생쥐의 진통 효과를 연구하기 위해 수정된 염증성 통증 모델

요약

여기에서는 진통 효과를 평가하기 위해 양쪽 뒷발 카라기난 주사를 사용한 수정된 염증성 통증 모델을 제시합니다.

초록

핫플레이트 검사는 생쥐의 염증성 통증에 대한 진통 효과를 평가하는 데 널리 사용됩니다. 일반적으로 사용되는 염증성 통증 모델은 한쪽 뒷발에 카라기난을 발바닥 내 주사하여 유도했습니다. 그러나 우리 실험실의 연구 결과에 따르면 카라기난을 단일 뒷발로 주사한 쥐는 핫플레이트 테스트 중에 열 통각을 피하기 위해 발을 들어 올렸습니다. 이러한 반응으로 인해 이전 주입 방법은 열 통증 임계값을 정확하게 반영할 수 없습니다. 따라서 이 문제를 방지하기 위한 새로운 방법을 조사했습니다. 본 연구에서는 염증성 통증 모델을 확립하기 위해 양쪽 뒷발에 카라기난을 주사하여 이전 방법을 수정했습니다. 그 결과, 카라기난을 사용한 양쪽 뒷발 주사가 민감하고 핫플레이트 검사를 사용할 때 단일 뒷발 주사보다 염증성 통증을 유발하는 더 나은 방법임을 보여주었습니다. 이러한 결과를 바탕으로 우리는 카라기난을 양쪽 뒷발 또는 단일 뒷발 주사한 쥐를 셀레콕시브(30mg/kg)로 위내 치료하는 추가 실험을 설계했습니다. 핫플레이트 테스트 결과, 셀레콕시브는 카라기난을 양쪽 뒷발 주사로 마우스에서 열 통증 역치를 증가시켰지만, 카라기난을 단일 뒷발 주사한 마우스에서는 증가하지 않은 것으로 나타났습니다. 요약하면, 우리는 진통 효과를 평가하기 위해 염증성 통증 모델을 유도하는 우수한 방법을 개발했습니다.

서문

통증은 전 세계적으로 공중 보건 문제입니다. 유해한 열적, 기계적 또는 화학적 자극에 의해 유발됩니다. 윤리적 우려 때문에 인간을 대상으로 통증 연구를 수행하는 것은 어렵습니다. 따라서 동물의 통증 모델을 사용하는 것은 통증 메커니즘을 이해하고 치료법을 연구하는 데 중요한 접근 방식입니다¹. 핫플레이트 검사는 열통각(thermal nociception)과 통각과민(hyperalgesia)의 평가에 널리 사용되어 왔다². 현재 열판 검사에 사용되는 염증성 통증 모델은 한쪽 뒷발에 카라기난을 발바닥 내 주사하여 유도합니다. 예를 들어, 로티고틴이 적재된 미세구의 항통각 효과를 조사하기 위해 단일 뒷발 주사로 염증성 통증의 동물 모델을 준비했습니다³. 생쥐의 열 통각에 대한 catechol-o-methyl-transferase 억제제의 효과를 평가하기 위해 카라기난을 오른쪽 뒷발⁴의 발바닥 부위에 투여했습니다. Posidonia oceanica (L.) Delile 추출물의 진통 역할을 조사하기 위해, 오른쪽 뒷발⁵

프로토콜

실험 프로토콜은 Yantai University의 Institutional Animal Care and Use Committee(No. YTDX20220425). 이 절차는 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 실험동물 사용에 대한 가이드라인(Guidelines for the Use of Laboratory Animals)을 따랐습니다.

1. 동물

1. 실험을 위해 20-25g 무게의 ICR 암컷 마우스를 사용하십시오.
2. 실험을 시작하기 전에 동물이 3일 동안 실험실 환경에 적응하도록 합니다.
3. 실험실을 12시간의 명암 주기로 유지하고 쥐가 물과 차우에 자유롭게 접근할 수 있도록 합니다.

2. 카라기난 용액의 제조

1. 카라기난 0.1g의 무게를 잰다. 멸균된 생리식염수 10mL를 튜브에 넣습니다.
2. 튜브에 카라기난 0.1g을 넣고 튜브를 30초 동안 소용돌이칩니다.
3. 1% 멸균된 카라기난 용액을 수집합니다.
4. 실험 전에 카....

토론

통증은 조직 손상이나 부상으로 인해 유발되는 보호 반응입니다. 그러나 삶의 질에도 부정적인 영향을 미친다¹⁰. 따라서 효과적인 진통제의 개발과 통증 메커니즘의 탐구는 여전히 활발한 연구 분야로 남아 있습니다. 통증을 평가하는 방법은 진통제 개발에 중요한 역할을 합니다. 카라기난의 단일 뒷발 주입은 열판 테스트를 위한 고전적인 방법입니다. .......

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
AL204 electronic balance	Yuheng Battery Co., Ltd	YH-400A
Carboxymethylcellulose	Tianjin Chemical Co., Ltd	20210326
Carrageenan	Sigma, MO, USA	29H0715
Celecoxib	Pfizer Inc.	8142838
Hot plate	UGO Ltd. Co., Italy	PB-200
ICR female mice	Jinan Pengyue  Co., Ltd.	SCXK20220007
Normal saline	Kelun Pharmaceutical Co., Ltd	H51021157