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요약

여기에서는 골다공증 모델 쥐의 중재에 Lingnan Fire-Needle 요법을 적용하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

초록

filiform 바늘 치료와 비교하면 불 바늘 치료는 바늘의 자극과 열에 의한 온열 작용이 모두 있기 때문에 일부 만성 질환이나 난치병에 예상치 못한 효과를 발휘합니다. 골다공증(OP)은 폐경 후 여성과 중년 및 고령 남성에서 발병률이 높으며 치료 주기가 깁니다. 중국 전통 의학(TCM)에 따르면 링난 불 바늘 요법은 골다공증 치료에 대한 잠재력을 보여주었습니다. 그러나 널리 사용되기까지는 아직 갈 길이 멉니다. 이 기사는 쥐에 대한 OP의 개입에 Lingnan 화염 바늘 요법의 적용에 중점을 둡니다. 바늘 도구 선택, 경혈 선택, 쥐의 몸 위치 및 고정 방법을 다룹니다. 또한 불 바늘로 바늘을 꿰매는 동안과 후에 취해야 할 단계와 예방 조치를 간략하게 설명합니다. 실험은 정상 그룹, 모델 그룹, 화염 바늘 그룹의 세 그룹으로 수행되었으며 각 그룹에는 10 마리의 쥐가 포함되었습니다. 불-바늘 그룹의 쥐는 6 세션 동안 불-바늘 중재로 치료되었습니다. 중재 기간이 끝난 후, 대퇴골 표본을 채취하고 마이크로 CT 스캔을 수행했습니다. 결과는 파이어 니들링이 OP 쥐의 뼈 형태와 미네랄 밀도를 향상시킬 수 있음을 시사합니다. 이 정보는 불-바늘 치료에 대한 기초 연구를 수행하기 위한 방법론적 기초가 될 수 있습니다.

서문

한의학은 기후와 환경과 같은 요인이 사람의 체격에 영향을 미칠 수 있으며, 이는 다시 질병의 발생과 발병에 영향을 미칠 수 있다고 믿습니다. 주로 광둥성, 광시성, 하이난 섬을 포함하는 중국의 링난 지역은 열대 계절풍 기후 지역에 위치하고 있습니다. 결과적으로, 이 지역에서 오랫동안 살았던 사람들은 일종의 비장 결핍증에 걸리기 쉽다. 경우에 따라서는 신장과 간으로 전이되어 골다공증의 유병률을 유발하기도 한다1. 비장(脾臟)과 위(胃)는 기(氣)와 혈액(腺)의 생화학(腸語)의 원천이 되는 물과 곡물을 운반하고 흡수하는 기능을 하며, 간(肝)은 골수를 유지하는 데 도움을 줍니다. 따라서 뼈의 영양은 비장, 위, 간의 공급에 의존합니다. 한의학에서 신장은 골수를 생성하고 뼈를 강화하는 능력이 있으며 그 생명력은 뼈의 강도와 기능에 직접적인 영향을 미칩니다. 따라서 신장 결핍은 골다공증과 직접적인 관련이 있습니다. TCM에 따르면 간(Gan)-신장(Shen) 결핍과 본질 부족(Jing)이 근본적인 원인입니다. 어떤 경우에는 비장(Pi)과 위(Wei) 결핍 또는 둘의 불균형으로 인해 영양실조가 발생할 수 있습니다. 즉, 간(Gan), 신장(Shen), 비장(Pi), 위(Wei)의 결핍이 근본 원인이며, 외부의 기(Xie qi)는 경락을 막고 뼈와 근육을 손상시킵니다. 세계보건기구(WHO)에 따르면, OP는 낮은 골량과 조직 악화를 특징으로 하는 의학적 상태입니다2 이는 노인에게 심각한 우려 사항입니다. 골다공증의 예방과 치료에는 적절한 중재를 선택하는 것이 중요합니다.

