이 비디오에서는 실린더 및 개방형 필드 테스트를 사용하여 파킨슨 병의 MPTP 모델에서 모터 기능을 좁히는 방법을 소개합니다. 주요 장점은 마우스가 행동 테스트 전에 훈련될 필요가 없다는 것입니다. 또한 이 방법은 효율적이며 장비 비용이 낮습니다.
행동 시험에 새로운 개인환경 간섭의 효과를 과소 평가할 수 있습니다. 조용히 유지하고 안감의 변화를 피하는 것이 도움이 될 것입니다. 여기서, 행동 시험은 MPTP 또는 식염수 주사의 7일 처방의 최종 주입 후 24시간, 동물의 하위 집합에 L-DOPA의 위내 투여 후 40분 후에 실시된다.
동물이 수용되는 동일한 방에서 행동 검사가 수행되지 않으면 시험 전에 30~60분 동안 마우스를 새 방으로 적응시다. 먼저 투명 유리 실린더를 테이블 중앙에 놓는다. 실린더를 검은 판지로 3면에 둘러싸서 실린더에서 4~8cm 떨어진 곳에 배치하여 환경 조명의 효과를 줄입니다.
비디오 녹화를 위해 원통의 한쪽을 카메라를 향하여 둡니다. 실린더에서 40~60cm 떨어진 100만 화소 해상도의 카메라를 부착하여 전체 실린더가 시야에 포함되어 있는지 확인합니다. 한 번에 한 개의 마우스를 실린더에 넣고 한 번에 촬영을 시작합니다.
이 과정에서 마우스의 동작에 영향을 미치지 않도록 소음이나 조명 변경을 피하려고 합니다. 발 리프트는 마우스가 뒷다리 위에 뒤쪽으로 올라가어깨 수준 위로 앞다리를 올리고 착륙할 때 발생합니다. 3분 후에 촬영을 중단하고 마우스를 다시 홈 케이지에 넣습니다.
실린더를 물로 청소한 다음 내부 벽에 70%ethnol을 뿌려 소독하고 마우스 향을 제거합니다. 다음 마우스를 테스트하기 전에 실린더 건조를 닦으십시오. 테스트가 완료되면 일반 속도의 0.5배의 속도로 비디오를 재생하고 각 마우스의 벽에 대한 발 리프트 수를 계산합니다.
마우스가 착륙하지 않고 어깨 수준 보다 여러 번 연속하여 앞다리를 올리면 한 번만 계산해야 합니다. 실린더 테스트와 동일한 세션에서 열린 필드 테스트를 수행합니다. 마우스의 색상에 따라 대조적인 검은 색 또는 흰색 천으로 덮인 나무 판으로 투명한 열린 필드 반응 상자를 준비합니다.
1미터 높이의 필드 위에 카메라를 고정합니다. 카메라를 조정하여 열린 필드 반응 상자가 비디오 중앙에 있는지 확인합니다. 하나의 테스트 마우스를 상자에 넣고 마우스가 약 1 분 동안 환경에 익숙해지게하십시오.
컴퓨터에 연결된 카메라를 사용하여 5분 비디오를 녹화합니다. 마지막으로, 오픈 필드 반응 상자에 있는 대변을 정리하고, 상자에 70%에탄올을 뿌리고 닦아냅니다. 실린더 테스트에서, 식염수 처리 마우스에 비해 MPTP로 처리된 마우스에서 벽에 대한 후방의 수가 감소하는 것을 관찰하였다.
증가 된 후방은 식염수를 수신하는 MPTP 처리 마우스에 비해 테스트 당일 L-도파민 주어진 MTPT 처리 마우스에서 관찰되었다. 이 이미지는 MPTP로 처리되지 않은 대조군 마우스의 대표적인 운동 추적 및 정적 시간, 보행 시간 및 러닝 타임의 분포를 나타낸다. MTPT로 처리된 마우스는 더 낮은 이동 속도, 짧은 이동 거리, 더 긴 정적 시간 및 짧은 실행 시간을 보인 다음 식염수 처리 마우스를, MTPT에 의해 유도된 모터 적자를 입증하였다.
L-도파민을 받는 MPTP 처리 마우스는 더 높은 이동 속도, 더 긴 이동 거리, 짧은 정적 시간 및 단지 MPTP로 처리된 마우스 보다는 더 긴 실행 시간을 보여주었습니다, L-도파민은 MPTP 유도모터 적자를 완화한다는 것을 나타내는. 시험 중인 마우스를 변경할 때 영역을 완전히 맑게 하고 에탄올을 분사하여 이전 마우스의 향기의 효과를 제거한다. 이 절차에 따라 빔 보행 테스트, 극 테스트와 같은 다른 조치를 수행 할 수 있습니다.
이러한 방법을 통해 균형 용량 및 모터 능력과 관련된 데이터를 얻을 수 있습니다. MPTP는 마우스와 인간 모두에게 신경 독성이 있으므로 노출을 피하기 위해 엄격한 예방 조치를 취해야합니다. 마스크 나 호흡보호구와 같은 추가 PPE를 착용해야합니다.
