지원 :이 연구는 건강의 국립 연구소 (DK064862, NS058525 및 GGF에 AA019357)에 의해 지원되었다.

1. 단기 LMA 세트 업 및 절차 <ol><li> 단기 LMA 케이지 설정 <ol><li> 단일 보관 마우스의 홈 케이지에서 단기 LMA를 테스트합니다. VTS에 의존하는 이미지 분석을 용이하게하기 위해 마우스 색상 (흰색 쥐와 검은 쥐에 대한 밝은 색의 침구 즉, 어두운 색의 침구)와 높은 콘트라스트의 침구를 사용합니다. </li><li> 단기 LMA 테스트 기간 동안, 11 X ¼ 직경 구멍에 적절한 통풍을 지원하기로 플렉시 유리에 일반 ¼로 새장을 포함한다. </li></ol></li><li> 단기 LMA 테스트 실 <ol><li> 그들이 적어도 24 시간 전 8 풍토에 순화되어있는 깨끗한 환경에서 마우스를 테스트합니다. </li><li> 테스트 환경을 조명하기 위해, 빨간색 전구 (&lt;125 루멘)과 육추 클램프 등을 사용합니다. 비디오 그래피에 앞서, 플렉시 유리 케이지 정상에서 눈부심이나 반사를 제거하는 빛의 각도와 위치를 조정합니다. </li><li> 객실의 소음을 제거하거나 방지70dB 이상. 간헐적 인 소음 마우스 테스트 중에 피할 수없는 경우 화이트 노이즈 생성기를 사용합니다. </li><li> 케이지는 케이지 침구에 정육점 또는 유사한 색상의 실험실 벤치 종이로 시험 방에 배치되는에 따라 시험 표면을 커버, 경우에 케이지 바닥 비디오 촬영 중 노출됩니다. </li></ol></li><li> 단기 LMA 비디오 촬영 <ol><li> 센터와 테스트 실에서 녹음 영역 위 이상의 메모리 120 GB의 천장에 장착 된 야간 시계를 지원하는 비디오 카메라를 배치합니다. 비디오 카메라 뷰 프레임 (Noldus 정보 기술 (리스 VA)에 의해 예를 들어, Ethovision XT 7을 동시에 실시간으로 8 쥐를 추적 할 수 있습니다) 내에 너무 많은 새장을 배치하여 사용 VTS의 해상도 능력을 초과하지 마십시오. </li></ol></li><li> 단기 LMA 테스트 절차 <ol><li> 라이트 사이클의 어두운 / 활성 단계에서 단기 LMA를 테스트합니다. 빛의주기를 기준으로 시간을 일 있는지 확인모든 그룹에 걸쳐 동일한 전자, LMA는 어두운주기 1 초 이상 기간 동안 더 많은 활동 어두 컴컴한 패턴을 다음과 같이. 최소화 LMA의 시간적 차이의 잠재적 영향을 확인하기 위해 기록 된 생쥐의 각 그룹 모두 실험 및 제어 과목을 포함합니다. </li><li> 개인적으로 집과 순응 마우스 적어도 24 LMA 테스트 8 시작하기 전에 시간. </li><li> 직접 카메라에서 케이지 분할기와 케이지 (개인 마우스 포함) 놓습니다. 이 마우스의 뷰 (마우스 굴 / 중첩 재료 자체를 포함하는 경우 등) 방해 및 VTS의 정확성을 방해 할 수 있으므로, 케이지에서 모든 중첩 / 농축 물질을 제거합니다. 기록 된 각 케이지 명확한 플렉시 유리 뚜껑을 놓습니다. </li><li> 동시에 여러 개의 케이지있다 videoing 때, 해상도가 선택한 VTS와 호환되는지 확인하십시오. VTS 분석을 쉽게하기 위해 (즉, 오른쪽 상단) 각 분할 내에 동일 케이지의 위치를. </li><li> 녹음을 시작합니다. 추가 비디오가 아닌 문서의 독립적 인 비디오의 적절한 식별을 보장하기 위해 모든 관련 실험 정보를 식별 슬레이트 각 비디오를 시작합니다. LMA 테스트 (5-10 분)의 기간을 추적하기 위해 타이머, 스톱워치를 사용합니다. 타이밍 정보가 손실 된 경우, 영상 기록에서 복구 할 수 있습니다. </li><li> 단기 LMA 방법을 사용하여 반복 측정의 경우, 마우스가 아닌 측정 간격 동안 음식과 물에 접근 할 수 있습니다. </li><li> 테스트하는 동안 생쥐의 눈에 띄지 않도록 외부의 시각적 인 역할을하는 어떤 실험자를 유지합니다. </li><li> 테스트가 완료되면 반환 / 둥지 / 농축 물질을 대체, 불안과 같은 행동 8의 개발 가능성을 줄일 수 있습니다. </li></ol></li><li> 단기 LMA 분석 <ol><li> 테스트 세션에서 사용 된 VTS와 호환 아카이브 미디어에 비디오 녹화를 저장합니다. Ethovision XT 7, 하드 드라이브 디스크 (HDD)를 사용. </li><li> 실시간으로 비디오를 분석, 관련 미디어 플레이어를 사용하여 VTS에서 동영상을 재생합니다. 그림 1에서 검출 변수는 : 2cm / 초 추적을 시작, 1.75 cm / 초 정지 추적. </li><li> 처음에, 추적을위한 관심 영역 (ROI)로 전체 케이지 바닥을 선택합니다. 이러한 thigmotaxis의 평가와 같은 고급 분석을 위해 여러 내부 케이지 ROI를 만듭니다. </li><li> 높은 처리량 연구에 대한 개별 모든 케이지 바닥 ROI를 동시에 비디오 내의 모든 새장을 분석합니다. </li><li> 총 거리 (cm) 이동 속도 (cm / 초)과 움직임의 지속 시간 (초) 이동 계산 VTS를 사용합니다. Ethovision XT 7, 저장, 추가 분석을 위해 마이크로 소프트 엑셀로 생성 된 데이터를 내보낼 수 있습니다. </li></ol></li></ol> 2. 