현대의 침술사들은 링난의 기후와 링난족의 신체적 특징을 결합하여 독특한 링난의 불침 요법을 개발하였다3. 파이어 니들 테라피는 특수 바늘을 빨갛게 태워 인체의 특정 부위나 경혈을 빠르게 찔러 다양한 질병을 치료하는 일종의 치료 방법입니다. 이 방법은 피부병, 근골격계 및 관절 질환, 신경 질환 및 기타 전신 질환에 널리 사용되며 우수한 효능을 보여줍니다4. 소방 바늘을 이용한 골다공증 치료는 오랫동안 클리닉에서 사용되어 왔으며 한의학의 단순한 침술이나 경구 투여보다 치료 효과가 우수합니다 5,6,7. Lingnan 불-바늘 요법은 침술, 삼날 바늘 및 흉터 뜸을 통합합니다. 그것은 신장을 따뜻하게하면서 경락의 기와 혈액 순환을 향상시킬 수 있습니다. 이 치료법은 한의학에서 OP의 발병에 기여하는 혈액 정체와 신장 (Shen) 결핍을 모두 해결할 수 있습니다. 또한 비용이 저렴하고 효과가 빠르며 치료 기간이 짧고 안전하다는 장점이 있습니다. 그러나 그 메커니즘에 대한 연구가 부족합니다. 본 논문은 골다공증 모델 쥐를 대상으로 한 Lingnan Fire-Needle의 구체적인 절차를 소개하고 관련 기초 연구를 수행하기 위한 방법론적 기초를 제공합니다.

프로토콜

모든 실험은 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 실험동물 관리 및 사용 가이드(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)에 따라 수행되었으며, 후베이성 중의학 대학(Hubei University of TCM)의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았습니다. 무게가 220 ± 20 g인 성인 암컷 Sprague-Dawley (SD) 쥐가 시험에 사용되었다. 모든 쥐는 23± 1°C 및 40%-50% 습도에서 12시간 밝음/어두운 주기로 유지되었으며 음식과 물에 자유롭게 접근할 수 있었습니다.

