지원은 실험 방법의 개발 기간 동안 스콧 Treece, Katelyn Arter, 제레미 Ragsdell, 토니 LaMark 제임스, 에이미 피셔, 한나 블레어, 그리고 샤이엔 GERDES에 의해 제공되었다. TLC 스캔 농도계에 대한 지원을 위해, 우리는 메디나 후에 연구소 (아칸소 생명 과학 연구소 루이스 H. 노포 - Olazabal)에 감사의 말씀을 전합니다. 아칸소 생명 과학 연구소에서 아칸소 자산 이니셔티브 P3 센터 (EPS-0701890) : MALDI-TOF MS는이 프로젝트에 사용되는은 NSF EPSCoR 해당, RII를 통해 제공되었다. 기금은 미국의 수산 동물 서비스 / 아칸소 주 야생 동물 그랜트, 국립 동굴 학 사회, 인디애나 주립 대학에서 북미 박쥐 연구 및 보존을위한 센터에 의해 제공되었다.

주의 : 사전에 처리 수송, 박쥐를 저장하기위한 모든 필요한 주 및 연방 정부의 허가를 얻습니다. 승인은 기관의 동물 관리 및 사용위원회뿐 아니라 기관 바이오 안전성위원회의에서도를 얻을 수 있어야합니다. 라이브 배트 (또는 신경계 조직)이 처리되는 경우, 동물 처리기는 광견병 백신을 접종한다. 현재의 연구에 사용 된 박쥐는 표준 방법 (아칸소 주립 대학의 기관 바이오 안전성위원회의 승인 번호 135349-1) 28에 따라 2010 년 여름 동안 오 자크 세인트 프랜시스 국립 산림, AR에서 수집되었다. 1. 조직 처리 및 지질 추출 <ol><li> 이전과 다른 개인의 조직 모음 사이에 메탄올 모든 악기를 청소합니다. 125 ㎖의 삼각 플라스크에 가위와 장소, 피부에서 헤어 (약 1.0 g)을 낸다. 클로로포름으로 적신 6면 공 - 4로 피부를 문질러 날개 표면에서 샘플 피지: 메탄올 용매 (C : M; 3시 2분 V / V), 별도의 플라스크에 이들을 배치합니다. </li><li> C 10 ㎖로 조직을 추출 : M (2 : V / V)의 산화 (29)를 방지하기 위해 0.5 % 부틸 히드 록시 톨루엔 (BHT)를 포함. 만 HPLC 품질 용제를 사용합니다. </li><li> 2 시간 후, 각 플라스크에 약 0.5 g에게 무수 황산을 추가 간략하게 혼합하고, 여과지로 여과하여 용매를 수집합니다. </li><li> 반복 두 번 1.2 및 1.3 단계를 반복합니다. M. 일단 1:1 C 1:2 C와 M 순차적으로 풀 함께 여과 액. </li><li> N 2 기류하에 풀링 여액을 증발, 건조 중량을 결정하고, 3:2의 C 지질 잔기 용해 : 10 ㎎ / ㎖의 농도로 M (0.5 % BHT를 가진). -20 ° C에서 유리 병에 보관 샘플 그것은 시료 채취 후 1 개월 이내에 샘플을 분석하고 동결 해동 사이클을 최소화하기 위해 일반적으로 가장 좋습니다. </li></ol> 2. 분취 박층 크로마토 그래피에 의해 분리 지방질 <ol><li> 사전 솔벤트 세척 1.5 ml의 microce에 준비, M을 아세톤으로 세척하고, 공기 건조 : 3시 2분 C로 작성하여 ntrifuge 관. 이것은 나중에 질량 분석기 분석을 방해 할 수있는 가소제를 제거하기위한 것입니다. 먼지가없는 용기에 샘플 튜브를 저장하고 피부 오일의 오염을 방지하기 위해 전용 장갑이 튜브를 처리 할 수​​ 있습니다. </li><li> M. : 첫 번째 3시 2분 C로 미리 개발하여 TLC 판을 활성화 1 ㎝의 깊이로 TLC 챔버에 충분한 용매를 추가 한 다음 (가까운 유리 뚜껑) 챔버 플레이트를 배치하고 용매 플레이트의 상단에 완벽하게 실행할 수 있습니다. 이것은 약 45 분 소요됩니다. </li><li> 용매 증발 (약 15 분)까지 흄 후드에서 플레이트와 건조를 제거한 다음 120 ℃에서 적어도 10 분 동안 오븐에 배치 샘플이 적용될 때 방향을 유지하기 위해 판의 상단에 연필로 표시를합니다. 시료와 표준이 위치 할 기준선을 표시하기 위해, 1.5 cm 판의 아래쪽 가장자리에서 직선 연필 선을 배치합니다. </li><li> 를 절단하여 TLC 챔버를 준비두 개의 짧은 벽을 줄 수있을만큼 크고 하나의 긴 벽 필터 종이 조각. 챔버에 필터 종이 라이너를 놓습니다. 그것은 용매 챔버에 완전히 젖은 추가됩니다 때. </li><li> 디 에틸 에테르 : 초산 헥산입니다 용매 이동상, 100 ㎖의 준비 (H : E :를, 80:20:2 V / V / V). 약 1cm의 깊이를주기 위하여 상기 챔버에 용매를 붓는다. 챔버의 위쪽 가장자리를 따라 실리콘 그리스 씰을 사용하여 유리 뚜껑 커버. 실 사용하기 전에 하룻밤 평형을 허용합니다. </li><li> 다른 가장자리에 1.5 cm에 하나의 가장자리에서 약 1.5 cm에서 연속 행진으로 모세관 또는 피펫으로 제조 된 판에 수동으로 샘플을 적용합니다. 이보다 균일 한 행진에서 샘플을로드하기 때문에 자동 시료 도포하는 것이 바람직하다. 약 20 μL 스테롤의 혼합물, 유리 지방산, 태그 및 스테롤 에스테르 표준 탐지하는 TLC 판의 바깥 쪽 차선을 사용 (10 ㎎에 사용 / ㎖, 미리 만들어진 혼합물을 얻을 수있다). </li><li> 에로드 된 TLC 판을 놓습니다평형 뚜껑을 닫기 챔버, 플레이트를 개발 용매 때까지 위쪽 가장자리에 실행됩니다. 이것은 여기에 설명 된 이동상 약 45 분 소요됩니다. 챔버에서 접시를 제거하고 여분의 용매가 약 1 분 동안 흄 후드에있는 접시에서 증발 할 수 있습니다. </li><li> 95 % 에탄올에 0.05 % 로다 민 6G에 스프레이. 장파장 자외선 램프하에 지질 밴드를 시각화. 연필로 마크 샘플 및 표준에서 해결 형광 밴드 R의 F 위치. 사진 기록은이 시점에서 취할 수 있습니다. </li><li> TAG 표준에 해당하는 밴드를 확인하고 글라 신지 종이 무게의 큰 조각에 주걱으로 실리카를 긁어 판에서 제거합니다. 1.5 ㎖의 용매 세척 microcentrifuge 관에 실리카를 전송합니다. </li><li> 3시 2분 C의 1.0 ML을 추가 : M 용매 샘플 튜브에 1 분 동안 초음파 처리는, 원심 분리하여 실리카 펠렛하고 새 미리 무게를 측정 관에 용매를 전송합니다. 반복 일E 이전 단계, 여액을 수영장, N이 스트림하에 용매를 증발. </li><li> 추가 조직 샘플이 TLC로 분리하는 동안 4 ° C에서 어둠 속에서 N 2에서 태그를 포함한 건조 된 잔류 물을 저장합니다. 로다 민 6G는 샘플에 존재하지만, 헥산에 불용이고 즉시 MS 분석 전에 샘플 중에 용해 제거된다. </li></ol> 3. MALDI-TOF MS에 의한 TAG 분석 <ol><li> 용매 1 ㎖ (49.5 % 에탄올 49.5 % 아세토 니트릴, 및 1 % 수성 0.1 % TFA)에서 10 ㎎의 CHCA 용해하여 신선한 α-시아 노 -4 - 히드 록시 - 신 남산 (CHCA) 매트릭스 용액을 준비한다. </li><li> 10 pmol의 / μl를 얻기 위해 0.1 % 트리 플루오로 아세트산 (TFA)의 39.5 μL와 ACTH (1 ㎎ / ㎖) 1 μl를 혼합하여 기기의 해상도와 감도 테스트를 위해, adrenocarticotropic 호르몬 (18-39 클립, 2465.1989 다 ACTH)를 준비 원액. 이는 향후 사용을 위해 -20 ° C에 저장할 수 있습니다. </li><li> 신선한 작업 ACTH의 한 solut를 준비, 10 pmol의 / μL 원액 1 μl를 복용 9 ㎕의 0.1 % TFA와 혼합 한 다음 500 fmol를 얻기 위해 CHCA 매트릭스 용액 10 μL와 (1:1)을 혼합하여 이온 (1 pmol의 / μL) / ㎕의 농도. </li><li> 3시 2분 C 10 ㎎ / ㎖에서 TAG 표준을 준비 MALDI의 계측기 교정에 대한 M (예 tricaprin [470.361 다], 트리 카 프릴 린 [554.455 다], [638.549 다]를 trilaurin [722.642 다]를 트리 팔미틴, [800.689 다]를 tripalmitolein ,, [806.736 다]를 trimyristin [884.783 다], 트리-11-eicosenoin [968.877 다]를 트리 올레 인 및 trierucin [1052.971 다]). </li><li> 외부 잠금 질량 교정 TAG 표준에 대한 M : 3시 2분 C 10 ㎎ / ㎖에서 트리 올레 준비합니다. </li><li> 10 ㎎ / ㎖ 용액에 헥산에 저장 TAG 샘플을 녹입니다. </li><li> 0.5 M (77.06 mg/1.0 ml)을 시료와 표준 매트릭스로 사용하기에 90 % 메탄올 2,5 - 디 히드 록시 벤조산 (DHB)의 주식 솔루션을 준비합니다. 또한 NaOH를 1.0 M (2.0 g/50.0의 ML) 솔루션을 준비합니다. 알루미늄 FOI를 사용 DHB 용액 튜브를 덮<html> 빛으로부터 보호하기 위해 L. </li><li> 믹스 (사전 세척 튜브) 10.0 μL DHB 매트릭스, 10.0 ㎕의 샘플 또는 표준, 및 5.0 ㎕의 1.0 M NaOH를. 혼합 간략하게 아래로 혼합물을 가지고 튜브를 원심 분리기. </li><li> 스팟 건조까지 데시 케이 터에서 MALDI 스테인리스 스틸 표적 판과 장소 상 표준, 샘플, 또는 ACTH의 1.0 μL. 데이터 수집을위한 장비로 표적 판을 놓습니다. </li><li> 수행 MALDI-TOF MS는 긍정적 reflectron 모드에서 분석한다. 튜닝 및 ACTH와 TAG 표준 용액을 사용하여 기기의 제조자에 의해 설명 된대로 기기를 교정. </li><li> 대상 접시에 발견 각 샘플에 대한 스펙트럼을 획득 (장비 사양과 일치,이 작품에 대한 매개 변수는 5 Hz에서 레이저 발사 속도, 평균 스펙트럼을 얻기 위해 자리 당 100 ~ 촬영했다). MALDI 스펙트럼의 배경을 부드럽게하고 뺀 후, 온라인 검색 엔진 지질 MAPS (수동 프로세스 이온 피크/ 도구 / MS / glycerolipids_batch &quot;대상 =&quot;_blank &quot;&gt; www.lipidmaps.org / 도구 / MS / glycerolipids_batch). </li><li> 전구체 이온 강도 상자리스트에 목록의 스펙트럼을 복사하여 붙여 넣습니다. 원하는 아실 조성물로 검색을 제한합니다. 질량 / 충전 각 샘플의 스펙트럼에 존재하는 이온의 (M / Z) 비율에 의해 태그를 식별합니다. 지방산 메틸 에스테르 (FAME) 백분율은 별도의 GC / MS 분석에서 사용할 수있는 경우, 본 태그의 확률을 구하는 이러한 데이터를 추가한다. </li></ol> INSTRUMENT : 본 연구에서 사용되는 질량 분석 장치는 (337 nm의 20 Hz에서 N 2 레이저를 탑재) 워터스 MALDI 마이크로 MX이다. 긍정적 reflectron 모드 능력을 가진 어떤 제조사의 MALDI 계기가 사용될 수있다. reflectron, 5,200 V,, 사용하는 일반 설정은 펄스 전압 2,000 V입니다 소스, 15,000 V, MassLynx 소프트웨어 (버전 4.0)를 사용하여 데이터 수집과 함께. 이러한 운영 조건은 12,000보다 큰 질량 해상도를 제공합니다.

