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Method Article
여기에서 우리는 빠른 브릴 루앙 분광계를 구축 할 수있는 프로토콜을 제시한다. 실제로 묘화 위상 어레이 계단식 (VIPA) 탈론 이상 1,000 배 빠른 전통적인 주사 패브리 페롯보다 분광계 측정 속도를 달성한다. 이러한 개선은 생체 내에서 낮은 전력 레벨에서 조직 및 생체 재료의 브릴 리언 분석하는 수단을 제공한다.
이 프로토콜의 목적은 병렬 높은 흡광 고해상도 브릴 루앙 광 분광계를 구축하는 것이다. 브릴 리언 스펙트럼은 점탄성 재료 특성의 직접적인 판독 값을 얻기 위해 사용할 수있는 비접촉 측정 방법이다. 그것은 물질의 특성, 구조 모니터링 및 환경 감지에 유용한 도구가되고있다. 과거에는, 브릴 리언 스펙트럼은 일반적으로 스펙트럼 분석을 수행하는 주사 파브리 - 페롯에 탈론을 사용했다. 이 과정은 생물 의학 응용 프로그램에 적합하지 않은 기술을, 높은 조명 전력과 긴 획득 시간을 필요로한다. 최근 도입 된 새로운 분석계는 교차 축 배열 된 2 VIPAs을 이용함으로써 이러한 문제를 극복한다. 이러한 혁신은 생체 조직의 안전 한계 내에서 서브 초 획득 시간 및 조명 전력으로 서브 (기가 헤르츠)의 고해상도 스펙트럼 분석을 가능하게한다. 이 개선에 의해 촉진 여러 새로운 응용 프로그램은 CU 있습니다rrently 생물학 연구 및 임상 응용 프로그램에서 탐구되고.
먼저 1922 년에 레온 브릴 루앙 (1)에 의해 설명 브릴 루앙 산란은, 고체 및 액체 또는 가스의 열 밀도 변동에서 열 음향 모드에서 빛의 비탄성 산란입니다. 일반적으로, 서브 - 헤르쯔 범위의 산란광의 스펙트럼의 시프트는, 입사광과 샘플 음향 포논 상호 작용에 대한 정보를 제공한다. 그 결과, 시험 물질의 점탄성 특성에 관한 유용한 정보를 제공 할 수있다.
그 자발 버전에서는 브릴 루앙 산란은 일반적으로 매우 약한 신호의 결과로, 라만 산란의 순서의 단면을 갖는다. 또한, 브릴 루앙 주파수 변화는 라만 변화보다 작은 크기의 주문이다. 결과적으로, 탄성, 미광, 백 반사 (레일리 또는 미 산란에서) 모든 쉽게 브릴 루앙 스펙트럼 서명을 압도 할 수있는 샘플 떨어져 빛을 산란. 금후, 브릴 루앙 분광계는 서브 GHz의에게 스펙트럼 해상도뿐만 아니라 높은 스펙트럼 대비 또는 멸종을 달성 할뿐만 아니라 필요가있다.
전통적인 브릴 루앙 분광계에서 이러한 요구 사항은 가장 널리 주사 격자 단색화, 광 비팅 방법 및, 다중 - 통과 주사 파브리 - 페로 간섭계 (2)에 의해 충족된다. 이러한 방법은 각각의 스펙트럼 성분을 순차적으로 측정한다. 이 방법은 악기와 샘플에 따라 몇 시간 몇 분에 이르기까지 하나의 브릴 리언 스펙트럼에 대한 수집 시간에 이어집니다. 이 프로토콜을 사용하여 구축 이단 VIPA 분광계는 효과적으로 다른 스퓨리어스 2를 억제하기에 충분한 소멸 (> 60dB)를 제공하면서보다 작은 초 이내에 스펙트럼 성분의 전부를 수집하는 기능을 갖는다.
VIPA 탈론의 통합이 분광기의 핵심 요소이다. VIPA는 세 가지 다른 C와 고체에 탈론입니다영역 떠 : 표면의 나머지 부분은 고 반사 (HR) 코팅을 갖추고하면서 표면에, 폭이 좁은 반사 방지막 스트립, 광 VIPA를 입력 할 수; 배면에, 부분적으로 반사 코팅은 광의 작은 부분 (~ 5 %)를 송신 할 수있다. 약간 기울어 VIPA의 좁은 입구에 집중되면, 광 빔은 2 VIPA 내의 고정 된 위상차와 하위 구성 요소에 반영 얻는다. 하위 구성 요소 간의 간섭이 갈망 높은 스펙트럼 분산을 달성한다. 교차 축 구성에 순차적으로 두 VIPAs를 정렬하면 직교 방향으로 3 스펙트럼 분산을 소개합니다. 직교 방향의 스펙트럼 분산은 공간적으로 가능 만 브릴 루앙 신호를 포착 할 수 있습니다 원치 않는 크로스 토크에서 브릴 루앙 피크를 분리한다. (1) 표시를 2 단계 VIPA 분광계의 개략적 인 그림. 광학 요소 아래 화살표를 표시 ℃에서병진 스테이지가 지향되어야하는 자유 REE.
