이 연구는 미세 조작을 통해 좌측 전방 하행 관상동맥의 정밀 결찰을 통해 Miro에서 심근 기능 모델을 생성하는 맞춤형 방법을 설명합니다. 이 프로토콜은 시술 시간을 줄이고, 제어 가능한 경색 크기를 보장하며, 마우스 생존율을 향상시킵니다. 수술 과정 내내 섭씨 37도로 예열된 가열 패드가 있는 직사각형 OT를 사용하십시오.
시술 전에 자외선과 70 % 알코올로 보드를 소독하십시오. 눈이 과열되지 않도록 머리 아래에 거즈를 대고 누운 자세로 OT에 마우스를 놓는 것으로 시작합니다. 눈이 건조해지는 것을 방지하기 위해 안과 연고를 바르십시오.
흉부에 털 제거 크림을 바르고 멸균 면봉으로 1분 동안 골고루 마사지합니다. 여분의 털을 거즈로 닦으십시오. 포비돈 요오드와 70% 알코올을 사용하여 해당 부위를 청소하고 흉부를 거즈로 덮습니다.
위쪽 앞니 아래에 4-O 봉합사를 사용하고 앵커 포인트에 고정하여 입을 약간 벌리고 캐뉼레이션을 용이하게 합니다. 꼬리를 당겨 몸체를 똑바로 유지하고 테이프를 사용하여 OT에 고정합니다. 네 개의 팔다리를 테이프로 고정하고 앵커 포인트에 조입니다.
호흡 장애를 방지하기 위해 앞다리를 과도하게 뻗지 마십시오. 집게를 사용하여 턱을 열고 혀를 들어 올립니다. 그런 다음 조명기를 사용하여 목구멍과 성문을 시각화합니다.
뭉툭하게 잘린 바늘이 있는 22게이지 캐뉼라를 입을 통해 목구멍에서 약 1cm 떨어진 기관으로 부드럽게 삽입합니다. 한 손으로 혀를 잡고 뭉툭한 집게로 혀를 약간 위로 움직입니다. 동시에 다른 손을 사용하여 튜브를 기관에 부드럽게 삽입합니다.
튜브를 식도에 삽입하지 않도록 주의하십시오. 바늘을 조심스럽게 제거하십시오. 인공호흡기에 연결하기 전에 튜브를 물에 넣어 기포가 형성되도록 삽관을 확인하십시오.
기관내관을 분당 120회로 설정된 인공호흡기에 연결하고 일회 호흡량을 250마이크로리터로 조정합니다. 양측 대칭 흉부 확장을 확인하여 삽관을 확인합니다. 그런 다음 테이프로 OT 연결을 고정하여 떨어지지 않도록 합니다.
발에 ECG 전극을 놓고 ECG 레코더에 연결합니다. 시술 전반에 걸쳐 심장 전기 생리학을 모니터링합니다. 흉부의 거즈를 제거합니다.
70% 알코올로 세 번의 스크럽 주기를 사용하여 절개 부위를 소독합니다. 수술 부위의 오염을 줄이려면 수술 부위 위에 구멍이 있는 멸균 수술용 드레이프로 마우스를 덮습니다. 메스로 비스듬한 피부를 절개한 후 피하 조직을 둔하게 절개하여 갈비뼈를 노출시킵니다.
혈관, 갈비뼈, 폐를 다치지 않도록 주의하십시오. 출혈을 멈추기 위해 멸균 면 어플리케이터를 사용하십시오. 세 번째 늑간 공간을 확인하고 약 6-8mm를 절개합니다.
그런 다음 늑간 공간에서 조직을 둔하게 절개하여 흉강을 엽니다. 내부 흉부 동맥을 다치지 않도록 주의하십시오. 집게를 사용하여 늑간 공간을 넓힙니다.
사전 멸균된 수제 견인기를 흉곽에 삽입하고 뒤로 당겨 절개 부위를 약 6mm 너비로 벌립니다. 고무 밴드로 견인기를 OT에 부착합니다. 심장이 완전히 노출되도록 주변 조직을 조심스럽게 제거합니다.
심장을 다치게 하지 않고 구부러진 집게로 심낭을 부드럽게 잡아당깁니다. 해부 현미경을 사용하여 LAD 시각화를 위해 초점이 맞춰진 적절한 조명을 비춥니다. 선택한 결찰 위치 아래의 부위를 부드럽게 눌러 LAD를 일시적으로 확대한 다음 LAD를 다시 확인합니다.
해부 현미경에서 테이퍼 바늘을 사용하여 8-0을 통과시킵니다. LAD 아래의 실크 합자. 바늘이 좌심실에 들어갈 만큼 깊지 않고 LAD가 손상되지 않도록 너무 얕지 않은지 확인하십시오. 느슨한 이중 매듭으로 합자를 묶습니다.
2-3mm PE-10 튜브를 동맥과 평행한 루프에 넣습니다. 합자 루프가 동맥과 튜브 주위에 올 때까지 부드럽게 조입니다. 그런 다음 슬립 매듭으로 루프를 고정합니다.
과도한 조임 압력으로 심근 벽이 손상되지 않도록 주의하십시오. 결찰 후 좌심실 전벽의 창백한 색은 LAD의 혈류 중단을 확인합니다. 영구 결찰이 필요한 경우 텍스트 원고에 설명된 대로 진행하십시오.
절개부에서 견인기를 제거합니다. 그런 다음 불독 클램프로 상처를 일시적으로 봉합합니다. 마우스가 인공호흡기에 계속 연결되어 있는지 확인합니다.
허혈 기간이 끝나면 불독 클램프를 제거하고 견인기를 삽입하여 절개 부위를 열고 심장과 결찰 부위를 노출시킵니다. 슬립 매듭을 풀고 PE-10 튜브를 제거합니다. 옅은 색이 분홍색-빨간색으로 변하면 혈류가 회복되었음을 확인할 수 있습니다.
동시에 재관류를 감지하려면 ST 상승의 잠재적 용해에 대한 ECG를 관찰하십시오. 8-0을 떠나 후속 Evans blue 및 TTC 염색을 수행하는 경우 in situ 합자. 그렇지 않으면 이 단계에서 봉합사를 제거하십시오.
견인기를 제거하고 4-O 실크 봉합사로 세 번째와 네 번째 갈비뼈를 봉합하여 절개 부위를 봉합합니다. 폐를 다치지 않도록 주의하십시오. 봉합사 매듭을 묶으면서 가슴을 부드럽게 눌러 흉강에 갇힐 수 있는 공기를 밀어냅니다.
연속 4-O 실크 봉합사로 근육층을 닫습니다. 실험 과정의 표준 이미지는 기관 내 삽관, 피부 절개, 개흉술, LAD 식별 및 결찰에서 재관류에 이르기까지 획득되었습니다. 대표적인 ECG 영상은 결찰 후 상당한 ST 상승과 함께 심근 허혈 및 재관류를 확인했습니다.
그리고 슬립 매듭이 풀린 후 ST 승강의 용해. 개흉술을 받기 전에 기도를 열어두는 것이 매우 중요하며, 가장 중요한 것은 LAD가 단단히 결찰되어 손상되지 않도록 하는 것입니다. 이 절차 후에는 심장 기능을 평가하기 위한 심장 초음파 검사와 심근 손상을 평가하기 위한 TTC가 뒤따릅니다.