1. 수술 전 준비

  1. 그룹 디자인
    1. 30개월 된 암컷 쥐 30마리의 유전형 분석 후 무작위로 정상 그룹, 모델 그룹 및 화염 바늘 그룹의 세 그룹(각 그룹에서 n = 10)으로 나눕니다. 불-바늘 그룹의 쥐를 불-바늘 개입으로 하루 1회 6회 치료하고 세션 사이에 1일의 휴식을 취합니다.
      참고: 정상군과 모델군은 불-바늘 그룹과 동일한 빈도와 동일한 기간에 따라 안전한 털로 묶인 쥐를 매달았지만 화염-바늘 처리는 하지 않았습니다.
  2. 쥐 골다공증 모델 준비
    1. 모델 그룹과 화염 바늘 그룹의 쥐의 경우8,9,10에 설명된 대로 골다공증 모델을 확립하기 위해 난소를 외과적으로 제거합니다.
      1. 난소 절제술의 경우 수술 전에 2% 펜토바르비탈 나트륨(0.2mL/100g)을 복강 내 주사로 마취를 시행하고, 발가락 꼬집기 검사에서 반응이 없어 수술 마취 평면에서 동물이 반응이 없는 경우 성공적인 마취를 고려합니다. 마취 상태에서 눈이 건조해지는 것을 방지하기 위해 눈에 수의사 연고를 사용하십시오. 수술 전에 진통제로 부프레노르핀(0.05mg/kg)을 피하 주사합니다. 작동 중에는 무균 상태를 유지하십시오.
        참고: 수술이 완료되지 않았고 쥐가 소생의 징후를 보이는 경우, 2% 펜토바르비탈 나트륨 용액의 복강 내 주사를 일시적이고 적절하게 보충할 수 있으며, 각 추가 투여량은 총 주입량의 20%를 초과하지 않습니다.
      2. 수술 후 쥐를 작은 동물 가열 패드에 놓고 온도를 32 °C로 설정합니다. 쥐가 의식을 되찾고 자유롭게 기어 다닐 수 있을 때까지 쥐를 방치하지 마십시오. 완전히 회복될 때까지 다른 동물과 함께 돌려보내지 마십시오.
      3. 쥐가 소생하면 봉합사의 무결성을 확인하고 쥐를 다시 케이지에 넣으십시오. 모든 쥐에게 페니실린 나트륨 (50,000 U/일, 3 일)을 근육 주사하고 0.1 mL 0.05 % 디클로페낙 나트륨 용액 (일당, 3 일)을 복강 내로 주사하여 감염을 예방하고 치유를 촉진합니다 9,10.
    2. 11에 설명된 대로 암컷 쥐의 질 박리 세포 도말에 따라 발정 주기를 관찰하십시오. 주기가 무질서하면 모델이 성공적으로 설정됩니다11.
      참고: 난소 절제술 후 쥐가 골다공증이 발생하는 데 약 8-12주가 걸립니다.
  3. 바늘 도구 선택
    1. 의료 기기 제조업체에서 화재 바늘을 구입하십시오. 바늘 도구가 온도에 강하고 가단성이 없으며 변형하기 쉽지 않고 균일하게 가열되는 텅스텐-망간 합금으로 만들어졌는지 확인하십시오. 화재 바늘은 필라멘트 바늘 모양입니다. 바늘이 두꺼운지, 끝이 날카롭고 곧은지, 손잡이가 단열성이 있고 손에 화상을 입지 않는 구리선으로 싸여 있는지 확인하십시오.
    2. 쥐는 작기 때문에 0.40mm x 13mm 크기의 단일 머리 화재 바늘을 선택하십시오. 화재 바늘에 미늘과 균열이 있는지 확인하십시오.
      참고: 임상 실습에서 사용되는 대부분의 화재 바늘은 국가 의료 마스터12인 He Puren이 개발한 것입니다. 이를 바탕으로 Lin Guohua는 Lingnan Long-Headed Fire Needle과 Lingnan Three-Headed Fire Needle13을 만들었습니다. 실험의 필요성에 따라 다양한 크기의 소방 바늘을 선택하십시오.
  4. 경혈의 선택 및 위치 지정
    1. 관련 데이터 및 문헌에 따르면 폐경 후 골다공증 치료를 위해 경혈을 선택하십시오.
      알림: 가장 자주 사용되는 경혈은 빈도 순으로 Shenshu(BL 23), Zusanli(ST 36), Pishu(BL 20), Xuanzhong(GB 39) 및 Dazhu(BL 11)14,15입니다. 탈배란 모델 쥐의 골다공증에 대한 침술 중재에 대한 기초 연구에서 가장 많이 사용되는 경혈은 Shenshu(BL 23), Sanyinjiao(SP 6), Guanyuan(CV 4) 및 Zusanli(ST 36)16,17,18입니다.
    2. 이 실험을 위해 선택된 경혈을 결정합니다. 본 연구에서는 선행 연구 14,15,16,17,18에서 선정된 경혈과 골다공증의 발병기전을 참조하여 Shenshu(BL 23), Pishu(BL 20), Zusanli(ST 36) 및 Sanyinjiao(SP 6)의 4가지 경혈을 선택합니다. 이들은 방광 경락, 두 경락, 비장 경락 및 신장 경락에 해당합니다.
      알림: 큰 혈관과 신경 줄기가 있는 부분에 화염 바늘을 사용하는 것은 금지되어 있습니다.
    3. 경혈이 노출되도록 위치를 잡기 전에 애완 동물 전기 클리퍼로 경혈 부위를 면도하십시오.
    4. 경혈의 위치는19에서 일반적으로 사용되는 경혈의 이름과 위치를 나타냅니다. 다음과 같이 경혈을 찾으십시오 : Shenshu (BL 23)는 두 번째 요추의 아래쪽 두 쪽에 있으며 중간 등쪽 선에서 6mm입니다. Pishu (BL 20)는 12번째 흉추의 아래쪽 두 쪽에있는 갈비뼈 사이에 위치하며, 중간 등쪽 선에서 6mm입니다. Zusanli (ST 36)는 무릎의 뒤쪽과 측면에 위치하며 비골의 작은 머리 아래 약 3mm에 있습니다. Sanyinjiao (SP 6)는 뒷다리의 안쪽 발목 끝에서 약 10mm 직선으로 위치합니다.
    5. 점을 찾은 후 유성 마커로 표시하십시오.
  5. 쥐 억제 방법
    참고: 쥐의 고정 및 치료 중 스트레스를 줄이기 위해, 안전한 코트(20,21)로 묶인 부유 쥐를 고정화 방법으로 선택했습니다. 랫 코트 현탁 방법은 다음과 같은 장점이 있습니다 : 첫째, 어두운 환경을 선호하는 쥐의 습관을 최대한 활용하고 고정 중 쥐의 스트레스 반응을 줄입니다. 둘째, 매달린 쥐는 팔다리와 발가락에 힘이 가해지지 않기 때문에 불 바늘 치료의 전체 과정에서 더 조용하고 협조적입니다. 셋째, 쥐의 등과 팔다리에 있는 경혈은 치료를 용이하게 하기 위해 충분히 노출되었습니다. 한 번의 치료는 5-10분 동안 쥐를 억제해야 합니다. 털에 단단히 고정되어 있으면 쥐는 구속에 어려움을 겪지 않고 침착합니다.
    1. 쥐 털을 준비합니다. 깨끗이 닦은 천을 꿰매어 50cm x 13cm 튜브 모양의 쥐 코트로 만듭니다. 쥐 털의 네 팔다리와 뒤쪽에 각각 구멍을 뚫고 네 모서리에 넥타이를 꿰매십시오.
    2. 장갑을 끼고 미끄럽지 않은 탁자 위에 쥐를 놓고 왼손으로 쥐의 꼬리를 잡고 부드럽게 뒤로 당깁니다. 오른손으로 쥐 털의 포트를 엽니다. 쥐의 어둡고 굴을 파는 습관을 이용하여 쥐의 털 입구에 놓으면 쥐가 스스로 그 안으로 굴을 파고 들어갈 것입니다.
    3. 쥐가 쥐털 한가운데로 굴을 파고 들어갈 때 왼손으로 쥐의 어깨뼈 양쪽을 잡고 오른손으로 쥐의 두 앞다리를 잡아당깁니다.
    4. 털 앞쪽의 밧줄을 조이고 밧줄을 건너서 쥐의 등을 감습니다. 밧줄의 탄성을 조정하고 쥐의 등에 매듭을 묶습니다. 마지막으로, 쥐의 몸의 뒤쪽 끝을 비슷한 방식으로 고정하여 양측 뒷다리가 쥐의 털 바깥쪽에 위치하도록 합니다.
    5. 스윙 타입 서스펜션의 경우 두 개의 S-훅을 가져다가 랫 코트 뒷면의 매듭에 걸고 훅을 철제 프레임에 겁니다. 이 시점에서 쥐는 약간 흔들리는 상태로 천 조각에 매달려 있습니다(그림 1).
      알림: 땅에서 천 조각의 높이는 약 70cm로 의자에 앉은 실험자가 편안하고 쉽게 작동할 수 있습니다. 동물이 미끄러질 경우 예방 조치로 쥐 아래의 평평한 표면에 두꺼운 패딩을 놓습니다.

