Name: a push-pull protocol to reduce colonization of bird nest boxes by honey bees
Uploaded: 2016-09-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees at JoVE.com

Our study was conducted with the permission of United States Sugar Corporation. We want to thank R. Raid, S. Raid and T. Lang for their assistant. We also M. Stanback and three anonymous reviewers for suggestions that improved this manuscript.

떼 트랩 상자 1. 건설 참고 : 1.1 및 1.2 단계로 떼 트랩 건설을위한 두 개의 대체 프로토콜이있다가 포함되어 있습니다. 트랩 상자를 구성 할 수있는 몇 가지 추가 가지 방법이 있습니다. 우리가 실험을 테스트 한 그들이 성공했기 때문에 다음과 같은 두 가지 방법이 여기에 표시됩니다. 두 프로토콜의 2 cm 두께의 비 압력 처리 된 합판 1.3 cm를 사용합니다. <ol><li> 떼 트랩 프로토콜 옵션 1의 건축 : 트랩 상자 만들기 <ol><li> 합판 30 cm의의 X 30 cm의 여섯 조각을 잘라. </li><li> 못이나 나사와 함께 상자의 네면을 연결합니다. </li><li> 못이나 나사에 의해 바닥 부분을 연결합니다. </li><li> 나사 또는 스테이플 상단 부분을 연결합니다. <ol><li> 상단을 확보하기 위해 손톱을 사용하지 마십시오. 정상은 꿀벌을 얻고있는 상자를 청소 제거해야합니다. </li></ol></li><li> 2.5 cm 아래쪽 가장자리에서 트랩 박스의 얼굴의 중앙에 2.5 cm의 구멍을 드릴. </li><li> ,의 프라이머를 적용ealant 또는 기상에서 목재를 보호하는 트랩 상자의 외부에 페인트. <ol><li> 트랩 상자의 내부에 어떤 페인트 또는 밀봉 제를 적용하지 마십시오. 이것은 방수제 또는 꿀벌에 독성이 될 수있다. </li></ol></li></ol></li><li> 사용 표준 깊은 하이브 몸의 2 떼 트랩 박스 프로토콜 옵션의 건설 <ol><li> 로컬 꿀벌 공급 상점에서 표준 10 프레임 깊은 하이브 몸을 얻습니다. </li><li> 폭 41.3 cm 각 측정 50.8 cm 긴 합판에서 상단과 하단을 잘라. </li><li> 못이나 나사에 의해 바닥 부분을 연결합니다. </li><li> 나사 또는 스테이플 상단 부분을 연결합니다. <ol><li> 상단을 확보하기 위해 손톱을 사용하지 마십시오. 정상은 꿀벌을 얻고있는 상자를 청소 제거해야합니다. </li></ol></li><li> 2.5 cm 하단 가장자리로부터 트랩 박스의 일측에 중간에 2.5 cm의 구멍을 뚫는다. </li><li> 날씨로부터 나무를 보호하기 위해 트랩 상자의 외부에 프라이머, 밀봉 제, 또는 페인트를 적용합니다. <ol><li> 받는 어떤 페인트 또는 밀봉 제를 적용하지 마십시오트랩 상자의 내부. 이것은 방수제 또는 꿀벌에 독성이 될 수있다. </li></ol></li></ol></li></ol> 페로몬 미끼 2. 준비 <ol><li> 2 : 1 비율 시트 랄와 라니의 혼합물을 준비합니다. </li><li> 스냅 최고 1.5 ml의 폴리 프로필렌 microcentrifugation 튜브에이 혼합물 1 ㎖를 놓습니다. </li><li> 빛으로부터 그들을 보호하기 위해 알루미늄 호일에 미끼를 감싸. 