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	<li>Pappas, A., Anthonavage, M., Gordon, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+fate+and+selective+utilization+of+major+FAs+in+human+sebaceous+gland.">Metabolic fate and selective utilization of major FAs in human sebaceous gland.</a> Journal of Investigative Dermatology. 118 (1), 164-171 (2002).</li><li>Nicolaides, N., Hwei, H. C., Rice, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+skin+surface+lipids+of+man+compared+with+those+of+eighteen+species+of+animals.">The skin surface lipids of man compared with those of eighteen species of animals.</a> Journal of Investigative Dermatology. 51 (2), 83-89 (1968).</li><li>Desbois, A. P., Smith, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+free+fatty+acids:+activities,+mechanisms+of+action+and+biotechnological+potential.">Antibacterial free fatty acids: activities, mechanisms of action and biotechnological potential.</a> Applied Microbiology and Biotechnology. 85 (6), 1629-1642 (2010).</li><li>Munoz-Garcia, A., Williams, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutaneous+water+loss+and+lipids+of+the+stratum+corneum+in+Dusky+Antbirds,+a+lowland+tropical+bird.">Cutaneous water loss and lipids of the stratum corneum in Dusky Antbirds, a lowland tropical bird.</a> Condor. 109 (1), 59-66 (2007).</li><li>Catala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+function+of+very+long+chain+polyunsaturated+fatty+acids+in+the+pineal+gland.">The function of very long chain polyunsaturated fatty acids in the pineal gland.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1801, 95-99 (2010).</li><li>Stahl, J., Niedorf, F., Kietzmann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+epidermal+lipid+composition+and+skin+morphology+of+animal+skin+ex+vivo.">Characterization of epidermal lipid composition and skin morphology of animal skin ex vivo.</a> European Journal of Pharmacology. 72 (2), 310-316 (2009).</li><li>Picardo, M., Ottaviani, M., Camera, E., Mastrofrancesco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sebaceous+gland+lipids.">Sebaceous gland lipids.</a> Dermato-Endocrinology. 1 (2), 68-71 (2009).</li><li>Ro, B. I., Dawson, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+sebaceous+gland+activity+and+scalp+microfloral+metabolism+in+the+etiology+of+seborrheic+dermatitis+and+dandruff.">The role of sebaceous gland activity and scalp microfloral metabolism in the etiology of seborrheic dermatitis and dandruff.</a> Journal of Investigative Dermatology. 10, 194-197 (2005).</li><li>Davoudi, S. M., Sadr, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+of+skin+sebum+and+elasticity+level+in+patients+with+sulfur+mustard-induced+dermatitis+and+healthy+controls.">Comparative study of skin sebum and elasticity level in patients with sulfur mustard-induced dermatitis and healthy controls.</a> Skin Research and Technology. 16 (2), 237-242 (2010).</li><li>Zampeli, V. A., Makrantonaki, E., Tzellos, T., Zouboulis, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+pharmaceutical+concepts+for+sebaceous+gland+diseases:+implementing+today's+pre-clinical+data+into+tomorrow's+daily+clinical+practice.">New pharmaceutical concepts for sebaceous gland diseases: implementing today's pre-clinical data into tomorrow's daily clinical practice.</a> Current Pharmaceutical Biotechnology. 13 (10), 1898-1913 (2012).</li><li>Horton, H. R., Moran, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Principles of Biochemistry. , (1993).</li><li>Fahy, E., Subramaniam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+classification+system+for+lipids.">A comprehensive classification system for lipids.</a> European Journal of Lipid Science and Technology. 107 (5), 337-364 (2005).</li><li>Fahy, E., Subramaniam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+of+the+LIPID+MAPS+comprehensive+classification+system+for+lipids.">Update of the LIPID MAPS comprehensive classification system for lipids.</a> Journal of Lipid Research. 50 (5), S9-S14 (2009).</li><li>Fuchs, B., S&#252;&#223;, R., Nimptsch, A., Schiller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MALDI-TOF-MS+directly+combined+with+TLC:+A+review+of+the+current+state.">MALDI-TOF-MS directly combined with TLC: A review of the current state.</a> Chromotagraphia. 69, S95-S105 (2009).</li><li>Savary, B. J., Vasu, P., Lorence, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Recombinant Gene Expression, Reviews and Protocols. , (2011).</li><li>Gidden, J., Liyanage, R., Durham, B., Lay, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+fragmentation+observed+in+the+matrix-assisted+laser+desorption/ionization+time-of-flight+mass+spectrometric+analysis+of+triacylglycerols+in+vegetable+oils.">Reducing fragmentation observed in the matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometric analysis of triacylglycerols in vegetable oils.</a> Rapid Communications in Mass Spectrometry. 21, 1951-1957 (2007).</li><li>Fuchs, B., Schiller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+MALDI-TOF+mass+spectrometry+in+lipidomics.">Application of MALDI-TOF mass spectrometry in lipidomics.</a> European Journal of Lipid Science and Technology. 111 (1), 83-98 (2009).</li><li>Fuchs, B., S&#971;&#946;, R., Schiller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+of+MALDI-TOF+mass+spectrometry+in+lipid+research.">An update of MALDI-TOF mass spectrometry in lipid research.</a> Progress in Lipid Research. 49 (4), 450-475 (2010).</li><li>Karas, M., Bachmann, D., Hillenkamp, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+the+wavelength+in+high-irradiance+ultraviolet+laser+desorption+mass+spectrometry+of+organic+molecules.">Influence of the wavelength in high-irradiance ultraviolet laser desorption mass spectrometry of organic molecules.</a> Analytical Chemistry. 57 (14), 2935-2939 (1985).</li><li>Hillenkamp, F., Karas, M., Holtkamp, D., Klusener, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Energy+deposition+in+ultraviolet+laser+desorption+mass+spectrometry+of+biomolecules.">Energy deposition in ultraviolet laser desorption mass spectrometry of biomolecules.</a> International Journal of Mass Spectrometry and Ion Processes. 69 (3), 265-276 (1986).</li><li>Knochenmuss, R., Cole, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Electrospray and MALDI Mass Spectrometry: Fundamentals, Instrumentation, Practicalities, and Biological Applications. , 149-262 (2010).</li><li>Pannkuk, E. L., Gilmore, D., Savary, B. J., Risch, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Triacylglyceride+(TAG)+profiles+of+integumentary+lipids+isolated+from+three+bat+species+determined+by+matrix-assisted+laser+desorption+-+ionization+time-of-flight+mass+spectrometry+(MALDI+-+TOF+MS).">Triacylglyceride (TAG) profiles of integumentary lipids isolated from three bat species determined by matrix-assisted laser desorption - ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI - TOF MS).</a> Canadian Journal of Zoology. 90 (9), 1117-1127 (2012).</li><li>Blehert, D., Hicks, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bat+white-nose+syndrome:+An+emerging+fungal+pathogen.">Bat white-nose syndrome: An emerging fungal pathogen.</a> Science. 323 (5911), 227-228 (2009).</li><li>Gargas, A., Trest, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Geomyces+destructans+sp.+nov.+associated+with+bat+white-nose+syndrome.">Geomyces destructans sp. nov. associated with bat white-nose syndrome.</a> Mycotaxon. 108, 147-154 (2009).</li><li>Lorch, J. M., Meteyer, C. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+infection+of+bats+with+Geomyces+destructans+causes+white-nose+syndrome.">Experimental infection of bats with Geomyces destructans causes white-nose syndrome.</a> Nature. 480 (7377), 376-378 (2011).</li><li>Frick, W. F., Pollock, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+disease+causes+regional+population+collapse+of+a+common+North+American+bat+species.">An emerging disease causes regional population collapse of a common North American bat species.</a> Science. 329 (5992), 679-682 (2010).</li><li>Boyles, J. G., Cryan, P. M., McCracken, G. F., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+economic+importance+of+bats+in+agriculture.">The economic importance of bats in agriculture.</a> Science. 332 (6025), 41-42 (2011).</li><li>Sikes, R. S., Gannon, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+of+the+American+Society+of+Mammalogists+on+the+use+of+wild+mammals+in+research.">Guidelines of the American Society of Mammalogists on the use of wild mammals in research.</a> Journal of Mammalogy. 92 (1), 235-253 (2011).</li><li>Law, S., Wertz, P. W., Swartzendruber, D. C., Squier, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+variation+in+content,+composition,+and+organization+of+porcine+epithelial+barrier+lipids+revealed+by+thin+layer+chromatography+and+transmission+electron+microscopy.">Regional variation in content, composition, and organization of porcine epithelial barrier lipids revealed by thin layer chromatography and transmission electron microscopy.</a> Archives of Oral Biology. 40 (12), 1085-1091 (1995).</li><li>Folch, J., Lees, M., Sloane Stanley, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+the+isolation+and+purification+of+total+lipids+from+animal+tissues.">A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues.</a> Journal of Biological Chemistry. 226 (1), 497-509 (1957).</li><li>Nicolaides, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+lipids:+Their+biochemical+uniqueness.">Skin lipids: Their biochemical uniqueness.</a> Science. 186 (4158), 19-24 (1974).</li><li>Camera, E., Ludovici, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+analysis+of+the+major+lipid+classes+in+sebum+by+rapid+resolution+high-performance+liquid+chromatography+and+electrospray+mass+spectrometry.">Comprehensive analysis of the major lipid classes in sebum by rapid resolution high-performance liquid chromatography and electrospray mass spectrometry.</a> Journal of Lipid Research. 51, 3377-3388 (2011).</li><li>Fuchs, B., S&#252;&#223;, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+analysis+by+thin-layer+chromatography-+A+review+of+the+current+state.">Lipid analysis by thin-layer chromatography- A review of the current state.</a> Journal of Chromatography A. 1218 (19), 2754-2774 (2011).</li></ol>

