This work was supported in part by the Center for Integration of Medicine and Innovative Technology (CIMIT) under the U.S. Army Medical Research Acquisition Activity Cooperative Agreement (CIMIT No. 14-1894 to TD) and the National Institutes of Health (1R21AI109172 to TD). YW was supported by an ASLMS Student Research Grant (BS.S02.15). We are grateful to Tayyaba Hasan, PhD at the Wellman Center for her co-mentorship for YW.

세균성 문화 1. 준비 <ol><li> 뇌 심장 주입 (BHI) 50 mL의 원심 분리기 튜브에 매체의 7.5 ML을 추가합니다. 종자 A. baumannii가 상기 BHI 배지에서 세포 후 18 시간 동안 오비탈 인큐베이터 (37 ° C)의 A. baumannii에 문화를 배양. </li><li> 5 분 동안 3,500 × g에서 세포의 배양 상등액을 원심 분리기를 제거하고 인산 완충 식염수 (PBS)로 펠렛을 세척 하였다. </li><li> 신선한 PBS의 세균 펠렛을 다시 중단하고 철저하게 정지를 피펫. </li><li> 세균 현탁액 100 μL를 수집하고 신선한 PBS를 사용하여시 10 분 희석을합니다. </li><li> 1.5 mL의 반 마이크로 큐벳에 희석을 전송하고 600 nm의 OD (600 ㎚)의 파장에서의 광학 밀도 (OD)를 측정한다. </li><li> 희석의 측정 된 OD 600 nm의 값 및 상기 희석 계수 (10)에있어서 원래 PBS (원액) 현탁액의 OD 600 nm의 계산. </li><li> 일을 조정PBS에 현탁 전자 원은 600 나노 = (108 CFU / ㎖의 세포 농도에 해당) 0.6 중독한다. </li></ol> 발광 생물 A로 인한 굽기 감염 2. 마우스 모델. baumannii가 <ol><li> 사용 성인 여성 BALB / c 마우스 7-8주 세와 17-19g 무게. 생쥐 실험을 시작하기 전에 최소 3 일 동안 실험실 조건에 순응 할 수 있습니다. 21 ℃의 실온에서 12 시간 빛 / 어둠주기에서 쥐를 유지하고 그들에게 음식과 물을 자유로이을 제공합니다. </li><li> (- 20 밀리그램 / kg 100 밀리그램 / kg)을 케타민 - 자일 라진 칵테일을 복강 내 주사하여 마우스를 마취. 가볍게 면봉으로 각 마우스의 palpebra 접촉; 눈꺼풀 반사의 부재는 적절한 마취 깊이를 제안합니다. 마취 동안 건조에서 눈을 방지하기 위해 수의사 연고와 마우스 눈을 커버. </li><li> 5를 사용하여 가능한 한 피부를 노출 뒷면 생쥐 쉐이브0 블레이드 머리 깎기. </li><li> 상대적으로 수평 위치에 자신의 허리를 유지하기 위해 쥐의 복부 아래에 35mm 페트리 접시의 뚜껑을 놓습니다. </li><li> 250 ㎖의 비커 (전체 80 %)의 물을 끓여 10 &quot;X 10&quot;, 220 VAC 열판을 사용. 물과 열 평형에 도달 할 때까지 비이커 브라스 블록 (1cm X 1cm 단면)을 담근다. 열적 평형은 일반적으로 &lt;5 분 걸리며 비이커에서 물을 다시 비등에 의해 표시된다. </li><li> 레코딩 부상을 만들기 전에, 진통제 선제 진통제 (를 0.1 mg / kg 프레 노르 핀의 피하 주사) 투여. </li><li> 십분 선제 진통제 후, 부드럽게 화상 창상 유발 7 초 동안 마우스의 뒷면 면도 영역으로 가열 황동 블록을 누른다. 참고 : 굽기 절차를 수행 할 때 작업 인력에 열 손상을 방지하려면, 열 방지 장갑을 착용하십시오. </li><li> subcutaneou 통해 멸균 식염수 0.5ml의 관리의 주입은 탈수를 방지합니다. </li><li> 열 손상의 유도는 다음 5 분, 피펫을 이용하여 화상에 마우스 PBS에서 5 × 106 CFU를 함유하는 박테리아 현탁액 50 μL를 접종한다. 피부에 지그재그 운동 멸균 면봉으로 이동하여, 가능한 한 균등하게 연소 된 영역에서 균체를 분배하기 위해 화상에 분취 얼룩. </li><li> 4 절에 설명 된 세균 접종 후 즉시, 감염에 대한 생물 발광 화상 촬상을 수행한다. </li><li> 쥐가 마취로부터 완전히 회복 될 때까지 물을 가열 수술 침대 (37 ° C, 복구 영역)에 마우스를 놓는다. 하우스 바이오 안전성 레벨 2 동물 실에서 케이지 당 5의 최대 수와 마우스. </li><li> 레코딩 손상 후 3 일에 대한 회 진통제 (0.1 ㎎ / ㎏의 프레 노르 핀을 피하 주사) 투여. </li></ol> 를했다. &amp; # 3. 항균 블루 라이트 치료(160); 마우스의 baumannii의 감염 <ol><li> 세균 접종 후 24 시간에서 ABL 치료를 시작합니다. </li><li> ABL 조사에 대한 415 nm에서 발광 피크로 발광 다이오드 (LED)를 사용한다. ㄱ 방열판에 장착하는 LED 마우스 (18)의 조사 영역에서 열적 효과를 방지한다. 상기 LED가 상하로 이동하도록 클립 커넥터 광 지지봉에 고정 LED. </li><li> 전력 / 에너지 미터 켜고 415 nm의 파장을 선택하기 위해 버튼을 누른다. 백그라운드 (주위 광)을 뺀 전력 / 에너지 미터 재설정. </li><li> 바로 아래의 LED 전력 / 에너지 측정기를 놓는다. 푸른 빛 보호 고글을 착용 할 것. 광 스폿의 전체 ​​영역을 커버하도록 LED 라이트 켜고 LED 개구 (LED로부터의 광을 집광 렌즈) 및 전력 / 에너지 미터의 광 센서 (직경 2cm) 사이의 거리를 조정 광 센서. </li><li> 조심스럽게 튜닝 LED 드라이버와는 포웨의 값을 기록R / 에너지 미터. 판독에 의한 조도를 계산 : 사조 = 읽기 (W) / 면적 (cm 2). LED 드라이버를 조정하여 100 mW의 / cm2로 LED의 광도를 조정한다. </li><li> LED가 전원을 끄십시오. 발광 다이오드 개구 및 전력 / 에너지 미터의 광 센서 사이의 거리를 측정한다. </li><li> (- 20 밀리그램 / kg 100 밀리그램 / kg)을 케타민 - 자일 라진 칵테일을 복강 내 주사하여 마우스를 마취. 