참고 : 원심 분리 튜브의 캡은 푸시 핀 천공이 장착 떼 트랩에 배치 될 때. 주 : 미끼 (A)에 RT에서 어두운 곳에 저장 이상 동안 저장 될 수 -10 ° C에 냉동 장치. </li></ol> 떼 트랩 상자 3. 설치 참고 : 단계 3.1 및 3.2에 제시 떼 트랩 상자의 설치를위한 두 개의 다른 프로토콜이 있습니다. <ol><li> 포스트에 설치 : 스웜 트랩 박스 프로토콜 옵션 1의 설치 <ol><li> 지상에 10cm 압력 처리 된 나무 울타리 게시물에 의해 10cm를 놓고 10m에새 둥지 상자가있는 곳에서 15m. </li><li> 20cm 20 cm를 측정 1.3 cm 두께의 압력 처리 된 나무에 매달려 보드를 구축합니다. </li><li> 상자의 상단 위 10cm로, 트랩 상자의 일 측면의 중간에 매달려 기판 정렬. 보드의 양쪽에 두 개 이상의 못이나 나사를 사용하여 상자에 보드를 고정합니다. </li><li> 트랩 상자가 꿀벌에 의해 식민지 때 안전하고 제거가 용이 한 높이 (1.5 m m 3)에서 게시물에 트랩 상자를 놓습니다. 매달려 보드를 부착하여 포스트에있는 상자를 조입니다. 약 5cm 매달려 보드의 맨 아래에 나사를 놓고 자리에 나사. <ol><li> 그들은 제거하기 어려운 있기 때문에 손톱을 사용하지 마십시오. </li></ol></li></ol></li><li> 나무에 설치 : 스웜 트랩 박스 프로토콜 옵션 2의 설치 <ol><li> 상자의 각면의 상단 뒤쪽 모서리에 5mm의 구멍을 드릴. </li><li> 관통 구멍에 와이어 스레드. 참고 :이 프로토콜을 사용하는 경우가 EASI 될 것입니다ER 박스의 상단을 고정하기에 앞서 구멍을 통해 배선을 넣어. </li><li> 새 둥지 상자의 위치에서 약 10 m 15 m 거리에 나무를 선택합니다. <ol><li> 사람이 조류 상자의 상태를 확인할 때, 꿀벌에 의해 식민지 트랩 상자 방어가 될 꿀벌의 원인이 방해 될 수 있기 때문에 새 박스와 같은 나무에서 트랩 상자를 올려 놓지 마십시오. </li></ol></li><li> 나무 주위 1.5 m지면에서 m 3에 와이어를 고정합니다. 주 : 나무를 보호하기 위해, 형성층 보호기 와이어 주위에 사용할 수 있습니다. <ol><li> 이 전복되지 않도록 확인 상자가 수준과 안전합니다. 상자는 가능한 경우 추가 안정성을위한 나무 가지에 휴식 할 수 있습니다. </li></ol></li></ol></li></ol> 페로몬 미끼 4. 추가 <ol><li> 섹션 2에서 이전에 준비 유혹을 가지고 푸시 핀 튜브의 상단에 구멍. </li><li> 이달 후 입구 근처 바닥에 트랩 상자 안에 미끼를 배치박스를 설치하는 동안 그것을 보장하기 위해 allation은 떨어지지 않습니다. </li></ol> 퍼메트린에 새 둥지 상자 5. 치료 <ol><li> 유일한 조류 가금류에 사용하기 위해 표시 또는 갇힌 된 퍼메트린 제품을 선택합니다. </li><li> 혼합 응용 프로그램에 대한 라벨의 지시에 따라 주의 : 라벨의 권고에 개인 보호 지침을 따르십시오. </li><li> 상기 액체는 3.7 L 핸드 펌프 분무기를 사용하여 박스의 측면을 실행하는 시점까지 완전히 새집의 내측 스프레이. 참고 : 둥지 상자는 전 또는 설치 후 처리 될 수있다. </li></ol> 꿀 꿀벌에 의해 점유 트랩 상자 6. 제거 <ol><li> 작은 수건 입구 구멍을 연결합니다. 주의 : 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. <ol><li> 무리가 사망 할 경우, 너무 빨리 발견과 같이하십시오. 