저자는 더 경쟁 재정적 이익을 선언하지 않습니다.

이 논문은 지질 분자의 시간이 소요되는 유도체 화하지 않고, 예비 TLC에 의해 포유 동물의 외피 분리 광범위한 지질 클래스를 분리 MALDI-TOF MS에 의해 TAG 프로파일을 결정하기위한 간단하고 강력한 방법을 제공합니다. MALDI-TOF MS와 태그의 품질의 스펙트럼을 생산하는 중요한 단계는 다음과 같습니다 최소한의 오염이나 산화를 가진 화합물 1) 성공적인 추출, 크로마토 그래피에 의한 2) 충분한 분리 및 격리하고, MALDI-TOF 3) 해상도와 질량 정확성을 MS. 이 논문은 TAG MS 프로파일을 얻기 위해 동부 붉은 박쥐의 plagiopatagium에서 중성 지질 부분을 추출하고 분리하여 방법을 보여줍니다. 본 연구는 박쥐 종 사용하는 동안 (포유 :보기 Chiroptera)이 방법은 모든 포유 동물 종의 외피 지질을 연구하기 위해 확장 할 수 있습니다. 박쥐 외피는 태그, 유리 지방산, squa의 낮은 금액으로, 주로 콜레스테롤 것을 특징으로렌 및 스테롤 / 왁스 에스테르. (- 인간의 7 % 만 26 - 1 박쥐의 62 %) 콜레스테롤이 더 큰 비율로 발생하는 동안 박쥐 피지의 지질 비율이 그 스쿠알렌에 인간과 다른 것은, (인간의 최대 16 % 반대) 낮은 양으로 존재하다 22 31. 28 %까지의 비율이 동부 붉은 박쥐의 머리에서 발견하는 동안 인간의 머리카락은 약 3 %의 태그가 포함되어 있습니다. 박쥐에서 지질 샘플의 추출은 다른 종과 유사하다. 이 연구에서, 용매에 담가 면봉은 피지를 제거하기 위해 사용되는 반면, 하나는 여러 번 외피의 표면에 용제를 함유하는 바이알 또는 샘플 튜브를 반전 할 수있다. 특수 테이프 제품은 표면 지질 32를 추출하는 대체 수단을 제공한다. 적절한 지질 추출의 중요한 부분은 피부 오일의 오염을 최소화하는 것입니다. 이것은 쉽게 모든 샘플 및 입고 검사 장갑 사이의 조직과기구를 닦고, 메탄올로 스퀴즈 병을 유지하고 모든 유리 식기를 분사하여 수행됩니다. 산화 오F는 불포화 acyls BHT의 추가를 통해 방지하고 불문 샘플에 저장된 온도의 사용되어야한다. 생체 분자 분석은 일반적으로 오염 물질의 관심의 개별 분자 크로마토 그래피 단계가 필요합니다. TLC는 가스 나 액체 크로마토 그래피에 대한 계측 요구 사항을 방지하고 견고하고 반복 가능한 결과를 달성하기 위해 덜 기술적 인 경험을 필요로이 방법에 사용됩니다. 또한 지질 수준에 따라 여러 가지 이동상은 통합 될 수있다. 또한, HPTLC 플레이트 및 주사 농도계의 사용은 정량적 결과를 얻기 위해 사용될 수있다. TLC 방법의 변화가 너무 많아서 여기에 모두 나열 할 수 있지만, 지질 TLC에 사용되는 몇 가지 일반적인 모바일 단계 클로로포름을 포함한다 : 비극성 지질 (28)의 분리를위한 에틸 에테르 : 메탄올 : 인지질 및 당지질 또는 이소옥탄의 분리를위한 물. E : 다른 지질 클래스, H에서 태그를 분리의 측면에서 너무lvent 시스템이 지속적으로 작동하고 비교 결과를 제공합니다. TLC를 사용하는 또 다른 장점은 그 밴드 빠르게 분석 물질의 유도체 화 전에없이 MALDI-TOF MS를 이용하여 프로파일 링 될 수 있다는 것이다. 본 연구에서는 실리카 TLC 플레이트로부터 제거되고, 분석 물질은 용출 용매의 증발 및 흡착제를 분리하는 용매 및 이후 원심 분리에 초음파로부터 용출된다. 또한, 매트릭스 분석 밴드 TLC 플레이트에서 분리 한 다음 직접 MALDI-TOF MS (33)에 의해 분석에 직접 적용 할 수있다. MALDI-TOF MS에 의해 성공적으로 프로파일 링은 충분한 샘플 준비 및 튜닝 및 계측기를 교정와 운영자의 능력에 의존 않습니다. 악기는 그 분자 분자량 범위의 적절한을 다루는 표준을 매일 교정해야한다. 장비의 적절한 감도와 해상도 (예 : ≥ 10,000)도 confirme에해야ACTH 매일 거라고. 포유 동물의 외피의 표면에서 발견 피지의 지질 성분은 세균 / 곰팡이 병원균에 의해 식민지에 역할을 할 수 있습니다. 따라서 종 및 개인 간의 화학적 조성물의 기술은 인간 및 동물 질병의 프로세스에 대한 실마리를 제공 할 수있다. 질병과 건강한 사람 사이에 종자 간 차이가 임상 증상을 나타낼 수 있다는 질병 감지 및 진단에 도움. 미생물 성장을 억제하는 특정 화합물이 존재하는 경우 또한, 이러한 질환 치료 및 예방에 사용하기 위해 식별 될 수있다.

포유류의 외피 조직은 표피 각질 구조 (예를 들어, 머리와 손톱), 및 외분비 샘이 (가) 있습니다. 피지선 형 외분비 샘은 공동으로 좌창 부 (1)이라고합니다 모낭과 연결되어 있습니다. 피지선은 피지이라 피부 표면에 기름 삼출물을 놓습니다. 피지는 glycerolipids (예 triacylglycerides [태그]), 유리 지방산의 acyls (유리 지방산), 스테롤 / 왁스 에스테르, 스쿠알렌으로 주로 구성되어있다. 피지의 화학적 조성은 종 특이이있다. 선천성 면역계의 일부인 및 항균 기능 3을 제공 할뿐만 아니라, 지질, 피부 피지선 4까지 증발 수분 손실, 셀룰러 무결성 및 유전자 조절 (5) 및 약물 흡수 6 등 중요한 생리 학적 과정에 영향을 미친다. 피지 지질 조성물은 질환의 마커 역할을 할 수 있습니다. 변경 비율 및 피지선 (B)의 양도로 지질 클래스는 다른 사람 (10) 사이에 여드름 7, 8 비듬, 지루성 피부염 8 asteatosis 9, 같은 질병의 임상 증상입니다. 표피와 헤어 조직 스테롤 및 파생 상품, 태그, 유리 지방산, 세라마이드, 인지질 및 기타 사소한 지질 성분을 함유 변수 프로파일을 포함한다. 외피 지질, 질병 프로세스에서 작동 할 수 있기 때문에 건강하고 병에 걸린 사람 사이의 태그의 화학 성분의 차이를 결정하는 것은 질병의 임상 진단에 유용 할 수 있습니다. 지질은 일반적으로 비극성 또는 하나 비극성 극성 치환체 (11)와 불용성 유기 화합물로 정의된다. 지질 구조체가 긴 탄화수소 사슬 (왁스 에스테르, 유리 지방산, 알콜, 케톤, 알데히드 등) 산소화 알칸, 또는 콜레스테롤 (12)과 같은 복잡한 고리 구조 일 수있다. 구조를 기반으로 지질의 주요 8 클래스 (유리 지방산, glycerolipi이 있습니다DS [GL] glycerophospholipids에 따라 화학적 특성의 다양한 전시 [GP], 스핑 고리 피드 [SP], 스테롤 지질 [ST], 프레 놀 지질 [PR] saccharolipids [SL] 및 polyketides [PK), 클래스 13. 때문에 지질 클래스의 화학적 특성의 폭 넓은 변화에 지질 분자의 사전 유도체없이 직접 프로파일이 요구되고있다. 지질 연구 한 출사 방법은 매트릭스 보조 레이저 탈착 / 이온화 비행 시간 형 질량 분석 (MALDI-TOF MS) (14)와 결합하여 박층 크로마토 그래피 (TLC)이다. MALDI-TOF MS는 단백질을 식별하고 인해 트립신 소화 단백질 (15)로부터 생성 된 매우 정확한 펩타이드 이온 질량 &quot;지문&quot;을 특정 아미노산 서열에 연결하는 단백체 연구에서 광범위하게 사용된다. MALDI-TOF MS는 또한 태그 16-18과 같은 지질을 포함하는 다른 생체 분자 클래스를 프로파일 링하는 데 이용 될 수있다. MALDI는 행렬, 일반의 사용을 필요방향족과 공액 이중 결합 구조를 포함하는 유기 화합물을 ically. 매트릭스 분자는 온화, 분석 물에 레이저 에너지를 전달 양성자 전달을 촉진하고, 단독 청구 가스상 19-21 이온을 생성하는 역할을한다. 이온은 고 진공하에 높은 전압 필드를 실시하고 이온이 연속적 그들의 질량 대 전하 비율에 비례하는 속도 차이에 의해 분리된다 TOF 질량 분석기로 가속된다. 심지어 매우 큰 생체 분자 간략화 스펙트럼 분석을위한 단독 청구 분자 이온 종을 생산, 작은 조각으로 이온화 될 수있다. 이전 유도체 화하지 않고 직접 지질 분자를 분석 할 수있는 능력은 lipidomic 연구 18 MALDI-TOF MS의 준비 채택을 추진하고있다. 이 논문은 머리에서 외피 지질을 분리하고 분석 할 수있는 일상적인 방법을 제시, 피지 분비와 동부 붉은 박쥐의 plagiopatagium (Lasiurus boreali들). 이것은 화이트 코 증후군 (WNS) (22)의 질병 과정을 설명하기 위하여 박쥐 외피 지질의 종간의 차이를 확인하는 데 사용됩니다. WNS는 박쥐의 곰팡이 질환과 Geomyces가 23-25 ​​destructans 새로 설명 호냉 종에 의해 발생합니다. WNS는 5 백만 북미 동굴 박쥐의 죽음의 원인 및 농업 산업 (26, 27)에 손상 수십억 달러의 잠재적 인 경제적 영향과 취약 박쥐 종의 멸종을 위협하고있다. G.의 단계를 조사하려면 감염 destructans, 지질은 동부 붉은 박쥐의 머리와 날개 조직에서 추출하고, MALDI-TOF MS에 의한 후속 분석을 위해 태그 부분을 분리하기 위해 TLC에 의해 광범위한 지질 클래스로 구분됩니다. 태그는 짧은 아실 체인을 포함하고 쉽게 작은 매트릭스 간섭 MALDI-TOF MS에 의해 감지됩니다.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butylated Hydroxytoluene</td>
			<td>MP Biomedicals, LLC</td>
			<td>101162</td>
			<td><a href="http://www.mpbio.com" target="_blank">www.mpbio.com</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TLC Flexible Plates</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>4410-222</td>
			<td><a href="http://www.whatman.com" target="_blank">www.whatman.com</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACTH</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chem. Co.</td>
			<td>A8346-5X1VL</td>
			<td><a href="http://www.sigmaaldrich.com" target="_blank">www.sigmaaldrich.com</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triolein</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chem. Co.</td>
			<td>44895-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TLC Lipid Standard</td>
			<td></td>
			<td>TLC 18-1</td>
			<td><a href="http://www.nu-chekprep.com" target="_blank">www.nu-chekprep.com</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MALDI TAG Standard</td>
			<td>Nu-Check Prep., Inc.</td>
			<td>NIH Code 53B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MALDI TAG Standard</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chem. Co.</td>
			<td>17810-1AMP-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Vials with Teflon Cap</td>
			<td>U.S. National Scientific Co.</td>
			<td>B7800-2</td>
			<td><a href="http://www.nationalscientific.com/" target="_blank">www.nationalscientific.com/</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DHB</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chem. Co.</td>
			<td>50862-1G-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHCA</td>
			<td>Sigma-Aldrich Chem. Co.</td>
			<td>C8982-10X10 mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sebutape</td>
			<td>CuDerm</td>
			<td>S100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

