마우스의 신경병증성 통증에 대한 수정된 보존 신경 손상 수술 모델

요약

수정된 수술은 생쥐 또는 쥐 보존 신경 손상 모델에 대한 단순화된 방법으로, 일반 비골 신경과 천성 신경을 모두 손상시키기 위해 한 번의 결찰과 한 번의 절개만으로 됩니다.

초록

SNI(Spared Nerve Injury)는 생쥐와 생쥐에서 신경병증성 통증의 분자 및 세포 메커니즘을 연구하기 위해 말초 신경 손상의 주요 증상을 모방한 동물 모델입니다. 현재 SNI 모델에는 두 가지 유형이 있는데, 하나는 본 연구에서 SNI로 정의된 온전한 경골 신경으로 총비골 및 경골 신경을 절단하고 결찰하는 것이고, 다른 하나는 본 연구에서 SNIt로 정의된 온전한 경골 신경으로 총비골 신경과 경골 신경을 절단하고 결찰하는 것입니다. 경골 신경은 운동 섬유와 감각 섬유를 모두 포함하는 반면 경골 신경은 순전히 감각 신경이기 때문에 SNIt 모델은 SNI 모델보다 운동 결핍이 훨씬 적습니다. 전통적인 SNIt 마우스 모델에서는 총비골신경과 비골신경을 별도로 절단하고 결찰합니다. 여기에서는 한 번의 결찰과 한 번의 절제만으로 일반 비골 신경과 천골 신경을 모두 손상시키는 수정된 SNIt 수술 방법을 설명하며, 이는 시술이 더 쉽고 좌골 또는 경골 신경이 늘어날 수 있는 잠재적 위험을 줄이며 전통적인 SNIt 모델과 유사한 기계적 과민증을 생성합니다.

서문

수술 또는 외상 후 신경 손상으로 인한 신경병증성 통증은 삶의 질을 저해하는 상당한 경제적 부담을 수반합니다. 척추 신경 결찰술(spinal nerve ligation, SNL)¹, 좌골 신경에 대한 만성 수축 손상(chronic constriction injury, CCI)², 부분 좌골 신경 결찰술(partial sciatic nerve ligation, pSNL)³, 좌골 신경 거래(sciatic nerve transaction, SNT)⁴ 및 예비 신경 손상(spared nerve injury, SNI)5,6,7,8을 포함한 다양한 신경 손상 모델이 성공적으로 개발되었으며, 쥐와 생쥐의 분자 및 세포 메커니즘을 연구하기 위해 말초 신경 손상의 주요 증상을 모방하기 위해 성공적으로 개발되었습니다. 신경병증성 통증

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프로토콜

동물 실험은 UCSF Institutional Animal Care and Use Committee의 승인을 받았으며 NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals에 따라 수행되었습니다. 이 연구에서는 20-30g 무게의 성인 C57BL/6 마우스를 사용했습니다. von Frey 평가는 오후 1:00에서 오후 3:00 사이에 수행되었습니다.

1. 마취 및 마우스 준비

1. 완전히 마취될 때까지 1.0L/min의 유속으로 O₂ 의 2% 이소플루란으로 채워진 플라스틱 챔버에 마우스를 넣습니다.
2. 솜털 어플리케이터를 사용하여 안과 연고로 눈을 가립니다.
3. 수술 절차 전반에 걸쳐 2%의 이소플루란 흐름이 있는 유연한 코콘에 쥐의 주둥이를 놓습니다.
4. 마우스를 오른쪽 측면 위치에 놓습니다. 무릎 굴곡으로 왼쪽 다리를 위로 유지하고 접착 테이프로 고정합니다.
5. 허벅지와 무릎 주위의 털을 전기 면도기와 제모 크림으로 제거합니다. 2% 클로르헥시딘과 70% 알코올로 피부를 소독합니다.
6. 핀셋을 표준으로 사용하....

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결과

수정된 방법과 기존 방법 간의 절차 시간 비교.
피부를 절단하는 시작부터 피부를 닫는 끝까지의 시술 시간은 수정된 접근법을 사용한 5마리의 마우스와 전통적인 접근법을 사용한 5마리의 마우스에서 각각 기록되었습니다. 통계적으로 유의한 결과를 얻기 위해 최소한의 동물을 사용했습니다. SNIt를 수행하기 위한 전통적인 접근법 ^7,1.......

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토론

일반 비골 신경과 비골 신경을 별도로^결찰하는 전통적인 마우스 SNIt 방법과 비교하여 6,7,8,9, 수정 된 SNIt 모델은 세 가지 장점이 있습니다 : (1) 좌골 신경 또는 경골 신경을 수축하거나 늘릴 위험이 적습니다. (2) 신경절단 후 원위신경 그루터기를 제거할 필요가 없는데, 이는 ?.......

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자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
6-0 suture	Henry Schein	9007482	Nerve ligation and close the muscular layer
Iris Scissors	Integra Miltex	12460598	Cut muscle and fascia
Mayo dissecting scissors	Fisherbrand	895120	Cut skin incision
Micro forcep	Fisherbrand	16100110	Blunt dissection biceps femoris muscle
Micro Scissors	Excelta	17467496	Cut nerve
Microdissection Forceps	Fisherbrand	16100123	Separate the common peroneal and the sural nerves from the neighboring tissues
Needle Holder	Fisherbrand	8966	Hold 6-0 needle
Prism software	Graph Pad	version 8.0	Statistical analysis software
Wound clips	Roboz Surgical	NC1878744	Close skin incision