그림 1. 기악 설치. 광섬유는 분광계에 브릴 루앙 산란을 제공합니다. 원통형 렌즈 C1 (F = 200mm)는 제 VIPA (VIPA1)의 입구에 빛을 집중한다. 다른 원통형 렌즈 C2 (F = 200mm)은 C2의 초점면에서 공간적으로 분리 된 스펙트럼 각도 소산을 매핑한다. 이 평면에서, 수직 마스크 스펙트럼의 원하는 부분을 선택하는데 사용된다. 유사한 구성이 90 도로 기울어 져, 다음과 같다. 빔은 구면 렌즈 S1 (F = 200mm)을 통과하여 제 VIPA (VIPA2)의 입구 슬릿에 집중된다. 구면 렌즈 (S2) (F = 200mm)는 다른 수평 마스크를 배치의 초점면에있는 두 개의 차원 스펙트럼 분리 패턴을 생성합니다. 호르냅 마스크가 무색 렌즈 쌍을 사용 EMCCD 카메라 상에 묘화된다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
일부 광학의 과정과 기본 정렬 경험이있는 학부 학생 구축하고이 두 단계 분광계를 사용할 수 있어야합니다. 분광계 최근 표준 광학 프로브의 다양한 3,4,5- (예를 들어, 공 초점 현미경, 내시경, 세극등 검안경)와 호환하는 것으로 나타났다. 여기에서, 분석 장치는 공 초점 현미경에 접속된다. 레이저 광은 90:10 빔 스플리터를 통합 한 후 표준 연구 도립 현미경 시스템에 정렬된다. 샘플로부터의 산란 광은 공 초점 현미경을, 단일 모드 광섬유로 연결된다.
참고 : 브릴 루앙 스펙트럼 분석은 단일 종 모드 레이저 (~ 샘플에서 10 mW의)가 필요합니다. 목적을 정렬하기위한,이 레이저 빔 (<0.1 MW)의 강하게 감쇠 된 부분을 사용한다.
1. 초기 섬유의 설치 및 EMCCD (전자 곱한 전하 결합 소자) 카메라
분광계 2. 수평 단계
분광계 3. 수직 무대
두 단계 및 최종 정렬 4. 조합
5. 브릴 루앙 Shift 키를 측정
6. 교정 및 분석 브릴 루앙 스펙트럼의
2. 분광계 교정 그림. (A) EMCCD 카메라 프레임은 보정 샘플로부터 얻어진. (B) 측정 된 데이터 (파란색)에 로렌츠 곡선 맞춤 (빨간색). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3은 대표적인 브릴 루앙 스펙트럼과 다른 재료에 대한 자신의 적합을 보여줍니다. VIPAs 모두 약 20 ㎓의 FSR의 결과 5mm의 두께를 갖는다. 이러한 측정을위한 통합 시간은 100 밀리 초이었다. (100) 측정을 수행하고 평균되었다. 하나의 교정 측정은 스펙트럼을 획득하기 전에 촬영했다.
이 분광계 구성의 주요 설계 특징은 두 단계가 독립적으로 배향 될 수 있다는 것이다. 각 단계에서의 스펙트럼 패턴이 CCD 카메라에 결상되도록 한 촬상 시스템 : VIPA 탈론가 광로 밖으로 슬라이드하면 분광계 스테이지의 나머지 렌즈 (1)를 형성한다. 그러므로, 다른 단계의 배향에 영향을주지 않고 그 성능을 개선하는 단계 중 어느 하나에 돌아갈 간단하다. 프로토콜에서 제안하고 스테이지 병진 ?...
Giuliano Scarcelli and Seok H. Yun hold patents related to Brillouin spectroscopy technology.
