저자는 그녀의 기술 지원 및 수행 조직학에 대한 크리스티안 Pahrmann 감사합니다.

<html> 8~12주의 나이에 20g의 최소 무게 Balb / C 마우스는 찰스 리버 (Sandhofer 웨그 7 D - 97633 Sulzfeld)에서 구입할 수 있습니다. 마우스는 일반 조건, 공급 표준 마우스 알약와 물 광고 libitum 아래에 위치해 있습니다. 유도 챔버를 사용하여 (2 %) isoflurane와 마우스를 마취. <ol><li> 목 지역 ribcage의 왼쪽을 면도하고 80 % 에탄올을 사용하는 소독. </li><li> 의 뒷면에있는 마우스를 놓고 마취를 유지하기 위해 코와 입을 통해 안면을 넣으십시오. </li><li> 마우스가 충분 anesthesized되었는지 확인하는 꼬리와 뒷다리를 곤란하게 반사를 확인합니다. </li><li> 미세한보기에서 호흡 관을 덮고있는 피부, 근육과 조직을 분리 정중선 자궁 절개를 수행합니다. </li><li> 기관은 endotracheal 튜브 (그림 1)을 삽입하는 성문 밑에 두 카트리지 고리 사이의 조직에 작은 구멍을 뚫고 노출하는 것입니다. 마이크로 외과 forecepts를 사용하여 기관의 두개골 부분을 잡고 endotracheal 튜브를 삽입합니다. 양쪽 폐에서 통풍이 잘되었는지 확인하는 흉부 움직임을 확인합니다. </li><li> 호흡 속도 (RR)은 17~18센티미터 H 2 O.의 inspiratory 압력으로 약 110 분당해야합니다 그 왼쪽에 직면하고, 그 오른쪽에 누워, 신중하게 마우스를 켭니다. 3 차 및 4 번째 갈비뼈 사이 leftsided thoracotomy를 수행하고, 출혈을 방지하기 위해 cauter을 사용하여 조심스럽게 조직 및 근육을 절개하다. </li><li> 조심스럽게 흉부를 열고 흉부가 열릴되면, 어떤 날카로운 물체로 폐을 건드리지 않고, 마음을 찾으십시오. 이제 마음을 덮고있는 pericardial 색의 일부를 제거합니다. </li><li> 그 소년은 폐동맥 및 좌측 외이 사이에 위치하고 있습니다. 하나의 봉합사 (그림 2)와 근위 젊은이 ligate에 8-0 Prolene 봉합사를 (Ethicon, Norderstedt, 독일)를 사용합니다. </li><li> 4 일 및 5 일 리브 사이의 가슴 튜브 (28G, 돈으로 좌우되는 카테터), 놓습니다. </li><li> 피부를 닫습니다 갈비뼈 4-0 Prolene 실행 봉합 (Ethicon, Norderstedt, 독일) 적응 6-0 Prolene 실행 봉합 (Ethicon, Norderstedt, 독일)를 사용하여, 레이어에서 흉부 절개를 닫습니다. </li><li> 신중하게 2ml 주사기 (그림 3)의 도움으로 흉부 드레인. 의 뒷면에있는 마우스를 놓습니다. 이제 endotracheal 튜브를 꺼내 7-0 Prolene의 봉합을 (Ethicon, Norderstedt, 독일)를 사용하여 하나의 스티치와 함께 tracheal 카트리지 반지를 적응. </li><li> 마우스의 얼굴 마스크를 놓고 봉합 (Ethicon, Norderstedt, 독일)을 실행하고 4-0 Prolene을 사용하여 피부를 닫습니다. </li></ol> 확인 내사 - 결합의 성공을 확인하는 다른 가능성이 있습니다. 트로포닌 검사는 동물을 안락사시키려는 필요없이 150 밖에 내 혈액을 사용하여 수술 후 6 때까지 18 시간 수행할 수 있습니다. 혈액은 맞춤 트로포닌 검사 키트 (파악 T 감성적, 로체, 만하임) (그림 4)에 적용됩니다. 트로포닌은 근육 세포의 굴지의 필라멘트에서 규정하는 단백질이며, 근육의 세 가지 유형의 다른 isotypes있다. isotypes cTnI와 cTnT는 심장에서 발견되고 조직 부상에 출시하고 있습니다. 트로포닌 T (cTnT)에 대한 표준 시험은 두 마음이 특정 단클론 항체 하나의 함정 혈액 샘플에서 트로포닌 기반으로, 두 번째는 마커입니다. infarcted 지역은 삼일 (그림 5) 이후 macroscopically 확인할 수 있습니다. TTC (2,3,5 - Triphenyltetrazolium 염화) 얼룩 대책 조직 생존이 경색 크기를 평가하는 데 사용됩니다. 에번스 청색 색소 (1.5 %, 1.0mL)에 인산 버퍼 호수 (PBS)가 심근 허혈성 영역을 측정하는 왼쪽 심실 캐비티에 주입합니다. 마우스는 euthanized되고 마음이 조각에 수확하고 sectioned입니다. 조직의 조각은 20 분에 대해 37 ° C에서 1퍼센트 TTC PBS 용액, pH를 7.4에서 incubated입니다. 조직은 2-8에서 하룻밤 PBS 버퍼 포르말린 10 % 해결된 ° C. TTC는 염색 에반스 블루 부정적인 영역 (그림 6) 전 (前) 생체내을 관리합니다. 조직학의 경우 마우스 euthanized 수 있으며 마음이 더 처리를위한 내장되어야한다. 파라핀 섹션을 수행 후, 슬라이드는 H &amp; E (hematoxylin 및 eosin) 물들일 또는 fibrotic 조직 (그림 7)를 시각화하는 trichrome 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/1438/1438fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1 : Tracheal 튜브. 1A : 노출 기관, 복부 자궁 절개 후. 1B : 기관은 후두에 꼬리 두 연골의 고리를 열립니다. 1C : Tracheal 튜브가 기관에 삽입됩니다. <img src="/files/ftp_upload/1438/1438fig2.jpg" alt="그림 2" /> 그림 2 : 심장은 왼쪽 단면 thoracotomy를 통해 노출, 그 소년이 출혈도 잡았입니다. t &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/1438/1438fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3 : 흉부가 폐쇄되면 늑막 드레인이 수행됩니다. 마우스가 마취하에 아직도있다. <img src="/files/ftp_upload/1438/1438fig4.jpg" alt="그림 4" /> 그림 4 : 트로포닌 검사가 긍정적인 경우 두 라인이 몇 분 후에 나타납니다. <img src="/files/ftp_upload/1438/1438fig5.jpg" alt="그림 5" /> 그림 5 : explanted 마음을 표시합니다. 5A : 어두운 약간 흰 색상과 허혈성 면적 마음의 매크로 볼 수 있습니다. 5B : infarcted 마음의 단면, 허혈성 지역은 오른쪽 상단 모서리에 표시됩니다.