무리가 이용 될 경우, 유 (꿀벌이 완전히 제거하기 전에 트랩 상자에 정착 할 수 있도록sually 약 2 주). 가능하면 (모든 꿀벌 내부에있는 경우), 밤에 점령 트랩 상자를 제거합니다. 트랩 입구는 밤에 연결할 수있는 다음 상자는 일광에 다음 아침을 제거. 참고 : 밤에 꿀벌 주위에 작업 할 때 빨간색 필터링 된 빛을 사용합니다. </li></ol></li><li> 포스트에서 상자를 풀고 또는 나무로 상자를 들고 와이어를 잘라. </li><li> (거리에 최소 4 킬로미터) 새로운 위치에있는 상자를 이동하고 입구 구멍으로부터 수건을 잡아 당깁니다. </li></ol> 트랩 상자에서 꿀벌 식민지 7. 파괴 참고 : 아프리칸 꿀벌을 유지하기 위해 불법 지역에서는 식민지의 파괴는 보증 할 수있다. 그렇다면,이 프로토콜은 여기에 표시됩니다. <ol><li> 식민지를 Solarizing <ol><li> 작은 수건 입구 구멍을 연결합니다. 주의 : 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. </li><li> 포스트에서 상자를 풀고 또는 나무로 상자를 들고 와이어를 잘라. </li><li> Enclo그 자체로는 비닐 봉투에 완전히 트랩 상자를 밀봉하고 며칠 동안 모든 일에서 떠나 주의 : 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. </li><li> 죽은 꿀벌과 빗를 제거하여 상자를 청소합니다. </li></ol></li><li> 살충제 스프레이의 사용 <ol><li> 트랩 상자 안에 스프레이 꿀벌을 죽일 사용을위한 표시 살충제 스프레이를 사용합니다. 주의 : 살충제에 라벨 지침에 따라 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 개인 보호 장비를 사용합니다. </li><li> 입구를 연결하고 24 시간 동안 상자를 둡니다. </li><li> 죽은 꿀벌과 빗를 제거하여 상자를 청소합니다. 주 : 살충제 잔류를 제거하는 트랩 박스가 비눗물 내부를 청소 재사용. 잘 헹구고 다시 설치하기 전에 완전히 건조 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 살충제 발포체 사용 <ol><li> 세제 기반 거품 점유 트랩의 전체 공동을 입력합니다. (주의 : insec에 라벨 지침을 따르ticide 및 적절한 개인 보호 장비를 사용하고) 꿀벌의 독침을 방지하기 위해 적절한 보호 복을 착용하십시오. 참고 : 거품이 상업 해충 제어 거품 발생기 또는 압축 공기 소화기으로 적용 할 수 있습니다. 참고 : 소화기를 사용하는 경우 : 장소를 물 3.8 L를 9.5 L 소화기에, 소화기를 밀봉 에이전트 (또는 식기 세척 세제)를 발포 190 mL를 넣어 / 평방 100-125 파운드에 압력을. 인치 (PSI). 사용 격렬하게 교반하고, 트랩이 넘쳐 때까지 다음 폼을 적용 직전. 참고 : 폼은 spiracles를 입력하고기도를 차단하여 60 초 내에 꿀벌을 죽인다. </li><li> 입구를 연결하고 24 시간 동안 상자를 둡니다. </li><li> 죽은 꿀벌과 빗를 제거하여 상자를 청소합니다. 주 : 살충제 잔류를 제거하는 트랩 박스가 비눗물 내부를 청소 재사용. 잘 헹구고 다시 설치하기 전에 완전히 건조 할 수 있습니다. &lt;/ 리&gt; </ol></li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