This work was supported in part by the National Institutes of Health (P41-EB015903, R21EY023043, K25EB015885), National Science of Foundation (CBET-0853773) and Human Frontier Science Program (Young Investigator Grant).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
OPTICS | |||
VIPA (virtual image phase array) | LIGH MACHINERY | Quantity: 2 | |
Bundle of Three 423 Linear Stages with SM-25 Micrometers | NEWPORT | 423-MIC | Quantity: 1 |
SS Crossed-Roller Bearing Translation Stage, 0.5 in., 8-32, 1/4-20 | NEWPORT | 9066-X | Quantity: 1 |
Vernier Micrometer, 13 mm Travel, 9 lb Load Capacity, 50.8 TPI | NEWPORT | SM-13 | Quantity: 1 |
Adjustable Width Slit | NEWPORT | SV-0.5 | Quantity: 2 |
Compact Dovetail Linear Stage, 0.20 in. Z Travel, 1.57x1.57x1.38 in. | NEWPORT | DS40-Z | Quantity: 2 |
Slotted Base Plate, 25 or 40 mm to 65 mm Stage, 1.1 in. Range | NEWPORT | B-2B | Quantity: 2 |
Ø1/2" Optical Post, 8-32 Setscrew, 1/4"-20 Tap, L = 2", 5 Pack | THORLABS | TR2-P5 | Quantity: 2 |
Ø1/2" Post Holders, Spring-Loaded Hex-Locking Thumbscrews, L = 2", 5 Pack | THORLABS | PH2-P5 | Quantity: 1 |
Ø1/2" Post Holders, Spring-Loaded Hex-Locking Thumbscrew, L = 3", 5 Pack | THORLABS | PH3-P5 | Quantity: 1 |
Imperial Lens Mount For 2" Optics, 8-32 Tap | THORLABS | LMR2 | Quantity: 2 |
f=200.0 mm, Ø2" Achromatic Doublet, ARC: 400-700 nm | THORLABS | AC254-200-A | Quantity: 2 |
Kinematic Mount for up to 1.3" (33 mm) Tall Rectangular Optics, Right Handed | THORLABS | KM100C | Quantity: 2 |
Fixed Cylindrical Lens Mount, Max Optic Height: 1.60" (40.6 mm) | THORLABS | CH1A | Quantity: 2 |
f=200.00 mm, H=30.00 mm, L=32.0 mm, N-BK7 Plano-Convex Cylindrical Lens, Antireflection Coating: 350-700 nm | THORLABS | L1653L1-A | Quantity: 2 |
Right-Angle Post Clamp, Fixed 90° Adapter | THORLABS | RA90 | Quantity: 1 |
Adapter with External C-Mount Threads and Internal SM1 Threads | THORLABS | SM1A9 | Quantity: 1 |
Studded Pedestal Base Adapter, 1/4"-20 Thread | THORLABS | PB4 | Quantity: 2 |
Spacer, 2" x 3", 1.000" Thick | THORLABS | Ba2S7 | Quantity: 2 |
543 nm, f=15.01 mm, NA=0.17 FC/APC Fiber Collimation Pkg. | THORLABS | F260APC-A | Quantity: 1 |
SM1-Threaded Adapter for Ø11 mm collimators | THORLABS | Ad11F | Quantity: 1 |
Translating Lens Mount for Ø1" Optics, 1 Retaining Ring Included | THORLABS | LM1XY | Quantity: 1 |
Single Mode Patch Cable, 450 - 600 nm, FC/APC, 2 m Long | THORLABS | P3-460B-FC-2 | Quantity: 1 |
1:1 Matched Achr. Pair, f1=30 mm, f2=30 mm, BBAR 400-700 nm | THORLABS | MAP103030-A | Quantity: 1 |
SM1 Lens Tube…length to adjust depend on CCD, we have 3.5 inches | THORLABS | SM1LXX | Quantity: 1 |
Base Adapters for Ø1/2" Post Holders and Ø1" Posts | THORLABS | BE1 | Quantity: 8 |
Clamping Forks for Ø1/2" Post Holders and Ø1" Posts | THORLABS | CF125 | Quantity: 8 |
HW-KIT5 - 4-40 Cap Screw and Hardware Kit for Mini-Series | THORLABS | HW-KIT5 | Quantity: 1 |
D20S - Standard Iris, Ø20.0 mm Max Aperture | THORLABS | D20S | Quantity: 2 |
FOR ENCLOSURE | |||
25 mm Construction Rail, L = 21" | THORLABS | XE25L21 | Quantity: 6 |
1" Construction Cube with Three 1/4" (M6) Counterbored Holes | THORLABS | RM1G | Quantity: 8 |
Right-Angle Bracket for 25 mm Rails | THORLABS | XE25A90 | Quantity: 12 |
25 mm Construction Rail, L = 15" | THORLABS | XE25L15 | Quantity: 4 |
25 mm Construction Rail, L = 9" | THORLABS | XE25L09 | Quantity: 8 |
High Performance Black Masking Tape, 2" x 60 yds. (50 mm x 55 m) Roll | THORLABS | T743-2.0 | Quantity: 1 |
Low-Profile T-Nut, 1/4"-20 Tapped Hole, Qty: 10 | THORLABS | XE25T3 | Quantity: 1 |
1/4"-20 Low-Profile Channel Screws (100 Screws/Box) | THORLABS | SH25LP38 | Quantity: 1 |
60" (W) x 3 yds. (L) x 0.005" (T) (1.5 m x 2.7 m x 0.12 mm) Blackout Fabric | THORLABS | BK5 | Quantity: 1 |
CAMERA, LASER and MICROSCOPE | |||
EMCCD camera | ANDOR | iXon Ultra 897 | Quantity: 1 |
400 mW single mode green laser | LASER QUANTUM | torus 532 | Quantity: 1 |
Research Inverted System Microscope | OLYMPUS | IX71 | Quantity: 1 |
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