눈꺼풀 반사의 부재는 적절한 마취 깊이를 제안합니다. </li><li> 임의로 ABL 처리 군 (N = 10) 및 미처리 대조군 (N = 10)로 쥐를 나눈다. </li><li> 에이 비엘 처리 군의 경우, 광에 노출을 최소화하기 위해 알루미늄 호일로 마우스의 눈을 커버. 수평 위치에 자신의 허리를 유지하기 위해 마우스 복부 아래에 35 mm 페트리 접시의 뚜껑을 직접 LED에서 마우스 화상을 놓습니다. </li><li> 사각형 페트리 디에 마우스로 단계 3.5에서 언급 한 전력 / 에너지 미터를 교체쉬. 단계 바와 같이 LED 개구 마우스 화상의 표면 사이의 거리가 LED 조리개 전력 / 에너지 미터의 광 센서 (레벨 간의 동일하다 다시 위치로 마우스의 높이를 조정 3.5). </li><li> 100 mW의 / ㎠의 조사량에 감염된 화상을 조사한다. J / ㎠에 도달 할 때 (360)의 총 용량까지 72 J / ㎠의 투여 량으로 ABL을 제공 (예를 들면, 0, 72, 144, 216, 288, 360 J / cm 2). 제 4 절에서 설명하는 각 광 투여 후, 쥐에 대한 생물 발광 촬상을 수행한다. </li><li> 제 4 항에서 설명한 바와 같이 미처리 대조군의 경우, ABL 처리 군에 사용되는 것과 동일한 시간 간격을 이용하여 마우스 생체 발광 화상의 촬상을 수행한다. </li><li> 쥐의 복구 전에 열 손실과 저체온증을 방지하기 위해 물을 가열 수술 침대에 마우스를 놓습니다. 활동 및 복구 될 때까지 마우스의 눈꺼풀 반사를 관찰한다. 일 후쥐의 전자 복구, 그들에게 케이지 당 2-3 집. </li><li> 마우스에서 감염 시간 바이오 부담을 모니터링 격일 후 처음 3 일 동안 매일 4 장에서 설명한 바와 같이 ABL 및 치료 후, 생물 발광 촬상을 수행한다. </li></ol> 마우스의 감염 4. 생물 발광 영상 <ol><li> 이미지 강화 된 전하 결합 소자 카메라, 카메라 컨트롤러, 시료 챔버, 화상 처리부 (19)를 포함하는 낮은 광 이미징 시스템을 사용하여 마우스. </li><li> (- 20 밀리그램 / kg 100 밀리그램 / kg)을 케타민 - 자일 라진 칵테일을 복강 내 주사하여 마우스를 마취. 가볍게 면봉으로 마우스의 눈꺼풀을 만지지; 눈꺼풀 반사의 부재는 적절한 마취 깊이를 제안합니다. </li><li> 라이브 이미징 소프트웨어를 시작합니다. 표시되는 제어판에서 초기화를 클릭합니다. 온도 상자의 색을 나타내는 녹색으로 바뀔 때까지 기다리는 것이 무대의 온도시료 챔버에 37 ° C에 도달했다. </li><li> 직접 카메라하에 감염된 화상과 상기 촬상 시스템의 시료 챔버 내의 스테이지 (37 ° C)의 마우스를 놓는다. 참고 : 화상이 건조 될 때 세균의 생물 발광이 감소 할 수있다. 따라서, 이미징 전에 PBS와 마우스 화상을 보습하는 것이 좋습니다. </li><li> 제어판에서 다음에 체크 표시를 &quot;발광.&quot; 영상의 노출 시간이 생물 발광 강도를 기반으로 라이브 이미징 소프트웨어 최적화 될 수 있도록 &quot;자동 노출&quot;을 선택합니다. </li><li> 은 &quot;필드보기의&quot;드롭 다운 목록에서 &quot;C&quot;를 선택합니다. 소프트웨어가 초점 거리를 결정하게하는 &quot;스캔 중간 범위&quot;옵션을 선택합니다. 오버레이 옆에 선택 표시를 넣습니다. </li><li> 이미지를 캡처하는 &quot;취득&quot;을 클릭합니다. &quot;OK;&quot; &quot;편집 이미지 레이블&quot;상자에서 클릭 에 &quot;이미지 창&quot;과 &quot;유료 팔레트&quot;이 나타납니다. </li><li> 자동 선택을위한 자동 ROI 매개 변수를 설정합니다. </li><li> 상대 발광 유니트 (RLUs)와 생물 발광 강도를 정량화 (가장 강한)에서 핑크 청색 (가장 강한) 19 내지 20 범위의 거짓 컬러 스케일 생물 발광 표시. </li><li> 생물 발광 강도 분석에 기초하여 시간 지점에서 마우스를 변화 화상에서 박테리아의 생존 비율을 계산한다. 주어진 시점에서 박테리아의 생존 분획 = 그 시점에서 측정 된 생물 발광 강도 / 생물 발광 강도 오른쪽 ABL 17 노출 전에 측정 하였다. </li></ol> 생쥐 항 안락사 <ol><li> 다음 실험의 종점은 : 촬상 의해 결정된 생물 발광의 손실에 의해 입증되는 바와 같이 감염의 (a)의 해상도; (b) 조직적인 감염 발생되는 연소 이외의 생물 발광의 확산에 의해 지시 된 바와 같이에이; (c) 정상 연령대 마우스에 비해 ≥15 %의 체중 감소, 또는 수동 자극 부동 먹거나 마실 수 없기로 응답의 부족에 의해 표시된 바와 같이 통증과 고통으로부터 고통. 연구 기간 동안, 우리는 우리의 정의에 설명 된대로 마우스가 완전히 죽어가는 상태에 도달, 및 / 또는 우리는 우리가 그것을 안락사해야하는 경우 확실하지 여부를 알 수없는 상황이 발생할 경우, 우리는 CCM 수의학 직원에게 연락을 드릴 것입니다 행동 계획에 대한; (d)는 달리 마우스 30 일 연구 개시 후 안락사된다. </li><li> 케이지로 (CO 2)의 압축 가스를 구체적으로 안락사 폐쇄 케이지로 쥐를 재배치 및 이산화탄소를 전달하여 마우스를 안락사. <ol><li> 가스의 흐름을 개시하기 위해 CO 2 탱크 또는 밸브 조절기를 연다. 레귤레이터는 기기에 게시 된 지침에 따라 올바른 PSI를 (파운드 평방 인치 당) 읽고 있는지 확인하고 재를 조정필요에 따라 올바른 PSI에 일반적으로 더 높은 PSI 5 이상을 gulator 없습니다. </li><li> 천천히 입력합니다. (/ 분 7.5 L ~ 쥐 새장 ~ 2 L / 분, 전형적인 마우스 케이지) 유량은 분당 챔버 / 케이지 볼륨에는 30 % 이상을 대체 안된다. </li><li> 이동 또는 호흡 정지 동물 대략 3-5 분을 기다린 눈은 고정 넓혀해야합니다. CO 2의 흐름을 중지 CO 2 탱크 또는 조절 밸브를 끄십시오. </li><li> 마음이 엄지와 집게 손가락 사이의 가슴을 느낌으로 치고되지 않았는지 확인합니다. 안구를 터치하면 더 깜빡임이 없음을 확인합니다. <ol><li> 하트 비트 또는 깜박 반사가있는 경우, 안락사 과정을 반복하거나 기흉 (동물이 절차를 수행하기 전에 발가락 핀치에 응답하지해야합니다)을 만들 흉강을 엽니 다 가위를 사용합니다. </li></ol></li></ol></li></ol>