2. 침 치료

  1. 소독
    1. 침술을 하기 전에 5% 요오드포 소독액으로 국소를 3번 소독합니다. 각 요오드포 스크럽 후에 알코올 럽을 추가하십시오.
  2. 불타는 바늘
    알림: 화상과 부상을 방지하기 위해 안전 예방 조치를 취해야 합니다.
    1. 지혈 겸자를 가져 와서 95 % 알코올에 적신 면봉을 왼손으로 집어 들고 라이터로 불을 붙입니다.
    2. 오른손의 엄지, 검지, 중지로 바늘 손잡이를 펜을 잡는 것처럼 약간 구부린 위치로 잡습니다.
    3. 바늘 끝과 바늘 본체를 알코올 면봉에 놓고 가열하십시오. 먼저 바늘 본체를 가열한 다음 바늘 끝을 가열합니다. 치료 목적에 따라 밝은 흰색 또는 빨간색이 될 때까지 바늘을 태웁니다(그림 2).
      참고: 바늘 몸체는 밝은 흰색 또는 빨간색으로 완전히 태워야 하며, 그렇지 않으면 침술의 효능에 영향을 미치거나 수술 후 감염 및 기타 문제를 일으킬 수 있습니다.
  3. 침술
    참고 : 속도, 깊이, 범위, 바늘 유지 시간 및 치료 목적에 따라 Lingnan Fire-Needle은 점 침술, 산란 침술, 조밀 침술, 빠른 침술 및 느린 침술과 같은 다양한 운영 기술로 나눌 수 있습니다22. Lingnan Fire-Needle로 작동하는 핵심은 빨간색, 정확하고 빠르다는 것입니다.
    1. 바늘이 빨갛게 탈 때까지 기다렸다가 바늘을 화염에서 멀리 옮기고 경혈 위에 둡니다.
    2. 바늘 끝을 경혈에 수직으로 향하게 하고 빠르게 구멍을 뚫고 빼냅니다. 전체 프로세스가 1초 이내에 완료되었는지 확인합니다.
    3. 경혈 침투 깊이는 약 1-2mm이며 빨갛게 달궈진 바늘 끝만 뚫습니다.
      참고: 침술의 깊이는 상태, 체질, 연령, 경혈의 근육 두께, 혈관의 깊이, 신경의 분포에 따라 결정해야 합니다.
    4. 각 경혈을 3x-5x 찔러 넣습니다. 모든 경혈에 대해 이 작업을 반복합니다(그림 3).
      알림: 작업을 수행할 때 완전히 집중하고 민첩하게 하십시오. 쥐에 대한 동일한 절차에서 동일한 불 바늘을 사용해야하며, 바늘은 두 개의 구멍 사이에 불을 붙여 다시 살균해야합니다. 바늘을 내려놓거나 멸균되지 않아야 합니다.

