으므로, 실리콘 고무 (또는 다른 열 저항 소재)로 만든 마개를 사용하도록하십시오하는 것이 중요합니다.

2. 삽관 법을 수행

1. 도 1 및도 2를 참조하십시오. 광섬유 케이블 t를 삽입hrough 실리콘 고무 튜브의 짧은 부분 (≈ 0.8 mm ID X 4mm OD, 콜 - 팔머, EW-96410-13). 여전히 광섬유 케이블을 조정할 수 있도록하면서 매우 긴밀한이 고무 튜브를 묶어주세요. 캐뉼라의 Luer 끝에 석판 실리콘 튜브를 삽입하면 삽입 관 내부의 광섬유 케이블의 위치를​​ 수정합니다. 이 캐뉼라 끝의 앞에 캐뉼라 ≈ 4mm 통해 연장하도록 fiberoptic 케이블의 위치를​​ 조정합니다.
2. 의 상단 incisors (그림 3)에 의해 중지 수직 지원에 anesthetized 마우스를 놓습니다. 대부분의 조사는 자신이 직면하고있는 마우스의 복부 측면과 최고의 시각화를 찾으십시오. 아주 부드럽게 혀를 뽑아서 엄지와 집게 손가락으로 누르고 있습니다. 가운데 손가락은 목 및 플라스틱 지원 사이에 위치합니다. 집게 손가락과 엄지 손가락으로 혀 견인가 입을 열 및 삽관 경로를 바르게하는 데 사용됩니다, 머리의 각도는 목 뒤의 가운데 손가락으로 조정됩니다그림 3에 표시된.
3. 가벼운 소스와 소개 자로서 광섬유 케이블을 사용하여 시각화 성대를 통해 밀어. 코드가 표시되지 않으면 부드럽게 지원으로 가운데 손가락을 사용하여 혀에 더 당긴다. 삽입 할 때 더 캐뉼라 ≈ 5mm을 부활 시켰습니다. 그런 다음 매우 조심하는 것은, 캐뉼라를 이동 광섬유 케이블을 인출 할 수 없습니다. 마우스를 누워 캐뉼라를 확보 테이프 조각을하고 Plasticine (모델링 점토)의 작품에 캐뉼라 허브를 지원 그림 4에 표시.
4. 가 솔로 작업이기 때문에 3 단계의 절차는 쉽게 가르쳐거나, 입증 할 수 없습니다. 그러나, 혀와 머리 뒤의 지원에 견인의 미묘한 조정이 거의이 시도하는 모든 곧 성대를 시각화하기 위해 마우스를 위치 할 수있는 올바른 방법을 찾으십시오.

결과

방법의 평가, 우리는 27.7의 평균 중량 (± SEM) ± 0.40 g없이 네 20주 세의 남자 BALB / C 마우스를 사용했습니다. 이전 ¹¹ 설명 된대로 폐 저항이 시스템을 사용하여 측정 된 곳들은, 다섯 경기를 연속으로 주를 공부했다. 각 마우스 IP 주입을 통해 케타민 (100 μg / g BW) 및 염분의 xylazine (15 μg / g BW)와 anesthetized했습니다. 위에서 설명한대로 그들은 그 다음 intubated되었습니다. 캐뉼라가 기관이 아닌 ?...

토론

여기에 설명 된 절차는 몇 가지 장점이 있습니다. 먼저 장치 간단하고 상대적으로 저렴 .. 장치의 제조는 특별한 도구 나 비싼 장비가 필요하지 않습니다. 카테터의 사용은 또한 광원이 하나가 소개 자의 tracheal 개방에 접근로 tracheal 개방의 시력을 잃게 없다는 의미입니다 소개합니다. 0.5 mm의의 소개 자 사용은 큰 캐뉼라의 초기 삽입으로 발생할 수있는 충격을 최소화하는 역할을한다. 우리는 유?...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
자료	회사	# 카탈로그를	논평
삽관 법의 캐뉼라	BD Insylte, 스파크, MD 또는 Jelco Optiva, Carlsbad, CA		1 인치 길이, 20 게이지 정맥 주사 (IV) 카테터
광섬유 케이블	에드먼드 광학, 배 링턴, NJ	# NT02-542	약 2 피트 0.5-mm 광섬유의 길이 (통신 학년 플라스틱 섬유). 기관에 삽입되는 섬유 끝의 가장자리가 부드럽게 1000 그릿 모리 용지에 몇 초 동안 팁을 드래그 ≈ 2cm 끝에서 섬유를 개최하고 작은 원을 만들어 둥글게해야합니다.
광원	Volpi	NCL-150	우리는 훨씬 낮은 와트와 150 W 할로겐 광원, 이와 동등한 광원을 사용하지만사용할 수 있습니다.
실리콘 고무 마개			# 1 실리콘 고무 마개는이 예제에 사용되는 광원에 맞는. 다른 광원는 다른 크기를 필요로 할 수 있습니다.
작은 실리콘 고무 튜브	콜 - 팔머	EW-96410-13	실리콘 고무 튜브의 ≈ 1.5 cm 피스 (0.8 내부 직경 4mm 외경)
각진 지원 스탠드			우리는 플렉시 글라스에서 constucted되어 있지만, 스레드 또는 와이어 거의 수직 각도로 마우스를 잡아 부착 할 수 있습니다에 대한 어떤 자료를 사용할 수 있습니다.