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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototoxic+effect+of+blue+light+on+the+planktonic+and+biofilm+state+of+anaerobic+periodontal+pathogens.">Phototoxic effect of blue light on the planktonic and biofilm state of anaerobic periodontal pathogens.</a> J Periodontal Implant Sci. 43 (2), 72-78 (2013).</li><li>Rosa, L. P., da Silva, F. C., Viana, M. S., Meira, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+effectiveness+of+455-nm+blue+LED+to+reduce+the+load+of+Staphylococcus+aureus+and+Candida+albicans+biofilms+in+compact+bone+tissue.">In vitro effectiveness of 455-nm blue LED to reduce the load of Staphylococcus aureus and Candida albicans biofilms in compact bone tissue.</a> Lasers Med Sci. 31 (1), 27-32 (2015).</li><li>Guffey, J. S., Wilborn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+bactericidal+effects+of+405-nm+and+470-nm+blue+light.">In vitro bactericidal effects of 405-nm and 470-nm blue light.</a> Photomed Laser Surg. 24 (6), 684-688 (2006).</li><li>Enwemeka, C. S., Williams, D., Enwemeka, S. K., Hollosi, S., Yens, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blue+470-nm+light+kills+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+(MRSA)+in+vitro.">Blue 470-nm light kills methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in vitro.</a> Photomed Laser Surg. 27 (2), 221-226 (2009).</li><li>Bumah, V. V., Masson-Meyers, D. S., Cashin, S. E., Enwemeka, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wavelength+and+bacterial+density+influence+the+bactericidal+effect+of+blue+light+on+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+(MRSA).">Wavelength and bacterial density influence the bactericidal effect of blue light on methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA).</a> Photomed Laser Surg. 31 (11), 547-553 (2013).</li><li>Maclean, M., MacGregor, S. J., Anderson, J. G., Woolsey, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+bacterial+pathogens+following+exposure+to+light+from+a+405-nanometer+light-emitting+diode+array.">Inactivation of bacterial pathogens following exposure to light from a 405-nanometer light-emitting diode array.</a> Appl Environ Microbiol. 75 (7), 1932-1937 (2009).</li><li>Kim, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+lens-microneedle+array+for+percutaneous+light+delivery.">Optical lens-microneedle array for percutaneous light delivery.</a> Biomedical Optics Express. 7 (1o), 4220-4227 (2016).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

ABL은 감염을 치료하는 신규 한 방법이다. 그 작용 메커니즘은 화학 요법과는 완전히 다르기 때문에, 그것은 물리 치료의 더 많은 것이다. 항균 효과를 중재 에이전트는 청색 광 조사 (400-470 ㎚)이다. 청색 LED의 개발, 우리는 MDR 감염에 대한 효과적이고 간단한 빛 기반 항균 접근 방식에 대한 액세스 권한을 얻었다. 이 프로토콜에서는, 우리는 MDR, A. baumannii에의 생물 발광...