장기 LMA의 테스트 설정 및 절차 <ol><li> 장기 LMA 테스트 케이지 건설 <ol><li> 짧은 끝 벽에 5.5 cm 직경 구멍을 잘라표준 마우스 케이지. 직류 전기를 통한 강철 메쉬 ¼로 구멍 덮개를 만들 수 있습니다. 음식에 마우스 접근을 허용하기 위하여 오프닝에서 여러 ½을 만드는 메쉬를 잘라. 날카로운 모서리를 제거하는 절단 메시를 닦다. </li><li> 직접 5.5 cm의 구멍을 커버하는 데 사용되는 메쉬에 연결된 외부 호퍼를 생성하기 위해 추가 메쉬를 사용합니다. 구멍을 커버하는 데 사용되는 메쉬 호퍼를 연결하고, 알루미늄 리벳을 사용하여 케이지 어셈블리를 연결합니다. </li><li> 표준 50 ML 원뿔 (코닝)와 노 드립 sipper 튜브의 삽입 (역 퓨어 시스템)를 허용하는 오버 뚫은 1 홀 고무 마개 (피셔)에서 물 한 병을 구축합니다. 벨크로 테이프와 케이지 (3M)에 물병을 확보하고 메쉬 커버 구멍을 통해 sipper 튜브를 삽입합니다. </li><li> 장기 LMA 테스트 기간 동안, 11 X ¼ 직경 구멍에 적절한 통풍을 지원하기로 플렉시 유리에 일반 ¼로 새장을 포함한다. </li></ol></li><li> 장기 LMA 테스트 실<ol><li> 설정 장기 LMA 테스트 실 단기 LMA와 동일합니다. 절차에 대해서는 1.2 절을 참조하십시오. </li></ol></li><li> 장기 LMA 비디오 촬영 <ol><li> 센터 직접 테스트 실에서 녹음 영역 위 PC에 연결된 천장에 장착 된 적외선 보안 스타일, 카메라를 배치합니다. 만 (예 : Ethovision XT 7 동시에 실시간으로 8 쥐를 추적 할 수 있습니다)를 사용 VTS의 기능 내의 개별 케이지 해상도 번 그 결과를 케이지의 수를 기록한다. </li></ol></li><li> 장기 LMA 테스트 절차 <ol><li> 라이트 사이클의 어두운 / 활성 단계 동안 장기 LMA를 테스트합니다. LMA는 어두운주기를 1 초 이상 기간 동안 더 많은 활동 어두 컴컴한 패턴을 다음과 같이 빛을주기에 상대적으로 시간이 모든 그룹에서 동일한 지 확인합니다. 기록 된 생쥐의 각 그룹 모두 실험 및 제어 과목 가능성을 최소화하기 위해 테스트LMA의 시간적 차이의 효과. </li><li> 개인적으로 집에 적어도 24 시간 동안 수정 된 새장에서 테스트 쥐를 적응. </li><li> 직접 카메라에서 케이지 분할기와 케이지 (개인 마우스 포함) 놓습니다. 마우스보기의 방해를 보장하기 위해 케이지에서 모든 중첩 / 농축 물질을 제거합니다. 둥지 재료로 굴을 마우스 마우스를 추적하는 VTS의 기능을 방해합니다. 기록 할 케이지의 각 명확한 플렉시 유리 뚜껑을 놓습니다. </li><li> 한 번에 여러 새장을 녹음 할 때, 해상도가 선택한 VTS와 호환되는지 확인합니다. 각 분할 내에서 동일 VTS 분석, 위치 새장을 쉽게하기 위해 (즉, 오른쪽 상단). </li><li> 장기 LMA 테스트는 일반적으로 실시간으로 분석하고, 영상 기록은 일반적으로 생성되지 않습니다. 영상 기록은 보조 카메라를 사용하거나 기본 카메라에 연결된 DVD 레코더를 통해 기록 할 수 있습니다. 개인의 상세한 기록을 보관해야마우스 및 그룹 정보를 제공합니다. </li><li> 실시간 분석을위한 VTS를 설정합니다. 전체 케이지 바닥 추적을위한 투자 수익 (ROI)을 포함한다. 기록되는 모든 케이지에 대한 ROI를 설정. 총 거리 (cm) 이동 속도 (cm / 초)과 움직임의 지속 시간 (초) 이동 계산 VTS를 사용합니다. 그림 2에서 검출 변수는 : 2cm / 초 추적을 시작, 1.75 cm / 초 정지 추적. </li><li> 마우스 장기 LMA를 녹음을 시작합니다. 분석 컴퓨터와 관련된 시계를 통해 장기 LMA 테스트의 기간을 모니터링합니다. </li><li> 테스트하는 동안 생쥐의 눈에 띄지 않도록 외부의 시각적 인 역할을하는 모든 실험자를 유지합니다. </li><li> 테스트가 완료되면 반환 / 둥지 / 농축 물질을 대체, 불안과 같은 행동 8의 개발 가능성을 줄일 수 있습니다. </li></ol></li><li> 장기 LMA 분석 <ol><li> 장기 LMA 분석 영상 기록의 생성없이 실시간으로 발생. Ethovision XT 7을 사용하는 경우, 저장 및 분석 용 Microsoft Excel로 데이터를 내보낼 수 있습니다. </li><li> 장기 LMA에 대한 영상 기록을 생성하려면, 보조 카메라를 사용합니다. 보조 카메라가 잠재적으로 긴 기록 (들)을 저장하기에 충분한 충분한 저장 용량을 가지고 있어야합니다. </li></ol></li></ol>