profiling the triacylglyceride contents in bat integumentary lipids by preparative thin layer chromatography and maldi-tof mass spectrometry

포유 동물의 외피는 피부 표면에 유성 물질을 분비하는 피지선이 포함되어 있습니다. 피지 생산은 병원성 미생물에 대한 보호이다 타고난 면역 시스템의 일부입니다. 비정상 피지 생성 및 화학 조성물은 또한 특정 피부 질환의 임상 증상이다. 피지는 종 특이하다 triacylglycerides 포함 지질의 복잡한 혼합물이 포함되어 있습니다. 다양한 지질 클래스에 의해 전시 된 다양한 화학적 특성 피지 조성물의 특정 결정을 방해. 지질에 대한 분석 기법은 일반적으로 노동 집약적 증가 샘플 준비 비용 있습니다 화학 유도체 화를 필요로한다. 이 논문은 박층 크로마토 포유류 외피, 분리 광범위한 지질 클래스로부터 지질을 추출하고, 매트릭스 보조 레이저 탈착 / 이온화 비행 시간 형 질량 분석계를 사용 triacylglyceride 내용을 프로파일 링하는 방법을 설명합니다. 이 강력한 방법은 직접 측정 할 수종 및 개인간 triacylglyceride 프로파일, 그리고 용이 포유류의 임의의 분류 학적 그룹에 적용 할 수있다.