자주하기 때문에 피부의 열 손상의보고 굽기 감염, 이환율과 사망률 1의 중요한 원인이 될 것을 계속한다. 화상 감염 관리 더욱 의한 항생제의 대규모 사용 다제 내성 (MDR) 2 균주의 출현 증가에 의해 손상되었다. 한가지 중요한 MDR 그람 음성균 최근 전투 상처와 관련된 것으로 알려진 거의 모든 가능한 3 항생제에 내성이있다 아시네 토 박터 바우 마니이다. 부상당한 초점에서 바이오 필름의 존재는 지속적인 감염 8, 9가 발생, 4, 5를보고되었으며, 항생제 및 숙주 방어 6, 7에 대한 내성을 악화시킬 것으로 생각된다. 따라서, pressin이있다g 대체 치료법의 개발이 필요합니다. 퇴치 항생제 내성 박테리아에 대한 최근 발표 된 국가 전략에서, 항생제 대체 치료제의 개발은 미국 (10)의 정부 조치로 지적되고있다. 라이트 기반의 항균 접근 방식은, 이름으로 표시된 바와 같이, 또는 다른 에이전트없이 광 조사가 필요합니다. 이러한 접근은 항균 광역 동 치료 (aPDT), 자외선 C (UVC) 조사 및 항균 청색광 (ABL)을 포함한다. 이전의 연구에서, 그들은 MDR 균주 11, 12, 13을 죽이는 유망한 효과를 보여 주었다. 세 가지 빛 기반의 접근 방식 중 ABL 인해 감광제 (14)를 사용하지 않고 고유의 항균 특성에 최근 관심을 증가 모으고있다. 비교 예에서aPDT 빛과 감광제의 조합을 필요로하면서 aPDT에 ISON은 ABL은 빛의 사용을 포함한다. 따라서, ABL (14)는 간단하고 저렴하다. UVC 비교에서, ABL은 덜 세포 독성 세포 (15)를 호스팅하는 유전자 독성 것으로 여겨진다. 이 프로토콜의 목표는 마우스 모델에서 MDR의 A. baumannii에 의한 화상 감염의 치료를위한 ABL의 효과를 조사하는 것입니다. 우리는 실시간으로 세균 부담의 비 침습적 모니터링을 허용 화상 감염의 새로운 마우스 모델을 개발하기 위해 생물 발광 병원성 박테리아를 사용합니다. 체액 / 조직 채취 및 후속 도금 콜로니 16 카운트 전통적인 방법에 비해,이 방법은 정확한 결과를 제공한다. 조직 샘플링 과정은 실험 오차의 다른 소스를 소개 할 수있다. 박테리아 발광 강도는 corres에 선형 비례하므로박테리아 CFU 17 ponding 우리는 직접 광 조사 특정 투여 후 박테리아의 생존을 측정 할 수있다. 실시간으로 빛 치료를 받고 살아있는 동물에서 세균 부담을 모니터링함으로써, 세균을 죽이는의 반응 속도는 마우스의 상당히 감소 번호를 사용하여 특징으로 할 수있다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>IVIS&#160;</td>
			<td>PerkinElmer Inc, Waltham, MA</td>
			<td>IVIS Lumina Series III</td>
			<td>Pre-clinical in vivo imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light-emitting diode LED</td>
			<td>VieLight Inc, Toronto, Canada&#160;</td>
			<td>415 nm</td>
			<td>Light source for illumination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power/energy meter</td>
			<td>Thorlabs, Inc., Newton, NJ</td>
			<td>PM100D</td>
			<td>Light irradiance detector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse&#160;</td>
			<td>Charles River Laboratories, Wilmington, MA</td>
			<td>BALB/c</td>
			<td>7-8 weeks age, 17-19 g weight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acinetobacter baumannii&#160;</td>
			<td>Brooke Army Medical Center, Fort Sam Houston, TX</td>
			<td>Clinical isolate</td>
			<td>Engineered luminescent strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-826-79</td>
			<td>BD Lo-Dose U-100 Insulin Syringes for injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>721016</td>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline, 1X Solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP24384&#160;</td>
			<td>A standard phosphate buffer used in many biomolecular procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brain Heart Infusion</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>B11059</td>
			<td>Bacterial culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 15mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-959-70C</td>
			<td>For bacterial suspension centrifuge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchtop Incubated Orbital Shakers</td>
			<td>Laboratory Supply Network, Inc, Atkinson, NH&#160;</td>
			<td>Incu-Shaker Mini</td>
			<td>For culturing of bacteria</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inoculating Loops</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-605&#160;&#160;</td>
			<td>For smearing bacterial inoclum on burn surface of mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisher Scientific Redi-Tip Pipet Tips, 1-200&#181;L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>02-707-502</td>
			<td>Pipet Tips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Sorvall Legend X1 Centrifuge</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>75-004-220</td>
			<td>For bacterial suspension seperation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brass Block</td>
			<td>Small Parts, Inc., Miami, FL</td>
			<td>10 mm by 10 mm&#160;</td>
			<td>For creation of burns in mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extreme Dragon PBI/Kevlar High-Heat Gloves</td>
			<td>Superior Glove Works Ltd, Cheektowaga, NY</td>
			<td>PBI83514&#160;</td>
			<td>Heat Resistant Gloves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner dishes</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co. LLC</td>
			<td>P5112-740EA</td>
			<td>35 mm &#215;10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Digital Hot Plate</td>
			<td>Cole-Parmer Instrument Company, LLC</td>
			<td>UX-84301-65</td>
			<td>10&#34; x 10&#34;, 220 VAC, for boiling water&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse/Rat Thin Line Water Heated Surgical Bed</td>
			<td>E-Z Systems</td>
			<td>EZ-211</td>
			<td>Prevents heat loss and hypothermia during surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo investigation of antimicrobial blue light therapy for multidrug-resistant acinetobacter baumannii burn infections using bioluminescence imaging

