시작하려면 PBS가 들어있는 1.5 밀리리터 튜브에서 표면 멸균 된 모기를 얻으십시오. 청소된 모기를 현미경 슬라이드에 놓인 멸균 1X PBS 한 방울에 옮깁니다. 핀셋을 사용하여 모기의 흉부를 잡고 움직이지 않도록 합니다.
그런 다음 머리 바로 아래의 목에 바늘을 놓고 모기의 머리를 부드럽게 잡아당겨 흉부에서 분리합니다. 바늘을 사용하여 타액관 높이에서 침샘을 자릅니다. 바늘로 땀샘을 채취하여 PBS의 새 방울에 넣어 헹굽니다.
다음으로, 바늘을 사용하여 침샘을 회수합니다. 모기를 등에 대고 난소를 해부하기 시작합니다. 집게를 사용하여 모기의 흉부를 잡고 움직임을 방지하고 바늘로 바닥에서 시작하여 세 번째 복부 부분을 뚫습니다.
세 번째 복부 부분을 뚫으면서 복부를 아래로 당겨 열고 내부 장기를 드러냅니다. 장기 방출을 용이하게 하기 위해 모기 외골격의 나머지 부분을 제거합니다. 멸균된 겸자로 양쪽 난소를 회수하고 현미경 슬라이드의 새로운 멸균 PBS 방울에 넣어 헹굽니다.
헹궈낸 난소를 100마이크로리터의 보존 완충액이 들어 있는 1.5밀리리터 튜브에 넣습니다. 다음으로, 멸균 바늘을 사용하여 앞창자와 뒷창자에서 중장을 분리합니다. 중장에서 Malpighian 세뇨관을 제거하고 중장을 멸균 PBS의 새 방울에 넣어 헹구고 오염을 방지합니다.
그런 다음 중장을 멸균 PBS의 다른 한 방울로 옮깁니다. 겸자를 사용하여 중장을 열어 박테리아를 방출합니다. 모든 PBS 함유 박테리아와 중장 조직을 100마이크로리터의 보존 완충액이 들어 있는 새로운 멸균된 1.5밀리리터 튜브에 피펫팅합니다.
5 마이크로리터의 PBS를 이전에 midgut가 배치된 현미경 슬라이드의 동일한 영역에 추가합니다. PBS를 동일한 1.5밀리리터 튜브에 다시 피펫팅하여 슬라이드에 붙었을 수 있는 박테리아를 회수합니다. 마지막으로 멸균 겸자를 사용하여 모기 사체를 잡고 100마이크로리터의 보존 완충액이 들어 있는 멸균된 1.5밀리리터 튜브에 보관합니다.