매우 성공적인 침입 곤충 (17), AHB는 범위에 걸쳐 공동-중첩 조류의 주요 경쟁자를 구성한다. 여기에 제시된 프로토콜은 AHB에 의해 새 둥지 상자의 식민지 속도를 줄일 수 있도록 설계되어있다. 이 디자인의 주요 구성 요소는 1) 방수제 및 조류 안전한 살충제, 퍼 메스 린의 사용을 포함한다; 2) 꿀벌에 대한 대체 중첩 사이트의 제공; 3) 트랩 상자 내부의 유인 페로몬의 사용. 새 둥지 사이트 <...

1957 1 상 파울로, 브라질에 24 개 이상의 아프리카 꿀벌 여왕의 실수로 소개 된 이후,이 곤충은 (덜 잘 적응 유럽 꿀벌을 빼앗기 및 교체, 중남미에 걸쳐 최대 미국 남부로 확산 야만적 인 인구 EHB). 이러한 하이브리드 아프리칸 꿀벌 (AHB)는 인간과 야생 동물 모두 충돌에 넣어 특징을 가지고있다. 그들은 매우 방어적인 행동을 나타내는 매우 빠른 재생, 그들은 가정 1, 2를 만들 위치에 대한 덜 선택적입니다. 둥지 상자가 긴 공진기 스팅 조류 3,4-으로 사육을 향상 조류 학자가 사용되었지만, 이들의 사용은 열대 5,6- 위협에 처한 앵무새 사육 향상에 특히 효과적인 것으로 밝혀졌다. 불행하게도, 아프리칸 꿀벌들은이 같은 둥지 상자를 선택 - 때로는 탑승자 사망에스. 그들은 둥지 연구를 수행 할 때 또한 이러한 AHB는 생물 학자에 상당한 위협. AHB가 설립되어 남미 지역에서 여러 앵무새 보존 프로젝트는 AHB 7-10에 의해 점령 자신의 인공 둥지 상자를 보았다. 꿀벌 둥지 상자에 대한 경쟁은 널리 퍼져 앵무새에 국한되지 않습니다. 새와 올드 월드에서 모두 다른 많은 조류 종은 11 ~ 15을 영향을받습니다. 이러한 침략 AHB의 위협을 완화하기위한 노력없이, 앵무새 보전의 최근 성공이 손실 될 수 있습니다. 꿀벌에서 경쟁을 관리하는 현재의 관행은 즉시 시즌 8, 둥지 상자 (15)의 외측에 화학 물질의 응용 프로그램을 사육 한 후, 수동으로 떼를 제거, 7 퍼메트린 둥지 입구를 폐쇄의 반복, 고용량의 사용을 포함한다. 노동 참여하고 생물 학자에 위험이 적은 최적의보다 이러한 전략을 렌더링합니다. 방지시의 개발n 개의 프로토콜을 보증합니다. 꿀 꿀벌 식민지 이전 여왕이 일벌 (16)의 최대 사분의 삼과 식민지 잎들이 득시글 거리는,로 알려진 과정을 통해 곱합니다. 아프리칸 꿀벌의 높은 생식 률은 그들이 더 자주 17 (일년에 한 번 또는 두 번 떼) EHB 이상 (연간 4 ~ 8 번) 떼 할 수 있습니다. 또한, AHB는 일년 내내보다는 EHB 같은 특정 시즌 떼 수 있습니다. 따라서, AHB 빠르게 소정 영역에 적합 중첩 부위의 대부분을 차지하고있다. 꿀 꿀벌 집 사냥 동작은 둥지 사이트의 자신의 선택에 영향을하는데 이용 될 수있다. 떼에서 꿀벌의 작은 부분을 찾아 새로운 가능성 둥지 사이트를 검사 날아. 몇 가지 잠재적 인 둥지 사이트를 동시에 대한 정찰하고 있습니다. 이 스카우트 꿀벌 떼로 돌아가서 사이트의 위치를​​ 나타 내기 위해 춤을 수행합니다. SCO의 강한 춤이 사이트이며, 빠른 번호유타 꿀벌은 해당 사이트 (18)에 축적. 따라서, 꿀벌 평범한 또는 가난한 사이트에 비해, 더 나은 품질의 사이트에 대한 강한 춤. 정족수 임계 값에 도달하면, 떼를 벗고 새로운 선택 홈 사이트 (18)로 운항하는 항공사. 살충제 퍼 메스 린의 하위 치명적인 연락처 복용 방향 및 활동 수준 (19, 20)을 줄이기 위해 스카우트 꿀벌의 능력을 방해. 처음 둥지 상자 안에 퍼 메스 린의 응용 프로그램은 화학 저하로 꿀벌 (21), 및 초과 근무를 스카우트 방수제되어야 박스의 자신의 평가 기간 동안 퍼 메스 린에 노출 정찰 꿀벌, 양을 감소, 강한 채용 춤을 수행 덜 수 렌더링해야 의 정찰 벌은 사이트에 채용. 더 적당한 (아래에있는 이상적인 캐비티 용적 작은 입구 구멍 및 페로몬 유인) 다른 중첩 부위는 꿀벌 트랩 박스의 형태로 제공된다. 이 우수한 트랩 사이트는 빠른 정족수에 도달한다살충제 처리 된 조류 상자보다 조류 상자 위에 트랩 상자를 선택하는 무리를 선도. 예를 들어, 우리는 사우스 플로리다 사탕 수수 필드에 AHB에 의해 반 올빼미 인공 둥지 상자의 정착을 줄이기 위해 실험을 설명합니다. 우리의 목표는 페로몬 미끼를 떼 트랩을 향해 &quot;풀&quot;을 살충제로 처리 올빼미 둥지 상자에서 멀리 꿀벌을 &quot;밀어&quot;것이다 푸시 풀 방법을 사용의 효과를 테스트하는 것이 었습니다.