감염 이환율과 사망률의 중요한 원인으로 계속 굽습니다. 다제 내성 (MDR) 박테리아의 증가 출현은 전통적인 항생제 치료의 잦은 오류로 이끌었다. 대체 치료제가 절실히 MDR 박테리아를 해결하기 위해 필요하다. 혁신적인 비 항생제 접근 방식은, 항균 푸른 빛 (ABL)는 MDR의 감염에 대한 유망한 효과를 보여 주었다. ABL의 작용 기전은 아직 잘 이해되지 않는다. 이는 일반적으로 자연 (예를 들어, 철없는 포르피린, 플라 빈과 프르 등) 박테리아에서 내인성 감광 발색단을 발생하는 것은 광화학 프로세스를 다시 세포 독성 활성 산소 종을 생성 ABL (ROS)에 의해 여기되는 것을 가정한다. 또 다른 빛 기반 항균 접근 방식과는 달리, 항균 광 역학 치료 (aPDT)는, ABL 치료는 외래 photosensitiz의 개입을 필요로하지 않습니다어. 그것은을 적용 할 필요가 모든 푸른 빛의 조사입니다 따라서, 간단하고 저렴하다. 에이 비엘 수용체는 박테리아 세포의 내인성 감광제보다는 DNA이다. 따라서, ABL은 훨씬 적은 유전 독성 직접 숙주 세포의 DNA 손상을 일으키는 자외선 C (UVC) 조사보다 숙주 세포에 의한 것으로 생각된다. 본 논문에서는 화상 부상의 마우스 모델에서 MDR 된 Acinetobacter baumannii의 감염 ABL 치료의 효과를 평가하기위한 프로토콜을 제시한다. 조작 된 생물 발광 균주를 사용하여, 우리는 비 침습적 살아있는 동물에서 실시간으로 감염의 정도를 모니터링 할 수 있었다. 이 기술은 또한 동물에서 감염의 공간 분포를 모니터링하기위한 효과적인 도구이다.

앞서 12, 17보고 우리가 사용한 A. baumannii에 균주는 임상 단리 MDR이다. 박테리아 균주 luxCDABE를 오페라 (11)의 형질 감염에 의해 생물 발광을 하였다. 도 1a는 대표적인 마우스에서 발광 박테리아 연속 화상이 5 × 106 A. baumannii에 감염된 화상 세균 접종 후 24 시간에 한 ABL 노?...

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In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

Infections caused by multidrug-resistant (MDR) bacterial strains have emerged as a serious threat to public health, necessitating the development of alternative therapeutics. We present a protocol to evaluate the effectiveness of antimicrobial blue light (aBL) therapy for MDR Acinetobacter baumannii infections in mouse burns by using bioluminescence imaging.

다제 내성 항 감염 블루 라이트 치료의 생체 조사에서 아시네 토 박터 바우 마니는 생물 발광 영상을 사용하여 감염을 굽기

Burn infections continue to be an important cause of morbidity and mortality. The increasing emergence of multidrug-resistant (MDR) bacteria has led to ...

in-vivo-investigation-antimicrobial-blue-light-therapy-for-multidrug

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

9.2K 조회수.  Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School. Infections caused by multidrug-resistant (MDR) bacterial strains have emerged as a serious threat to public health, necessitating the development of alternative therapeutics. We present a protocol to evaluate the effectiveness of antimicrobial blue light (aBL) therapy for MDR Acinetobacter baumannii infections in mouse burns by using bioluminescence imaging.

비디오: In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate since the advent of in vivo bioluminescent imaging technologies 1-3. Indeed, the ability to locate and quantify tumor growth longitudinally in a single cohort of animals to completion of the study as opposed to sacrificing individual groups of animals at specific assay times has revolutionized how researchers investigate breast cancer metastasis. Unfortunately, current methodologies preclude the real-time assessment of critical changes that transpire in cell signaling systems as breast cancer cells (i) evolve within primary tumors, (ii) disseminate throughout the body, and (iii) reinitiate proliferative programs at sites of a metastatic lesion. However, recent advancements in bioluminescent imaging now make it possible to simultaneously quantify specific spatiotemporal changes in gene expression as a function of tumor development and metastatic progression via the use of dual substrate luminescence reactions. To do so, researchers take advantage for two light-producing luciferase enzymes isolated from the firefly (Photinus pyralis) and sea pansy (Renilla reniformis), both of which react to mutually exclusive substrates that previously facilitated their wide-spread use in in vitro cell-based reporter gene assays 4. Here we demonstrate the in vivo utility of these two enzymes such that one luminescence reaction specifically marks the size and location of a developing tumor, while the second luminescent reaction serves as a means to visualize the activation status of specific signaling systems during distinct stages of tumor and metastasis development. Thus, the objectives of this study are two-fold. First, we will describe the steps necessary to construct dual bioluminescent reporter cell lines, as well as those needed to facilitate their use in visualizing the spatiotemporal regulation of gene expression during specific steps of the metastatic cascade. Using the 4T1 model of breast cancer metastasis, we show that the in vivo activity of a synthetic Smad Binding Element (SBE) promoter was decreased dramatically in pulmonary metastasis as compared to that measured in the primary tumor 4-6. Recently, breast cancer metastasis was shown to be regulated by changes within the primary tumor microenvironment and reactive stroma, including those occurring in fibroblasts and infiltrating immune cells 7-9. Thus, our second objective will be to demonstrate the utility of dual bioluminescent techniques in monitoring the growth and localization of two unique cell populations harbored within a single animal during breast cancer growth and metastasis.