Folch (30)에 의해 설명 조직의 총 지질을 분리하는 추출 방법은 여기에 적응하는 간단한 절차입니다. 조직 추출 및 용매를 증발시킨 후, 지질은 종종 황색 필름으로 나타납니다. 옐로우 색상은 대부분의 액체 - 액체 추출을 수행함으로써 제거 될 수 단백질 오염물로부터이다. 예비 TLC는 오염 물질에서 태그 부분을 분리하기 때문에 추가 샘플 처리는이 절차에서 필요하지 않습니다. 모든 필터링 단계에서 신선한 무수 황산나트륨의 추가는 정확한 지질 무게의 결정에 영향을 미치는 수질 오염을 줄일 수 있습니다. 포유류의 외피 지질 H와 예비 TLC에 의해 분석 : E를 : 모바일 상으로 보통 스테롤, 유리 지방산, 태그 및 스테롤 에스테르 / 왁스 에스테르 / 스쿠알렌 (그림 1) (원점에서 시작)에 해당하는 네 가지 밴드를 해결합니다. 경우에 analyti를 사용하는 경우E : H와 칼 고성능 (HP) TLC 이동상, 스테롤 에스테르, 왁스 에스테르, 스쿠알렌은 분리하고 별도의 세 가지 밴드로 나타납니다. 본 연구에 사용 된 조건에서, 스테롤 / 왁스 에스테르가 분리되지 않습니다. 에틸 에테르 (95:5 V / V)를, 그리고 HPTLC 플레이트 농도계를 스캔하여 분석 될 수있다 : 이들 대역은 관심이 있다면, 이동상 이소옥탄으로 전환 될 수있다. 다른 요소별로 분리가 발생할 수 있습니다. 이들은 일반적으로 일관된 품질 TLC 분리와 데이터를 얻기 위해, 챔버에 여과지를 배치 뚜껑에 단단히 밀착을 위해 그리스를 적용, 밤새 실을 평형화, 깨끗한 TLC 챔버를 유지하여 제거된다. 동부 적색 버트로부터 격리 태그 얻어진 주제 MALDI-TOF 질량 스펙트럼은도 2 및 3에 나타낸다. 비 수생 포유 동물에서 분리 된 태그에 일반적으로 사용되는 910, - 이러한 스펙트럼은 m / z 850 사이의 질량 범위 TAG 이온 피크를 포함의. 1.0 M NaOH를 첨가 단독으로 H + 이온보다 더 안정적 나 + 이온 충전을 촉진. 안정성 이외에, H + 및 K + 이온의 부재는 스펙트럼 분석의 용이성을 증가시킨다. M / Z는 850-910 이온 피크는 16시, 18시, 18시 1분에 대응하고 18시 2분 FA의 부분은 태그의 지배적 아실 성분 (표 1)을 주도했습니다. 태그 가능한 FA의 부분은 초기에 총 이온 m / z의 MALDI-TOF MS 스펙트럼에 존재하고, 추론 종과 개인 간의 차이에 의해 결정 될 수있다. 아실 콘텐츠의 특정 비율이 요구되는 경우에는, 그 다음 MS / MS 또는 가스 크로마토 그래피 (GC / MS)이 사용되어야한다. 아 비율에 대한 자세한 정보는 스펙트럼의 디아 실 글리세 라이드 지역 (그림 4)에서 피크를 관찰하여 추론 할 수있다. 디아 실 글리세 라이드는 MALDI 소스 TAG 분열에서 생산되고, m / z 590에서 찾을 수 있습니다 - 650 지역. TAG 조각화가 증가 할 수있다1.0 M의 NaOH (16)의 첨가를 생략. 동부 붉은 박쥐 날개 조직은 m / z 881.8 (각각 그림 2와 3)에서 지배적 인 피크 m / z 879.7 헤어 조직에서 지배적 인 피크에 의해 특징입니다. m / z 907.8, 879.7 및 855.7 (POP, PPO의)에서 피크가 853.7 존재 ~ 40 %의 피크 머리카락 조직에서 (~ 50 %) 강도도 약합니다. <table border="1"><tbody><tr><td fo:width="2in"> 구성 </td><td fo:width="1in"> 원소 조성 </td><td fo:width="1in"> 관측 된 질량 </td></tr><tr><td> 나 + 태그 </td><td></td><td> 나 + 태그 </td></tr><tr><td> SSO </td><td> C 57 H 108 O 6 </td><td> 911.8 </td></tr><tr><td> OOS, LSS </td><td> C 57 H 106 O 6 </td><td> 909.8 </td></tr><tr><td> OOO, LnSS, LSO </td><td> C 57 H104 O 6 </td><td> 9,078 </td></tr><tr><td> LOO, LLS </td><td> C 57 H 102 O 6 </td><td> 905.8 </td></tr><tr><td> LLO, OOLn </td><td> C 57 H 100 O 6 </td><td> 903.7 </td></tr><tr><td> 평생 학습 </td><td> C 57 H 98 O 6 </td><td> 901.7 </td></tr><tr><td> LLLn </td><td> C 57 H 96 O 6 </td><td> 899.7 </td></tr><tr><td> LLnLn </td><td> C 57 H 94 O 6 </td><td> 897.7 </td></tr><tr><td> LnLnLn </td><td> C 57 H 92 O 6 </td><td> 895.7 </td></tr><tr><td> OSP </td><td> C 55 H 104 O 6 </td><td> 883.8 </td></tr><tr><td> LSP, OOP, SOPO </td><td> C 55 H 102 O 6 </td><td> 881.8 </td></tr><tr><td> LOP, LnSP, LSPo </td><td> C 55 H 100 O 6 &lt;/ TD&gt; <td> 879.7 </td></tr><tr><td> LLP, LnOP, LOPo </td><td> C 55 H 98 O 6 </td><td> 877.7 </td></tr><tr><td> LnLP, LLPo, LnOPo </td><td> C 55 H 96 O 6 </td><td> 875.7 </td></tr><tr><td> LnLnP, LnLPo </td><td> C 55 H 94 O 6 </td><td> 873.7 </td></tr><tr><td> LnLnPo </td><td> C 55 H 92 O 6 </td><td> 871.7 </td></tr><tr><td> PPS </td><td> C 53 H 102 O 6 </td><td> 857.8 </td></tr><tr><td> POP, PPO의 </td><td> C 53 H 100 O 6 </td><td> 855.7 </td></tr><tr><td> OOM, PPL, PoPoS, 포포 </td><td> C 53 H 98 O 6 </td><td> 853.7 </td></tr><tr><td> PPLn, PPoL, PoPoO, MYOO </td><td> C 53 H 96 O 6 </td><td> 851.7 </td></tr><tr><td> LLM, LnOM </td><td> C 53 H 94 </sUB&gt; O 6 </td><td> 849.7 </td></tr><tr><td> PPP, SSLa </td><td> C 51 H 98 O 6 </td><td> 829.7 </td></tr><tr><td> PPPo, OSLa </td><td> C 51 H 96 O 6 </td><td> 827.7 </td></tr><tr><td> PPoPo, PMyO </td><td> C 51 H 94 O 6 </td><td> 825.7 </td></tr><tr><td> LnLnLa </td><td> C 51 H 86 O 6 </td><td> 817.6 </td></tr><tr><td> MMS, SLAP, PPM </td><td> C 49 H 94 O 6 </td><td> 801.7 </td></tr><tr><td> SLaPo, PPoM, PPMy </td><td> C (49) H 92 O 6 </td><td> 799.7 </td></tr><tr><td> PoPoM, OOCa </td><td> C 49 H 90 O 6 </td><td> 797.7 </td></tr><tr><td> MMP </td><td> C 47 H 90 O 6 </td><td> 773.7 </td></tr><tr><td> MMPo, OCAP </td><td> C 47 H 88 O6 </td><td> 771.7 </td></tr><tr><td> OCaPo </td><td> C 47 H 86 O 6 </td><td> 769.6 </td></tr><tr><td> MMM, PPCa, PMLa </td><td> C 45 H 86 O 6 </td><td> 745.6 </td></tr><tr><td> PoPCa, PoMLa </td><td> C 45 H 84 O 6 </td><td> 743.6 </td></tr><tr><td> PoPoCa </td><td> C 45 H 82 O 6 </td><td> 741.6 </td></tr><tr><td> LaLaP, MMLa, MCAP </td><td> C 43 H 82 O 6 </td><td> 717.6 </td></tr><tr><td> LaLaPo </td><td> C 43 H 80 O 6 </td><td> 715.6 </td></tr><tr><td> OO </td><td> C 39 H 72 O 5 </td><td> 643.5 </td></tr><tr><td> OL </td><td> C 39 H 70 O 5 </td><td> 641.5 </td></tr><tr><td> LL </td><td> C 39 H 68 O 5 </td><td> 639.5 </td></tr><tr><td> SP </td><td> C 37 H 72 O 5 </td><td> 619.5 </td></tr><tr><td> 영업 이익 </td><td> C 37 H 70 O 5 </td><td> 617.5 </td></tr><tr><td> LP </td><td> C 37 H 68 O 5 </td><td> 615.5 </td></tr></tbody></table> 표 1. 