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	<li>Goulding, E. H., Schenk, A. K., Juneja, P., MacKay, A. W., Wade, J. M., Tecott, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+automated+system+elucidates+mouse+home+cage+behavioral+structure.">A robust automated system elucidates mouse home cage behavioral structure.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 20575-20582 (2008).</li><li>Kent, S., Bluth&#233;, R. M., Kelley, K. W., Dantzer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sickness+behavior+as+a+new+target+for+drug+development.">Sickness behavior as a new target for drug development.</a> Trends Pharmacol. Sci. 13, 24-28 (1992).</li><li>Dantzer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokine,+sickness+behavior,+and+depression.">Cytokine, sickness behavior, and depression.</a> Immunol. Allergy Clin. North Am. 29, 247-264 (2009).</li><li>Godbout, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exaggerated+neuroinflammation+and+sickness+behavior+in+aged+mice+following+activation+of+the+peripheral+innate+immune+system.">Exaggerated neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral innate immune system.</a> FASEB J. 19, 1329-1331 (2005).</li><li>York, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biobehavioral+and+neuroimmune+impact+of+low-dose+ionizing+radiation.">The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation.</a> Brain Behav. Immun. 26, 218-227 (2012).</li><li>York, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individually+ventilated+cages+cause+chronic+low-grade+hypoxia+impacting+mice+hematologically+and+behaviorally.">Individually ventilated cages cause chronic low-grade hypoxia impacting mice hematologically and behaviorally.</a> Brain Behav. Immun. 26, 951-958 (2012).</li><li>Jennings, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refining+rodent+husbandry:+the+mouse.+Report+of+the+Rodent+Refinement+Working+Party.">Refining rodent husbandry: the mouse. Report of the Rodent Refinement Working Party.</a> Lab. Anim. 32, 233-259 (1998).</li><li>York, J. M., Blevins, N. A., Baynard, T., Freund, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+testing+methods+in+psychoneuroimmunology.">Mouse testing methods in psychoneuroimmunology.</a> Methods in Molecular Biology. 934, 243-276 (2012).</li><li>Dantzer, R., O'Connor, J. C., Freund, G. G., Johnson, R. W., Kelley, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+inflammation+to+sickness+and+depression:+when+the+immune+system+subjugates+the+brain.">From inflammation to sickness and depression: when the immune system subjugates the brain.</a> Nat. Rev. Neurosci. 9, 46-56 (2008).</li><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotyping+of+rodents.">Behavioral phenotyping of rodents.</a> Comp. Med. 53, 140-146 (2003).</li><li>Karelina, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+isolation+alters+neuroinflammatory+response+to+stroke.">Social isolation alters neuroinflammatory response to stroke.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 5895-5900 (2009).</li></ol>