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	<li>Atkins, B. Z., Hueman, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+cardiomyoplasty+improves+diastolic+properties+of+injured+Heart.">Cellular cardiomyoplasty improves diastolic properties of injured Heart.</a> J Surg Res. 85 (2), 234-242 (1999).</li><li>Jaquet, K., KT, K. r. a. u. s. e. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+myocardial+scar+size+after+implantation+of+mesenchymal+stem+cells+in+rats:+what+is+the+mechanism.">Reduction of myocardial scar size after implantation of mesenchymal stem cells in rats: what is the mechanism.</a> Stem Cells Dev. 14 (3), 299-309 (2005).</li><li>Joung, B., Kim, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+marrow+mononuclear+stem+cells+transplanted+in+rat+infarct+myocardium+improved+the+electrical+conduction+without+evidence+of+proarrhythmic+effects.">Bone marrow mononuclear stem cells transplanted in rat infarct myocardium improved the electrical conduction without evidence of proarrhythmic effects.</a> Yonsei Med J. 48 (5), 754-764 (2007).</li></ol>

기금 현재의 연구는 대학 병원 함부르크 (MK, 여자 Habilitation 그랜트), DFG (SS, SCHR992/3-1), ISHLT (TD, 연구 대상 2009 년)에 의해 지원되었다. 성명서 모든 동물은 실험실 동물 관리의 원칙을 준수 인간의 치료를받은, 동물 실험에 의해 출판 연구소 동물의 관리 및 사용을위한 의료 연구 및 설명서에 대한 국립 협회가 정한 지침과 규정에 따라 수행되었습니다 보건 국립 연구소 (보건 간행물 85-23 국립 연구소, 1985 개정). 모든 동물은 찰스 리버 연구소 (Sulzfeld, 독일)에서 얻은되었고 대학 병원 함부르크 Eppendorf의 동물 보호 시설에서 유지되었다. 동물 표준 차우와 물 광고 libitum을 받았습니다.

요약이 비디오는 소년 - 결합 모델을 단계별로 단계를 시각화하고 쉽게 가능 수술 절차로 생쥐에서 내사 - ligations를 식별합니다.

lad-ligation: a murine model of myocardial infarction

경색 및 심근 국소 빈혈의 연구 모델은 심근 국소 빈혈의 급성 및 만성 pathobiological 및 pathophysiological 프로세스를 조사하고 향후 치료를 개발하고 최적화하는 데 필수적입니다. 심근 국소 빈혈을 만드는 두 가지 방법은 실험실 설치류에서 수행됩니다. 첫 번째 방법은 cryo - 펜은 심장 (1-3)의 표면에 적용 cryo 경색, 빠른 있지만 부정 확한 기술을 만드는 것입니다. 이 방법을 사용 과학자는 cryo - 흉터 또한 광대한 심근 손상은 심근 경색과 관련되지 않은 pathophysiological 부작용을 보여줍 만들어집니다, 국소 빈혈로 연결되는 보장할 수 없습니다. 두 번째 방법은 왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥 (내사)의 영구적인 결합입니다. 여기 내사 거의 즉시 볼 수 있습니다 국소 빈혈을 형성 하나의 스티치와 함께 출혈도 잡았입니다. 주변의 심근 조직이 거의 영향을받지 않는 상태에서 젊은이 폐쇄하여 더 이상 혈액의 흐름이 그 지역에서 허용되지 않습니다. 이 수술은 경색 심근 국소 빈혈 관련에서 발생 pathobiological 및 pathophysiological 측면을 imitates. 이 동영상에서 소개하는 방법은 젊은이 ligating하여 마우스 경색 모델의 수술을 보여줍니다. 이 모델은 심장 경색에 pathobiological 및 pathophysiological뿐만 아니라 immunobiological 연구 편리합니다. 표시 기술은 높은 정확도를 제공하며, histological 부분과 잘 연결합니다.

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LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction

이 동영상은 심근 국소 빈혈의 pathobiological 및 pathophysiological 프로세스를 연구하기위한 빠르고 안정적​​인 모델을 사용하는 방법을 보여줍니다.

내사 - 결합 : 심근 경색의 Murine 모델

Research models of infarction and myocardial ischemia are essential to investigate the acute and chronic pathobiological and pathophysiological processes ...

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44.3K 조회수.  University Heart Center Hamburg. 이 동영상은 심근 국소 빈혈의 pathobiological 및 pathophysiological 프로세스를 연구하기위한 빠르고 안정적​​인 모델을 사용하는 방법을 보여줍니다.