<table><tbody><tr><td>Citral (ACROS Organics)</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC11044-1000</td><td></td></tr><tr><td>Geraniol (ACROS Organics)</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC41090-1000</td><td></td></tr><tr><td>PermaCap CS</td><td>BASF</td><td></td><td>controlled release permethrin</td></tr></tbody></table>

a push-pull protocol to reduce colonization of bird nest boxes by honey bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

브라질에서 실시한 이전의 작은 파일럿 푸시 - 풀 연구는 떼 트랩이 효과적 보여 앵무새 둥지 상자 (22) 꿀벌 직업을 감소시켰다. 푸시 풀 방법은 AHB에 의해 새 둥지 상자의 식민지를 줄이기 위해 더 큰 규모에서 효과적 일 수 있는지 확인하기 위해, 우리는 남부 플로리다, 미국에서 사탕 수수 분야에서 현장 연구를 실시했다. 육십 반 올빼미 둥지 상자를 설치하고, ?...

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A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

침략 아프리칸 꿀벌에 의해 새 둥지 상자의 식민지를 방지하는 것은 둥지 현장 제한 조류의 보존 노력 중요하다. 우리는이 &quot;푸시&quot;꿀벌 거리에 둥지 상자에서 방수제 살충제, 퍼메트린과 통합 해충 관리 접근 방식을 제공하고, 페로몬 미끼를 떼 트랩을 향해을 &quot;풀&quot;.

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Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

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Research

JoVE Journal

Environment

8.6K 조회수.  University of Florida.  침략 아프리칸 꿀벌에 의해 새 둥지 상자의 식민지를 방지하는 것은 둥지 현장 제한 조류의 보존 노력 중요하다. 우리는이 "푸시"꿀벌 거리에 둥지 상자에서 방수제 살충제, 퍼메트린과 통합 해충 관리 접근 방식을 제공하고, 페로몬 미끼를 떼 트랩을 향해을 "풀". 

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Empirical, Metagenomic, and Computational Techniques Illuminate the Mechanisms by which Fungicides Compromise Bee Health

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered &#34;bee-safe,&#34; there is mounting evidence that fungicide residues in pollen are associated with bee declines (for both honey and bumble bee species). While the mechanisms remain relatively unknown, researchers have speculated that bee-microbe symbioses are involved. Microbes play a pivotal role in the preservation and/or processing of pollen, which serves as nutrition for larval bees. By altering the microbial community, it is likely that fungicides disrupt these microbe-mediated services, and thereby compromise bee health. This manuscript describes the protocols used to investigate the indirect mechanism(s) by which fungicides may be causing colony decline. Cage experiments exposing bees to fungicide-treated flowers have already provided the first evidence that fungicides cause profound colony losses in a native bumble bee (Bombus impatiens). Using field-relevant doses of fungicides, a series of experiments have been developed to provide a finer description of microbial community dynamics of fungicide-exposed pollen. Shifts in the structural composition of fungal and bacterial assemblages within the pollen microbiome are investigated by next-generation sequencing and metagenomic analysis. Experiments developed herein have been designed to provide a mechanistic understanding of how fungicides affect the microbiome of pollen-provisions. Ultimately, these findings should shed light on the indirect pathway through which fungicides may be causing colony declines.

Microbial consortia within bumble bee hives enrich and preserve pollen for bee larvae. Using next generation sequencing, along with laboratory and field-based experiments, this manuscript describes protocols used to test the hypothesis that fungicide residues alter the pollen microbiome, and colony demographics, ultimately leading to colony loss.

실험, Metagenomic, 및 계산 기법 밝히는 어떤 균 타협 꿀벌 건강 메커니즘

Growers often use fungicide sprays during bloom to protect crops against disease, which exposes bees to fungicide residues. Although considered ...

연구

환경과학

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

식민지 수준에 개인에서 꿀 꿀벌 개발에 대한 환경 화학 물질의 효과를 평가

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey bee colony numbers have been declining in the United States and many European countries since 1947. A number of factors play a role in this decline, including the unintentional exposure of honey bees to pesticides. The development of new methods and regulations are warranted to reduce pesticide exposures to these pollinators. One approach is the use of repellent chemistries that deter honey bees from a recently pesticide-treated crop. Here, we describe a protocol to discern the deterrence of honey bees exposed to select repellent chemistries. Honey bee foragers are collected and starved overnight in an incubator 15 h prior to testing. Individual honey bees are placed into Petri dishes that have either a sugar-agarose cube (control treatment) or sugar-agarose-compound cube (repellent treatment) placed into the middle of the dish. The Petri dish serves as the arena that is placed under a camera in a light box to record the honey bee locomotor activities using video tracking software. A total of 8 control and 8 repellent treatments were analyzed for a 10 min period with each treatment was duplicated with new honey bees. Here, we demonstrate that honey bees are deterred from the sugar-agarose cubes with a compound treatment whereas honey bees are attracted to the sugar-agarose cubes without an added compound.