저자는 관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

마우스에서 질병의 증상은 혼수, 사회적, 환경 적 환경에 대한 관심의 상실, 권태감 및 식욕 부진 2-3 이용하실 수 있습니다. 마우스 및 기타 설치류에, LMA는 면역 활성화에 4-5 후 질병을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 또한, 장기 LMA는주기 동작이나 잠자기 / 깨우기 패턴의 장애에 치료에 의한 변화의 분석을 허용, 24 시간 (또는 그 이상) 동안 움직임을 추적 할 수있는 기능을 제?...

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="586">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21">Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="276">
			<td height="276">Video camera</td>
			<td>Sony</td>
			<td>HDR-XR500V</td>
			<td>Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.</td>
		</tr>
		<tr height="331">
			<td height="331">Opaque cage dividers</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.</td>
		</tr>
		<tr height="74">
			<td height="74">Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.</td>
		</tr>
		<tr height="37">
			<td height="37">Clear Plexiglas cage tops</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Custom fabricated based on cage dimensions.</td>
		</tr>
		<tr height="92">
			<td height="92">Automated video tracking software (EthoVision XT 7)</td>
			<td>Noldus Information Technology</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.</td>
		</tr>
		<tr height="55">
			<td height="55">PC</td>
			<td>Dell Inc.</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>See VTS software providers minimum PC .requirements</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83">White noise generator</td>
			<td>Dohm</td>
			<td>DS</td>
			<td>A variety of white noise generators are available, depending on need.</td>
		</tr>
		<tr height="146">
			<td height="146">Brooder clamp lights with red light bulbs</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62">Lab bench or butcher paper</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mouse short- and long-term locomotor activity analyzed by video tracking software