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

Herein we describe the methods to construct, visualize, and quantify the bioluminescent reactions of both firefly and renilla luciferase enzymes expressed in metastatic breast cancer cells during their growth and metastasis in vivo.

생체 듀얼 기판 발광 생물 이미징에

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate ...

연구

의학

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of bacteria in gene and cell therapy for cancer. Bacteria present an attractive class of vector for cancer therapy, possessing a natural ability to grow preferentially within tumors following systemic administration. Bacteria engineered to express the lux gene cassette permit BLI detection of the bacteria and concurrently tumor sites. The location and levels of bacteria within tumors over time can be readily examined, visualized in two or three dimensions. The method is applicable to a wide range of bacterial species and tumor xenograft types. This article describes the protocol for analysis of bioluminescent bacteria within subcutaneous tumor bearing mice. Visualization of commensal bacteria in the Gastrointestinal tract (GIT) by BLI is also described. This powerful, and cheap, real-time imaging strategy represents an ideal method for the study of bacteria in vivo in the context of cancer research, in particular gene therapy, and infectious disease. This video outlines the procedure for studying lux-tagged E. coli in live mice, demonstrating the spatial and temporal readout achievable utilizing BLI with the IVIS system.

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

This article describes the administration of lux-tagged bacteria to mice and subsequent in vivo analysis using IVIS bioluminescence imaging.

발광 생물 세균 이미징<em&gt; 생체 내</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

면역학 및 감염병학

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

Recently there were several publications on the bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of the spectrum (400 nm-500 nm) is responsible for killing various pathogens1-5. The phototoxic effect of blue light was suggested to be a result of light-induced reactive oxygen species (ROS) formation by endogenous bacterial photosensitizers which mostly absorb light in the blue region4,6,7. There are also reports of biocidal effect of red and near infra red8 as well as green light9.
In the present study, we developed a method that allowed us to characterize the effect of high power green (wavelength of 532 nm) continuous (CW) and pulsed Q-switched (Q-S) light on Pseudomonas aeruginosa. Using this method we also studied the effect of green light combined with antibiotic treatment (gentamycin) on the bacteria viability. P. aeruginosa is a common noscomial opportunistic pathogen causing various diseases. The strain is fairly resistant to various antibiotics and contains many predicted AcrB/Mex-type RND multidrug efflux systems10.
The method utilized free-living stationary phase Gram-negative bacteria (P. aeruginosa strain PAO1), grown in Luria Broth (LB) medium exposed to Q-switched and/or CW lasers with and without the addition of the antibiotic gentamycin. Cell viability was determined at different time points. The obtained results showed that laser treatment alone did not reduce cell viability compared to untreated control and that gentamycin treatment alone only resulted in a 0.5 log reduction in the viable count for P. aeruginosa. The combined laser and gentamycin treatment, however, resulted in a synergistic effect and the viability of P. aeruginosa was reduced by 8 log's.
The proposed method can further be implemented via the development of catheter like device capable of injecting an antibiotic solution into the infected organ while simultaneously illuminating the area with light.

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

We show that a developed biomedical device involving continuous or pulsed visible laser based treatment that is combined with antibiotic treatment (gentamycin), results in a statistically significant synergistic effect leading to a reduction in the viability of P. aeruginosa PAO1, by 8 log's compared to antibiotic treatment alone.

에 보이는 빛과 젠타 마이신의 상승 효과<em&gt; Pseudomona 녹농균</em&gt; 미생물

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

This protocol outlines the steps required to longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging tomography with integrated &mu;CT (DLIT-&mu;CT) and the subsequent use of this data to generate a four dimensional (4D) movie of the infection cycle. To develop the 4D infection movies and to validate the DLIT-&mu;CT imaging for bacterial infection studies using an IVIS Spectrum CT, we used infection with bioluminescent C. rodentium, which causes self-limiting colitis in mice. In this protocol, we outline the infection of mice with bioluminescent C. rodentium and non-invasive monitoring of colonization by daily DLIT-&mu;CT imaging and bacterial enumeration from feces for 8 days.
The use of the IVIS Spectrum CT facilitates seamless co-registration of optical and &mu;CT scans using a single imaging platform. The low dose &mu;CT modality enables the imaging of mice at multiple time points during infection, providing detailed anatomical localization of bioluminescent bacterial foci in 3D without causing artifacts from the cumulative radiation. Importantly, the 4D movies of infected mice provide a powerful analytical tool to monitor bacterial colonization dynamics in vivo.

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

Multi-modality imaging is a valuable approach for studying bacterial colonization in small animal models. This protocol outlines infection of mice with bioluminescent Citrobacter rodentium and the longitudinal monitoring of bacterial colonization using composite 3D diffuse light imaging tomography with &mu;CT imaging to create a 4D movie of C. rodentium infection.