The loss of honey bee colonies presents a challenge to crop pollination services. Current pollinator protection practices warrant an alternative approach to minimize the contact of honey bees to harmful pesticides using repellent chemistries. Here, we provide detailed methods for a visual tracking protocol to screen deterrents for bees.

꿀벌을위한 억제 성 화학 물질을 차단하는 비디오 추적 프로토콜

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

코 확장 응답 곤충의 행동 소성을 조사하기위한 프로토콜 : 기본, 바이오 메디컬에 응용 프로그램, 및 농업 연구

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

신경과학

Preparation of Single-cohort Colonies and Hormone Treatment of Worker Honeybees to Analyze Physiology Associated with Role and/or Endocrine System

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related division of labor). Young workers are engaged in nursing the brood (nurse bees), while older workers are engaged in foraging for nectar and pollen (foragers). The physiology of the workers changes in association with this role shift. For example, the main function of the hypopharyngeal glands (HPGs) changes from the secretion of major royal jelly proteins (MRJPs) to the secretion of carbohydrate-metabolizing enzymes. Because worker tasks change as the workers age in typical colonies, it is difficult to discriminate the physiological changes that occur with aging from those that occur with the role shift. To study the physiological changes in worker tissues, including the HPGs, in association with the role shift, it would be useful to manipulate the honeybee colony population by preparing single-cohort colonies in which workers of almost the same age perform different tasks. Here we describe a detailed protocol for preparing single-cohort colonies for this analysis. Six to eight days after single-cohort colony preparation, precocious foragers that perform foraging tasks earlier than usual appear in the colony. Representative results indicated role-associated changes in HPG gene expression, suggesting role-associated HPG function. In addition to manipulating the colony population, analysis of the endocrine system is important for investigating role-associated physiology. Here, we also describe a detailed protocol for treating workers with 20-hydroxyecdysone (20E), an active form of ecdysone, and methoprene, a juvenile hormone analogue. The survival rate of treated bees was sufficient to examine gene expression in the HPGs. Gene expression changes were observed in response to 20E- and/or methoprene-treatment, suggesting that hormone treatments induce physiological changes of the HPGs. The protocol for hormone treatment described here is appropriate for examining hormonal effects on worker physiology.

Here we describe our detailed protocol for the preparation of single-cohort honeybee colonies&#160;&#8211; a useful tool for analyzing the role-associated worker physiology. We also describe detailed protocols for treating workers with juvenile hormone and ecdysone to evaluate the involvement of these hormones in the regulation of worker behavior and/or physiology.

단일 코호트 식민지와 노동자 꿀벌의 호르몬 치료의 준비 역할 및 / 또는 내분비 시스템과 생리학 관련 분석하기

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related ...

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize and to study. Therefore, bees have long been a favored model amongst neurobiologists and neuroethologists for studying the neural basis of social and natural behavior. It is important, however, that the experimental techniques used to study bees do not interfere with the behaviors being studied. Because of this, it has been necessary to develop a range of techniques for pharmacological manipulation of honey bees. In this paper we demonstrate methods for treating restrained or free-flying honey bees with a wide range of pharmacological agents. These include both noninvasive methods such as oral and topical treatments, as well as more invasive methods that allow for precise drug delivery in either systemic or localized fashion. Finally, we discuss the advantages and disadvantages of each method and&#160;describe common hurdles and how to best overcome them. We conclude with a discussion on the importance of adapting the experimental method to the biological questions rather than the other way around.

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

This manuscript describes several protocols for administering pharmacological agents to honey bees, including simple noninvasive methods for free-flying bees, as well as more invasive variants that allow precise localized treatment of restrained bees.

절제된 자유 비행 꿀 꿀벌의 Neuropharmacological 조작,<em&gt; API를 mellifera이</em

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize ...

Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment methods. Here we describe methods to measure the quantities of adult bees, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, by photographing frames, and by installing hives on scales and with internal sensors. Data from these periodic evaluations are then combined with running average and daily detrended data on hive weight and internal hive temperature. The resulting datasets have been used to detect colony-level effects of imidacloprid applied in a sugar syrup as low as 5 parts per billion. The methods are objective, require little training, and provide permanent records in the form of sensor output and photographs.