지방산 조성, 원소 조성 및 triacylglycerides 및 디아 실 글리세 라이드의 sodiated 부가 물의 동위 원소 질량. Ln에이 = 리놀렌산 (18시 3분), L = 리놀레산 (18시 2분), O는 = 올레산 (18시 1분), S = 스테아르 산 (18시), P는 = 팔 미트 산 (16시), 포는 = 팔 미트 산 (16시 1분), M은 = 미리스트 산 (14시), 내 = myristoleic 산 (14시 1분) 라 = 우르 산 (12시), CA = 카 프릭 산 (10시). <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/50757/50757fig1.jpg" /> 그림 1. 디 에틸 에테르 : 아세트산 헥산 광범위한 지질 클래스 분리 박층 크로마토 그램(80:20:2 V / V / V)를 분리시켰다. 스테롤과 FFA 사이의 밴드는 표준에 의해 확인되지 않았습니다 만, 지방 알코올 또는 왁스 에스테르 수있다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/50757/50757fig2.jpg" /> 그림 2. sodiated 태그의 MALDI-TOF 질량 스펙트럼의 확장 TAG 지역. - 동부 붉은 박쥐 (L. 보 리 얼리스) 날개 조직에서 (m / z 700 950) m / z 853.7 (KMS, PPL, PoPoS, 포포) 및 m에서 확인 봉우리 / z 879.7 (LOP, LnSP, LSPo가). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50757/50757fig2large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/50757/50757fig3.jpg" /> 그림 3. 동부 붉은 박쥐 (L. 보 리 얼리스) 머리 조직에서 - sodiated 태그 (950 m / z 700)의 MALDI-TOF 질량 스펙트럼의 확장 TAG 지역.m / z 905.8 (LOO, LLS) 및 m / z 907.8 (OOO, LnSS, LSO)에서 확인 봉우리. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50757/50757fig3large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> . <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/50757/50757fig4.jpg" /> 그림 4. sodiated DAG 조각의 MALDI-TOF 질량 스펙트럼 (m / z 530-730)의 DAG 지역. 동부 붉은 박쥐에서 (L. 보 리 얼리스) 날개 조직 m / z 643.5 (OO)과 m / z 615.5 (LP)에서 확인 봉우리 . <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50757/50757fig4large.jpg" target="_blank">큰 그림을 보려면 여기를 클릭하십시오</a> .

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Profiling the Triacylglyceride Contents in Bat Integumentary Lipids by Preparative Thin Layer Chromatography and MALDI-TOF Mass Spectrometry

포유류의 외피는 개별 종의 화학 성분 특성을 제공 할 수있는 용매 추출 지질이 포함되어 있습니다. 이 논문은 박막 크로마토 그래피를 사용하여 외피 조직으로부터 격리 광범위한 지질 클래스 분리 및 매트릭스 - 보조 레이저 탈착 / 이온화 비행 시간 형 질량 분광 분석에 의해 triacylglyceride 프로파일을 결정하기위한 통상적 인 방법을 제시한다.

제조 박층 크로마토 그래피 및 MALDI-TOF 질량 분석에 의해 박쥐 외피 지질의 Triacylglyceride 내용을 프로파일 링

The mammalian integument includes sebaceous glands that secrete an oily material onto the skin surface. Sebum production is part of the innate immune ...

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Research

JoVE Journal

Chemistry

21.1K 조회수.  Arkansas State University.  포유류의 외피는 개별 종의 화학 성분 특성을 제공 할 수있는 용매 추출 지질이 포함되어 있습니다. 이 논문은 박막 크로마토 그래피를 사용하여 외피 조직으로부터 격리 광범위한 지질 클래스 분리 및 매트릭스 - 보조 레이저 탈착 / 이온화 비행 시간 형 질량 분광 분석에 의해 triacylglyceride 프로파일을 결정하기위한 통상적 인 방법을 제시한다. 

비디오: Profiling the Triacylglyceride Contents in Bat Integumentary Lipids by Preparative Thin Layer Chromatography and MALDI-TOF Mass Spectrometry

Large Scale Non-targeted Metabolomic Profiling of Serum by Ultra Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (UPLC-MS)

Non-targeted metabolite profiling by ultra performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (UPLC-MS) is a powerful technique to investigate metabolism. The approach offers an unbiased and in-depth analysis that can enable the development of diagnostic tests, novel therapies, and further our understanding of disease processes. The inherent chemical diversity of the metabolome creates significant analytical challenges and there is no single experimental approach that can detect all metabolites. Additionally, the biological variation in individual metabolism and the dependence of metabolism on environmental factors necessitates large sample numbers to achieve the appropriate statistical power required for meaningful biological interpretation. To address these challenges, this tutorial outlines an analytical workflow for large scale non-targeted metabolite profiling of serum by UPLC-MS. The procedure includes guidelines for sample organization and preparation, data acquisition, quality control, and metabolite identification and will enable reliable acquisition of data for large experiments and provide a starting point for laboratories new to non-targeted metabolite profiling by UPLC-MS.