의 4D 좌석 Multimodality 이미징<em&gt; Citrobacter rodentium</em마우스에서&gt; 감염

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Candida albicans Biofilm Development on Medically-relevant Foreign Bodies in a Mouse Subcutaneous Model Followed by Bioluminescence Imaging

Candida albicans biofilm development on biotic and/or abiotic surfaces represents a specific threat for hospitalized patients. So far, C. albicans biofilms have been studied predominantly in vitro but there is a crucial need for better understanding of this dynamic process under in vivo conditions. We developed an in vivo subcutaneous rat model to study C. albicans biofilm formation. In our model, multiple (up to 9) Candida-infected devices are implanted to the back part of the animal. This gives us a major advantage over the central venous catheter model system as it allows us to study several independent biofilms in one animal. Recently, we adapted this model to study C. albicans biofilm development in BALB/c mice. In this model, mature C. albicans biofilms develop within 48 hr and demonstrate the typical three-dimensional biofilm architecture. The quantification of fungal biofilm is traditionally analyzed post mortem and requires host sacrifice. Because this requires the use of many animals to perform kinetic studies, we applied non-invasive bioluminescence imaging (BLI) to longitudinally follow up in vivo mature C. albicans biofilms developing in our subcutaneous model. C. albicans cells were engineered to express the Gaussia princeps luciferase gene (gLuc) attached to the cell wall. The bioluminescence signal is produced by the luciferase that converts the added substrate coelenterazine into light that can be measured. The BLI signal resembled cell counts obtained from explanted catheters. Non-invasive imaging for quantifying in vivo biofilm formation provides immediate applications for the screening and validation of antifungal drugs under in vivo conditions, as well as for studies based on host-pathogen interactions, hereby contributing to a better understanding of the pathogenesis of catheter-associated infections.

Candida albicans Biofilm Development on Medically-relevant Foreign Bodies in a Mouse Subcutaneous Model Followed by Bioluminescence Imaging

We present an experimental procedure of Candida albicans biofilm development in a mouse subcutaneous model. Fungal biofilms were quantified by determining the number of colony forming units and by a non-invasive bioluminescence imaging, where the amount of light that is produced corresponds with the number of viable cells.

생물 발광 영상에 이어 마우스 피하 모델의 의학 관련 외국 기관에 칸디다 알비 칸스 (Candida albicans)에 바이오 필름 ​​개발

Candida albicans biofilm development on biotic and/or abiotic surfaces represents a specific threat for hospitalized patients. So far, C. albicans ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. Chronic mouse wounds models have been used to understand the underlying interactions between the microorganisms and the host. The models developed to date rely on the use of haired animals and terminal collection of wound tissue for determination of viable bacteria. While significant insight has been gained with these models, this experimental procedure requires a large number of animals and sampling is time consuming. We have developed a novel murine model that incorporates several optimal innovations to evaluate biofilm progression in chronic wounds: a) it utilizes hairless mice, eliminating the need for hair removal; b) applies pre-formed biofilms to the wounds allowing for the immediate evaluation of persistence and effect of these communities on host; c) monitors biofilm progression by quantifying light production by a genetically engineered bioluminescent strain of Pseudomonas aeruginosa, allowing real-time monitoring of the infection thus reducing the number of animals required per study. In this model, a single full-depth wound is produced on the back of STZ-induced diabetic hairless mice and inoculated with biofilms of the P. aeruginosa bioluminescent strain Xen 41. Light output from the wounds is recorded daily in an in vivo imaging system, allowing for in vivo and in situ rapid biofilm visualization and localization of biofilm bacteria within the wounds. This novel method is flexible as it can be used to study other microorganisms, including genetically engineered species and multi-species biofilms, and may be of special value in testing anti-biofilm strategies including antimicrobial occlusive dressings.

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Here we describe a novel diabetic murine model utilizing hairless mice for real-time, non-invasive, monitoring of biofilm wound infections of bioluminescent Pseudomonas aeruginosa. This method can be adapted to evaluate infection of other bacterial species and genetically modified microorganisms, including multi-species biofilms, and test the efficacy of antibiofilm strategies.

라이트 사이드에와 서: Vivo에서 당뇨병 털 Murine 모델에 만성 상처에서 녹 농 균 Biofilm 감염의 모니터링

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

LED-Based In Vitro Screening for Assessing Photoactivable Molecules in Bacterial Photodynamic Inactivation

The rise of multi-drug-resistant infections and the lack of new antibiotic classes have renewed interest in alternative therapies like photodynamic inactivation of bacteria (aPDI). This process involves the administration of a photosensitizer (PS) activated by a suitable visible light source, producing exacerbated levels of reactive oxygen species (ROS) that damage crucial cellular biomolecules, ultimately causing bacterial cell death. It is crucial to create standardized, easy-to-use, and reproducible initial tests to assess and compare the effectiveness of light-induced phototoxicity of potential photosensitizers. This study introduces a simple and efficient in vitro technique for assessing photodynamic activity against planktonic bacterial cells. By employing a 96-well microplate format along with a large LED panel, the system facilitates the systematic evaluation of various compounds. Such a configuration allows for high-throughput screening of potential photosensitizers in a controlled and consistent environment, simplifying the process of identifying promising candidates for further development. This flexible platform serves as an important step in advancing the development of innovative photodynamic therapies for managing antibiotic-resistant infections.

This protocol describes a straightforward and economical method for evaluating the effectiveness of potential photosensitizers in antibacterial photodynamic inactivation (aPDI), using a 96-well plate format combined with an LED panel light source. This approach enables the simultaneous testing of multiple experimental conditions, including different concentrations, compounds, and bacterial strains.

박테리아 광역학 불활성화에서 광활성 분자를 평가하기 위한 LED 기반 체외 스크리닝

The rise of multi-drug-resistant infections and the lack of new antibiotic classes have renewed interest in alternative therapies like photodynamic ...