Sublethal doses of pesticides may affect colonies in ways that are difficult to detect using only periodic or visual methods. Methods to measure total adult bee mass, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, photographing frames, and installing sensors, are provided. Data analysis is also addressed.

꿀 꿀벌에 Sublethal 농약 노출의 식민지 수준 효과 모니터링

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment ...

생물학

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee (Bombus) Hive Entrances

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis. This has traditionally been done by netting foragers at nest entrances or on flowers, chilling the bees on ice, and then removing the pollen loads from the corbiculae with forceps or a brush. This method is time and labor intensive, may alter normal foraging behavior, and can result in stinging incidents for the worker performing the task. Pollen traps, such as those used on honey bee hives, collect pollen by dislodging corbicular pollen loads from the legs of workers as they pass through screens at the nest entrance. Traps can remove a large quantity of pollen from returning forager bees with minimal labor, yet to date no such trap is available for use with bumble bee colonies. Workers within a bumble bee colony can vary in size making size selection of entrances difficult to adapt this mechanism to commercially reared bumble bee hives. Using 3D printing design programs, we created a pollen trap that successfully removes the corbicular pollen loads from the legs of returning bumble bee foragers. This method significantly reduces the amount of time required by researchers to collect pollen from bumble bee foragers returning to the colony. We present the design, results of pollen removal efficiency tests, and suggest areas of modifications for investigators to adapt traps to a variety of bumble bee species or nest box designs.

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

We present a non-lethal and automated mechanism to collect pollen from bumble bee (Bombus) workers returning to a hive. Instructions for producing, preparing, installing and using the devices are included. By using 3D-printed objects, modification to the design was timely, efficient and allowed for quick turnaround for testing.

범블 비(봄푸스)하이브 입구를위한 3D 인쇄 꽃가루 트랩

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis.  ...

Collection and Identification of Pollen from Honey Bee Colonies

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate pesticide exposure of bees via pollen. Described herein is an effective pollen-trapping method for collecting corbicular pollen from honey bees returning to their hives. This collection method results in large quantities of corbicular pollen that can be used for research purposes. Honey bees collect pollen from many plant species, but typically visit one species during each collection trip. Therefore, each corbicular pollen pellet predominantly represents one plant species, and each pollen pellet can be described by color. This allows the sorting of samples of corbicular pollen by color to segregate plant sources. Researchers can further classify corbicular pollen by analyzing the morphology of acetolyzed pollen grains for taxonomic identification. These methods are commonly used in studies related to pollinators such as pollination efficiency, pollinator foraging dynamics, diet quality, and diversity. Detailed methodologies are presented for collecting corbicular pollen using pollen traps, sorting pollen by color, and acetolyzing pollen grains. Also presented are results pertaining to the frequency of pellet colors and taxa of corbicular pollen collected from honey bees in five different cropping systems.

We describe methods for collecting corbicular pollen from honey bees as well as protocols for color sorting, acetolysis, and microscope slide preparation of pollen for taxonomic identification. In addition, we present pellet color and taxonomic diversity of corbicular pollen collected from five cropping systems using pollen traps.

꿀벌 식민지에서 꽃가루의 수집 및 식별

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate ...

Assessing Agrochemical Risk to Mated Honey Bee Queens

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not accurately capture the effects of agrochemical exposure on honey bee queens. As the sole producer of fertilized eggs inside a honeybee colony, the queen is arguably the most important single member of a functioning colony unit. Therefore, understanding how agrochemicals affect queen health and productivity should be considered a critical aspect of pesticide risk assessment. Here, an adapted method is presented to expose honey bee queens and worker queen attendants to agrochemical stressors administered through a worker diet, followed by tracking egg production in the laboratory and assessing first instar eclosion using a specialized cage, referred to as a Queen Monitoring Cage. To illustrate the method&#39;s intended use, results of an experiment in which worker queen attendants were fed diet containing sublethal doses of imidacloprid and effects on queens were monitored are described.

This protocol was developed to enhance the understanding of how agrochemicals affect honey bee (Apis mellifera) reproduction by establishing methods to expose honey bee queens and their worker caretakers to agrochemicals in a controlled, laboratory setting and carefully monitoring their relevant responses.

꿀벌 여왕을 짝짓기하는 농약적 위험 평가

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not ...