Large Scale Non-targeted Metabolomic Profiling of Serum by Ultra Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry UPLC-MS

Non-targeted metabolite profiling by ultra performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (UPLC-MS) is a powerful technique to investigate metabolism. This article outlines a typical workflow utilized for non-targeted metabolite profiling of serum including sample organization and preparation, data acquisition, data analysis, quality control, and metabolite identification.

울트라 성능 액체 크로마토 그래피 - 질량 분석법 (UPLC-MS)에 의해 혈청 대규모 비 타겟 Metabolomic 프로파일

Non-targeted metabolite profiling by ultra performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (UPLC-MS) is a powerful technique to ...

연구

화학

Untargeted Metabolomics from Biological Sources Using Ultraperformance Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry (UPLC-HRMS)

Here we present a workflow to analyze the metabolic profiles for biological samples of interest including; cells, serum, or tissue. The sample is first separated into polar and non-polar fractions by a liquid-liquid phase extraction, and partially purified to facilitate downstream analysis. Both aqueous (polar metabolites) and organic (non-polar metabolites) phases of the initial extraction are processed to survey a broad range of metabolites. Metabolites are separated by different liquid chromatography methods based upon their partition properties. In this method, we present microflow ultra-performance (UP)LC methods, but the protocol is scalable to higher flows and lower pressures. Introduction into the mass spectrometer can be through either general or compound optimized source conditions. Detection of a broad range of ions is carried out in full scan mode in both positive and negative mode over a broad m/z range using high resolution on a recently calibrated instrument. Label-free differential analysis is carried out on bioinformatics platforms. Applications of this approach include metabolic pathway screening, biomarker discovery, and drug development.

Untargeted Metabolomics from Biological Sources Using Ultraperformance Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry UPLC-HRMS

Untargeted metabolomics provides a hypothesis generating snapshot of a metabolic profile. This protocol will demonstrate the extraction and analysis of metabolites from cells, serum, or tissue. A range of metabolites are surveyed using liquid-liquid phase extraction, microflow ultraperformance liquid chromatography/high-resolution mass spectrometry (UPLC-HRMS) coupled to differential analysis software.

Ultraperformance 액체 크로마토 그래피 고해상도 질량 분석 (UPLC-HRMS)를 사용하여 생물 소스에서 타겟이 불분명 한 대사

Here we present a workflow to analyze the metabolic profiles for biological samples of interest including; cells, serum, or tissue. The sample is first ...

Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa

Effectively determining masses of proteins is critical to many biological studies (e.g. for structural biology investigations). Accurate mass determination allows one to evaluate the correctness of protein primary sequences, the presence of mutations and/or post-translational modifications, the possible protein degradation, the sample homogeneity, and the degree of isotope incorporation in case of labelling (e.g. 13C labelling).
Electrospray ionization (ESI) mass spectrometry (MS) is widely used for mass determination of denatured proteins, but its efficiency is affected by the composition of the sample buffer. In particular, the presence of salts, detergents, and contaminants severely undermines the effectiveness of protein analysis by ESI-MS. Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) MS is an attractive alternative, due to its salt tolerance and the simplicity of data acquisition and interpretation. Moreover, the mass determination of large heterogeneous proteins (bigger than 100 kDa) is easier by MALDI-MS due to the absence of overlapping high charge state distributions which are present in ESI spectra.
Here we present an accessible approach for analyzing proteins larger than 100 kDa by MALDI-time of flight (TOF). We illustrate the advantages of using a mixture of two matrices (i.e. 2,5-dihydroxybenzoic acid and &#945;-cyano-4-hydroxycinnamic acid) and the utility of the thin layer method as approach for sample deposition. We also discuss the critical role of the matrix and solvent purity, of the standards used for calibration, of the laser energy, and of the acquisition time. Overall, we provide information necessary to a novice for analyzing intact proteins larger than 100 kDa by MALDI-MS.

Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight MALDI-TOF Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa

Accurate mass measurement represents an important step during the investigation of proteins. Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry (MS) can be used for such determination and its key advantage is the tolerance to salts, detergents and contaminants. Here we illustrate an accessible approach for the analysis of proteins larger than 100 kDa by MALDI-MS.

비행의 레이저 탈착 / 이온화 시간 본래대로 단백질의 (MALDI-TOF) 질량 분광 분석 매트릭스를 이용한 큰 100 kDa의

Effectively determining masses of proteins is critical to many biological studies (e.g. for structural biology investigations). Accurate mass ...

An HS-MRM Assay for the Quantification of Host-cell Proteins in Protein Biopharmaceuticals by Liquid Chromatography Ion Mobility QTOF Mass Spectrometry

The analysis of low-level (1-100 ppm) protein impurities (e.g., host-cell proteins (HCPs)) in protein biotherapeutics is a challenging assay requiring high sensitivity and a wide dynamic range. Mass spectrometry-based quantification assays for proteins typically involve protein digestion followed by the selective reaction monitoring/multiple reaction monitoring (SRM/MRM) quantification of peptides using a low-resolution (Rs ~1,000) tandem quadrupole mass spectrometer. One of the limitations of this approach is the interference phenomenon observed when the peptide of interest has the "same" precursor and fragment mass (in terms of m/z values) as other co-eluting peptides present in the sample (within a 1-Da window). To avoid this phenomenon, we propose an alternative mass spectrometric approach, a high selectivity (HS) MRM assay that combines the ion mobility separation of peptide precursors with the high-resolution (Rs ~30,000) MS detection of peptide fragments. We explored the capabilities of this approach to quantify low-abundance peptide standards spiked in a monoclonal antibody (mAb) digest and demonstrated that it has the sensitivity and dynamic range (at least 3 orders of magnitude) typically achieved in HCP analysis. All six peptide standards were detected at concentrations as low as 0.1 nM (1 femtomole loaded on a 2.1-mm ID chromatographic column) in the presence of a high-abundance peptide background (2 &#181;g of a mAb digest loaded on-column). When considering the MW of rabbit phosphorylase (97.2 kDa), from which the spiked peptides were derived, the LOQ of this assay is lower than 50 ppm. Relative standard deviations (RSD) of peak areas (n = 4 replicates) were less than 15% across the entire concentration range investigated (0.1-100 nM or 1-1,000 ppm) in this study.

Here, we describe a chromatographic assay coupled with the ion mobility separation of peptide precursors followed by the high-resolution (~30,000) MS-detection of peptide fragments for the quantification of spiked peptide standards in a monoclonal antibody digest.

액체 크로마토그래피 이온 이동성 QTOF 질량 분석에 의해 단백질 바이오에 주인 세포 단백질의 정량화에 대 한 HS MRM 분석 결과

The analysis of low-level (1-100 ppm) protein impurities (e.g., host-cell proteins (HCPs)) in protein biotherapeutics is a challenging assay requiring ...

Real-time Breath Analysis by Using Secondary Nanoelectrospray Ionization Coupled to High Resolution Mass Spectrometry

Exhaled volatile organic compounds (VOCs) have aroused considerable interest, since they can serve as biomarkers for disease diagnosis and environmental exposure in a non-invasive manner. In this work, we present a protocol to characterize the exhaled VOCs in real time by using secondary nanoelectrospray ionization coupled to high resolution mass spectrometry (Sec-nanoESI-HRMS). The homemade Sec-nanoESI source was readily set up based on a commercial nanoESI source. Hundreds of peaks were observed in the background-subtracted mass spectra of exhaled breath, and the mass accuracy values are -4.0-13.5 ppm and -20.3-1.3 ppm in the positive and negative ion detection modes, respectively. The peaks were assigned with accurate elemental composition according to the accurate mass and isotopic pattern. Less than 30 s is used for one exhalation measurement, and it takes approximately 7 min for six replicated measurements.

A protocol for characterizing chemical composition of exhaled breath in real time by using secondary nanoelectrospray ionization coupled to high resolution mass spectrometry is demonstrated.