전위의 활동 (LMA)는 마우스 및 기타 설치류 행동의 간단하고 쉽게 수행 측정이다. 비디오 추적 소프트웨어 (VTS)의 개선은 수동 득점으로 선 횡단 방법에 비해 획기적으로 특이성과 감도를 향상 LMA 테스트를 결합 할 수있다. 또한, VTS는 높은 처리량 실험을 할 수 있습니다. 열기 필드 테스트 (OFT)에 사용되는 자동 비디오 추적 유사한 LMA 테스트 고유 동안한다는 점에서 쥐가 자신의 홈 케이지에 남아있는 것을 허용하고 빛을 어둠의 활성 단계 밝은 조명 anxiogenic 자극을 사용하지 않습니다 주기. 이상 운동 연구 (시간 - 일) 자주 사용하는 송신기 및 biotelemetry를 이식하는 동안 전통적으로, LMA는 시간 (분)의 짧은 기간 동안 사용되었다. 실시간 추적 옵션과 함께, 장기, 단기 LMA 테스트처럼, 지금은 비디오 그래피를 사용하여 수행 할 수 있습니다. 장기 LMA 테스트는 전문이 필요합니다하지만, 음식과 물 (어떤은 일반적으로 케이지 상단에 위치) 비디오 촬영을 방해하지 않도록 쉽게 케이지를 구축. 중요한 것은, 비디오 그래피와 VTS가 어렵거나 선 교차점 및 / 또는 biotelemetry로 측정으로 실행할 수 있습니다 같은 마우스 움직임의 경로와 매개 변수의 정량화 할 수 있습니다. 결론적으로, VTS에 연결된 LMA 테스트는 마우스 동작에 대한 자세한 설명과 오랜 기간 동안 운동을 검사 할 수있는 능력을 준다.

반복 측정 결과의 예를 들어, 단기 LMA 시험은 그림 1에 표시됩니다. 이 그림은 리포 다당류 (LPS) 투여 후, 마우스는 빠르게 주위 환경 동물 수용 (AEC) 6에 보관 쥐보다 ​​단기 전위의 활동을 복구 개별적으로 환기 동물 수용 (IVC)에 보관되어 있음을 보여줍니다. 전위의 활동의 초기 손실이 LPS 주입 군간에 유사하지만, 기초 LMA에 복구 IVC - 보관 쥐에서 더 빠르다는 운동의 속도 <...

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Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software

전위의 활동 (LMA)는 생쥐의 행동을 간단하고 쉽게 수행 측정이다. 비디오 추적 소프트웨어 (VTS) 및 LMA의 커플 링 LMA 분석 설명서, 라인 교차 방식에 비해 특히, 특이성 및 감도 개선 할 수 있습니다. 또한 VTS 마우스 LMA의 장기 추적을 할 수 있습니다.

마우스의 단기 및 장기 전위의 활동은 영상 추적 소프트웨어에 의해 분석

Locomotor  activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice  and other rodents. Improvements in video tracking software ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

20.0K 조회수.  University of Illinois at Urbana-Champaign. 전위의 활동 (LMA)는 생쥐의 행동을 간단하고 쉽게 수행 측정이다. 비디오 추적 소프트웨어 (VTS) 및 LMA의 커플 링 LMA 분석 설명서, 라인 교차 방식에 비해 특히, 특이성 및 감도 개선 할 수 있습니다. 또한 VTS 마우스 LMA의 장기 추적을 할 수 있습니다.