생화학

Longitudinal Follow-Up of Urinary Tract Infections and Their Treatment in Mice using Bioluminescence Imaging

Urinary tract infections (UTI) rank among the most common bacterial infections in humans and are routinely treated with empirical antibiotics. However, due to increasing microbial resistance, the efficacy of the most used antibiotics has declined. To find alternative treatment options, there is a great need for a better understanding of the UTI pathogenesis and the mechanisms that determine UTI susceptibility. In order to investigate this in an animal model, a reproducible, non-invasive assay to study the course of UTI is indispensable.
For years, the gold standard for the enumeration of bacterial load has been the determination of Colony Forming Units (CFU) for a particular sample volume. This technique requires post-mortem organ homogenates and serial dilutions, limiting data output and reproducibility. As an alternative, bioluminescence imaging (BLI) is gaining popularity to determine the bacterial load. Labeling pathogens with a lux operon allow for the sensitive detection and quantification in a non-invasive manner, thereby enabling longitudinal follow-up. So far, the adoption of BLI in UTI research remains limited.
This manuscript describes the practical implementation of BLI in a mouse urinary tract infection model. Here, a step-by-step guide for culturing bacteria, intravesical instillation and imaging is provided. The in vivo correlation with CFU is examined and a proof-of-concept is provided by comparing the bacterial load of untreated infected animals with antibiotic-treated animals. Furthermore, the advantages, limitations, and considerations specific to the implementation of BLI in an in vivo UTI model are discussed. The implementation of BLI in the UTI research field will greatly facilitate research on the pathogenesis of UTI and the discovery of new ways to prevent and treat UTI.

This manuscript describes the intravesical administration of uropathogenic bacteria with a lux operon to induce a urinary tract infection in mice and subsequent longitudinal in vivo analysis of the bacterial load using bioluminescence imaging.

요로 감염의 세로 후속 및 생물 발광 이미징을 사용하여 마우스에서의 치료

Urinary tract infections (UTI) rank among the most common bacterial infections in humans and are routinely treated with empirical antibiotics. However, ...

Autonomously Bioluminescent Mammalian Cells for Continuous and Real-time Monitoring of Cytotoxicity

Mammalian cell-based in vitro assays have been widely employed as alternatives to animal testing for toxicological studies but have been limited due to the high monetary and time costs of parallel sample preparation that are necessitated due to the destructive nature of firefly luciferase-based screening methods. This video describes the utilization of autonomously bioluminescent mammalian cells, which do not require the destructive addition of a luciferin substrate, as an inexpensive and facile method for monitoring the cytotoxic effects of a compound of interest. Mammalian cells stably expressing the full bacterial bioluminescence (luxCDABEfrp) gene cassette autonomously produce an optical signal that peaks at 490 nm without the addition of an expensive and possibly interfering luciferin substrate, excitation by an external energy source, or destruction of the sample that is traditionally performed during optical imaging procedures. This independence from external stimulation places the burden for maintaining the bioluminescent reaction solely on the cell, meaning that the resultant signal is only detected during active metabolism. This characteristic makes the lux-expressing cell line an excellent candidate for use as a biosentinel against cytotoxic effects because changes in bioluminescent production are indicative of adverse effects on cellular growth and metabolism. Similarly, the autonomous nature and lack of required sample destruction permits repeated imaging of the same sample in real-time throughout the period of toxicant exposure and can be performed across multiple samples using existing imaging equipment in an automated fashion.

Mammalian cells expressing the bacterial bioluminescence gene cassette (lux) produce light autonomously. The resulting bioluminescent dynamics upon chemical exposure have been demonstrated to reflect the treatment effects on cellular growth and metabolism, making these cells an inexpensive, continuous, real-time toxicity screening tool that can easily be adapted for high-throughput automation.

세포 독성의 지속적인 실시간 모니터링을위한 자율적으로 바이오 루미 네 센트 포유 동물 세포

Mammalian  cell-based in vitro assays have been  widely employed as alternatives to animal testing for toxicological studies but  have been limited due to ...

생물학

Dual Bioluminescence Imaging of Tumor Progression and Angiogenesis

Angiogenesis, as a crucial process of tumor progression, has become a research hotspot and target of anti-tumor therapy. However, there is no reliable model for tracing tumor progression and angiogenesis simultaneously in a visual and sensitive manner. Bioluminescence imaging displays its unique superiority in living imaging due to its advantages of high sensitivity, strong specificity, and accurate measurement. Presented here is a protocol to establish a tumor-bearing mouse model by injecting a Renilla luciferase-labeled murine breast cancer cell line 4T1 into the transgenic mouse with angiogenesis-induced Firefly luciferase expression. This mouse model provides a valuable tool to simultaneously monitor tumor progression and angiogenesis in real-time by dual bioluminescence imaging in a single mouse. This model may be widely applied in anti-tumor drug screening and oncology research.

This protocol describes the establishment of a tumor-bearing mouse model to monitor tumor progression and angiogenesis in real-time by dual bioluminescence imaging.

종양 진행 및 혈관 신생의 이중 생물 발광 이미징

Angiogenesis, as a crucial process of tumor progression, has become a research hotspot and target of anti-tumor therapy. However, there is no reliable ...

다제 내성 항 감염 블루 라이트 치료의 생체 조사에서 아시네 토 박터 바우 마니는 생물 발광 영상을 사용하여 감염을 굽기

요약

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이 비디오의 챕터

생체 듀얼 기판 발광 생물 이미징에

발광 생물 세균 이미징

에 보이는 빛과 젠타 마이신의 상승 효과

의 4D 좌석 Multimodality 이미징

생물 발광 영상에 이어 마우스 피하 모델의 의학 관련 외국 기관에 칸디다 알비 칸스 (Candida albicans)에 바이오 필름 개발

라이트 사이드에와 서: Vivo에서 당뇨병 털 Murine 모델에 만성 상처에서 녹 농 균 Biofilm 감염의 모니터링

박테리아 광역학 불활성화에서 광활성 분자를 평가하기 위한 LED 기반 체외 스크리닝

요로 감염의 세로 후속 및 생물 발광 이미징을 사용하여 마우스에서의 치료

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