3. 침 치료 후 관리

  1. 화재 바늘을 피부에서 들어 올리고 멸균 마른 면봉을 잡고 바늘 구멍을 눌러 출혈을 방지합니다. 화염 바늘 요법 후, 쥐는 이동성에 장애가 없었고 감지할 수 있는 합병증이 없었다.
    알림: 화재 니들링 후 출혈이 발생하면 출혈을 멈출 필요가 없으며 자연적으로 멈춘 후 마른 면봉으로 닦기만 하면 됩니다.

4. 데이터 수집 및 분석

  1. 6 과정의 화염 바늘 중재 후, 펜토바르비탈 나트륨 (150-200 mg / kg)의 고용량 복강 내 주사로 쥐를 안락사시킵니다. 대퇴골 검체 채취 및 마이크로 CT 스캔 수행23.
  2. 분석 소프트웨어를 사용하여 데이터를 통계적으로 분석합니다. 측정값을 평균으로 표시하고 일원 분산 분석을 사용하여 분석하며, p <0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다.

결과

표 1의 데이터는 정상군과 비교하여 모델군에서 섬유주골의 두께(Tb.Th), 섬유주골의 수(Tb.N) 및 섬유주골의 정적 매개변수 골부피율(BV/TV)이 모두 유의하게 감소하였고(p <0.05), 섬유주골의 분리(Tb.Sp)가 증가하였음을 나타낸다(p <0.05); 쥐의 대퇴골 골단(trabecular epiphysis)의 섬유주 뼈가 풍부한 영역에서 섬유주 뼈의 뼈 구조가 탈골다공증 후 현저히 파괴되었음을 ?...

토론

Lingnan Fire Needle 요법은 깊은 역사적 배경을 가지고 있습니다. 불 바늘과 바늘 방법에 대한 기록은 Huangdi Neijing으로 거슬러 올라갈 수 있습니다. 현대의 침술사 Situ Bell과 Zhang Jiawei는 Lingnan의 기후와 사람들의 신체적 특성을 결합하여 Lingnan Fire-Needle 요법을 만들었습니다3. Lin Guohua는 Lingnan Fire-Needle 요법을 온난화, 준설, 토닝, 청소 및 제거로 요약했으며 온?...

공개

저자는 공개할 것이 없다고 선언합니다.

감사의 말

이 연구는 중국 국립자연과학재단(National Natural Science Foundation of China, NSFC) Nos. 82374564(YJD에) 및 Nos. 82074566(YJD에)와 중국 우한에 있는 세계침술뜸학회연맹(World Federation of Acupuncture-Moxibustion Societies)의 한의학침술-뜸을 위한 Sun Guojie Inheritance Base(세계침술뜸학회연맹[2019] No. 26)의 자금으로 지원되었으며, YJD와 중국 전통의학관리국의 국가 유명 TCM 상속 스튜디오 건설 프로젝트, 중국(중국 전통 의학국[2022], No. 5)에서 YJD.

자료

NameCompanyCatalog NumberComments
75% AlcoholShandong Lircon medicaltechnology co., ltdDisinfection
95% AlcoholShandong Lircon medicaltechnology co., ltdBurn needles
Adult female Sprague-Dawley (SD) ratsLiaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.SCXK 2020-0001Modeling of osteoporosis
Deluxe thermostat heat matZhenhua InstrumentsFor maintaining the body temperature of rats.
Diclofenac sodium injectionShandong Province Jianmu Bio-pharmaceutical Co.150182913Antipyretic and analgesic
Elevated fixation rackTaizhou Shi Ai Scientific and Educational Instruments and Equipment Co.Fix rats
Fire needlesBeijing Luoya Shanchuan Medical Equipment Co., Ltd.20190240A tool of needling
Hemostatic forcepsQingdao Schultz Biotechnology Co.Fix rats
LiguterShanghai Machi Trading Co.H5Ignite alcohol
Lodophor disinfecting solutionQingdao Hai's Hainuo Inovation Disinfection Technology Co., Ltd.2016-0604Disinfection
Medical cotton ballJiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.20172142357Disinfection
pentobarbital sodiumBeijing Jiehui Biotechnology Co.P3761anesthesia
Pet electric clipperFenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance FactoryShave the hair of rats
Self-made rat coatFix rats
TweezersQingdao Schultz Biotechnology Co.Pinch cotton balls

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