고 분해능 질량 분석을 결합 하는 보조 Nanoelectrospray 이온화를 사용 하 여 실시간 호흡 분석

Exhaled volatile organic compounds (VOCs) have aroused considerable interest, since they can serve as biomarkers for disease diagnosis and environmental ...

Synthesis and Mass Spectrometry Analysis of Oligo-peptoids

Peptoids are sequence-controlled peptide-mimicking oligomers consisting of N-alkylated glycine units. Among many potential applications, peptoids have been thought of as a type of molecular information storage. Mass spectrometry analysis has been considered the method of choice for sequencing peptoids. Peptoids can be synthesized via solid phase chemistry using a repeating two-step reaction cycle. Here we present a method to manually synthesize oligo-peptoids and to analyze the sequence of the peptoids using tandem mass spectrometry (MS/MS) techniques. The sample peptoid is a nonamer consisting of alternating N-(2-methyloxyethyl)glycine (Nme) and N-(2-phenylethyl)glycine (Npe), as well as an N-(2-aminoethyl)glycine (Nae) at the N-terminus. The sequence formula of the peptoid is Ac-Nae-(Npe-Nme)4-NH2, where Ac is the acetyl group. The synthesis takes place in a commercially available solid-phase reaction vessel. The rink amide resin is used as the solid support to yield the peptoid with an amide group at the C-terminus. The resulting peptoid product is subjected to sequence analysis using a triple-quadrupole mass spectrometer coupled to an electrospray ionization source. The MS/MS measurement produces a spectrum of fragment ions resulting from the dissociation of charged peptoid. The fragment ions are sorted out based on the values of their mass-to-charge ratio (m/z). The m/z values of the fragment ions are compared against the nominal masses of theoretically predicted fragment ions, according to the scheme of peptoid fragmentation. The analysis generates a fragmentation pattern of the charged peptoid. The fragmentation pattern is correlated to the monomer sequence of the neutral peptoid. In this regard, MS analysis reads out the sequence information of the peptoids.

A protocol is described for the manual synthesis of oligo-peptoids followed by sequence analysis by mass spectrometry.

합성 및 올리고 peptoids의 질량 분석 분석

Peptoids are sequence-controlled peptide-mimicking oligomers consisting of N-alkylated glycine units. Among many potential applications, peptoids have ...

Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometry

There are many techniques that can be employed in the characterization of synthetic homopolymers, but few provide as useful of information for end group analysis as matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). This tutorial demonstrates methods for optimization of the sample preparation, spectral acquisition, and data analysis of synthetic polymers using MALDI-TOF MS. Critical parameters during sample preparation include the selection of the matrix, identification of an appropriate cationization salt, and tuning the relative proportions of the matrix, cation, and analyte. The acquisition parameters, such as mode (linear or reflector), polarization (positive or negative), acceleration voltage, and delay time, are also important. Given some knowledge of the chemistry involved to synthesize the polymer and optimizing both the data acquisition parameters and the sample preparation conditions, spectra should be obtained with sufficient resolution and mass accuracy to enable the unambiguous determination of the end groups of most homopolymers (masses below 10,000) in addition to the repeat unit mass and the overall molecular weight distribution. Though demonstrated on a limited set of polymers, these general techniques are applicable to a much wider range of synthetic polymers for determining mass distributions, though end group determination is only possible for homopolymers with narrow dispersity.

Characterization of Synthetic Polymers via Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight MALDI-TOF Mass Spectrometry

A protocol for the matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) characterization of synthetic polymers is described including the optimization of sample preparation, spectral acquisition, and data analysis.

매트릭스를 통해 합성 고분자의 특성화 지원 레이저 탈 착 이온화 시간의 비행 (TOF MALDI) 질량 분석

There are many techniques that can be employed in the characterization of synthetic homopolymers, but few provide as useful of information for end group ...

Analyzing Protein Architectures and Protein-Ligand Complexes by Integrative Structural Mass Spectrometry

Proteins are an important class of biological macromolecules that play many key roles in cellular functions including gene expression, catalyzing metabolic reactions, DNA repair and replication. Therefore, a detailed understanding of these processes provides critical information on how cells function. Integrative structural MS methods offer structural and dynamical information on protein complex assembly, complex connectivity, subunit stoichiometry, protein oligomerization and ligand binding. Recent advances in integrative structural MS have allowed for the characterization of challenging biological systems including large DNA binding proteins and membrane proteins. This protocol describes how to integrate diverse MS data such as native MS and ion mobility-mass spectrometry (IM-MS) with molecular dynamics simulations to gain insights into a helicase-nuclease DNA repair protein complex. The resulting approach provides a framework for detailed studies of ligand binding to other protein complexes involved in important biological processes.

Mass spectrometry (MS) has emerged as an important tool for the investigation of structure and dynamics of macromolecular assemblies. Here, we integrate MS-based approaches to interrogate protein complex formation and ligand binding.

단백질 구조와 통합 구조 질량 분석, 단백질-리간드 단지 분석

Proteins are an important class of biological macromolecules that play many key roles in cellular functions including gene expression, catalyzing ...

The Effect of Anodization Parameters on the Aluminum Oxide Dielectric Layer of Thin-Film Transistors

Aluminum-oxide (Al2O3) is a low cost, easily processable and high dielectric constant insulating material that is particularly appropriate for use as the dielectric layer of thin-film transistors (TFTs). Growth of aluminum-oxide layers from anodization of metallic aluminum films is greatly advantageous when compared to sophisticated processes such as atomic layer deposition (ALD) or deposition methods that demand relatively high temperatures (above 300 &#176;C) such as aqueous combustion or spray-pyrolysis. However, the electrical properties of the transistors are highly dependent on the presence of defects and localized states at the semiconductor/dielectric interface, which are strongly affected by the manufacturing parameters of the anodized dielectric layer. To determine how several fabrication parameters influence the device performance without performing all possible combination of factors, we used a reduced factorial analysis based on a Plackett-Burman design of experiments (DOE). The choice of this DOE permits the use of only 12 experimental runs of combinations of factors (instead of all 256 possibilities) to obtain the optimized device performance. The ranking of the factors by the effect on device responses such as the TFT mobility is possible by applying analysis of variance (ANOVA) to the obtained results.

Anodization parameters for growth of the aluminum-oxide dielectric layer of zinc-oxide thin-film transistors (TFTs) are varied to determine the effects on the electrical parameter responses. Analysis of variance (ANOVA) is applied to a Plackett-Burman design of experiments (DOE) to determine the manufacturing conditions that result in optimized device performance.

박막 트랜지스터의 알루미늄 산화물 유전체 층에 대한 양극 산화 매개변수의 영향

Aluminum-oxide (Al2O3) is a low cost, easily processable and high dielectric constant insulating material that is particularly appropriate for use as the ...

Fabrication of Thin Film Silver/Silver Chloride Electrodes with Finely Controlled Single Layer Silver Chloride

This paper aims to present a protocol to form smooth and well-controlled films of silver/silver chloride (Ag/AgCl) with designated coverage on top of thin film silver electrodes. Thin film silver electrodes sized 80 &#181;m x 80 &#181;m and 160 &#181;m x 160 &#181;m were sputtered on quartz wafers with a chromium/gold (Cr/Au) layer for adhesion. After passivation, polishing and cathodic cleaning processes, the electrodes underwent galvanostatic oxidation with consideration of Faraday&#39;s Law of Electrolysis to form smooth layers of AgCl with a designated degree of coverage on top of the silver electrode. This protocol is validated by inspection of scanning electron microscope (SEM) images of the surface of the fabricated Ag/AgCl thin film electrodes, which highlights the functionality and performance of the protocol. Sub-optimally fabricated electrodes are fabricated as well for comparison. This protocol can be widely used to fabricate Ag/AgCl electrodes with specific impedance requirements (e.g., probing electrodes for impedance sensing applications like impedance flow cytometry and interdigitated electrode arrays).

This paper aims to present a method to form smooth and well-controlled films of silver chloride (AgCl) with designated coverage on top of thin film silver electrodes.

정밀하게 제어된 단일 층 실버 염화물필름 의 박막 실버/실버 염화물 전극 제조

This paper aims to present a protocol to form smooth and well-controlled films of silver/silver chloride (Ag/AgCl) with designated coverage on top of thin ...