저자가이 작품 (그랜트 # #7-13-학사-180), 미시간 주립 대학 연구 기술 지원 시설 교육 및는 vivo에서 이미징 시스템에 대 한 액세스를 제공 하기 위한 지원에 대 한 미국 당뇨병 협회를 감사 하 고 싶습니다 그리고 미시간 주립 대학 조사 Histopathology 연구소 histopathological 시험에 대 한 마우스 biopsies 처리.

동물 실험 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 미시간 주립 대학에 의해 승인 했다.
 1. 폐색 드레싱의 준비 및 실리콘 스페이서 <ol><li>잘라 투명 한 폐색 드레싱을 사각형 약 1 cm × 1 cm가 위.</li>
	<li>잘라 10 m m 10mm 생 검 펀치. 센터 5mm 생 검을 사용 하 여 0.5 m m 두꺼운 실리콘 시트에 10 m m 원형 중간 펀치 원과 형태로 구멍을 만들고에 단단히 눌러는 &#34; 도넛 &#34;-부 목으로 사용 될 디스크 처럼.</li></ol>
 2. 실험 동물 상업적인 종 축에서 <ol><li>사용 8 주 오래 된 (22-26 g) 남성 SKH-1 쥐. 음식과 물에 21 ° C와 무료 12 h 빛 어두운 주기의 표준 상태에서 마우스를 유지.</li>
	<li>당뇨병을 유도 하는 13 mg/ml streptozotocin (STZ) solutionand 25% 마우스 intraperitonially 주사 포도 당 (당 250 µ l / 마우스) 5 일 연속에.
	<ol><li>Diluting 65 µ g STZ의 100 m 구 연산 산 성, pH 4.5 m의 5 µ L에 의해 STZ 솔루션 확인.</li>
		<li>각 마우스의 마우스 몸 무게 1 킬로그램 당 65 mg STZ의 마지막 질량에 대 한 삽입된 볼륨을 조정합니다. 같은 일에 100 m m 구 연산 산 성 솔루션 ph 4.5 통제 쥐를 주입.</li>
	</ol></li> <li>혈당 모니터링는 glucometer와 마지막 STZ 주입 후 14 일에 의해 혈당을 확인. 당뇨병 쥐 polyuria 있을 수 있습니다 그래서 그들의 침구 촉촉한 제거를 더 자주 변경 해야 할 수 있습니다 하 고 그들의 무게는 3 회 모니터링 해야 합니다.</li>
</ol> 3. Biofilms <ol><li>Biofilm 준비 <ol><li>성장 식민지 biofilms 8 상처를 예방 하. 2 일 수술 시작 전에 발광의 숙박 문화 P. 농 균 젠 tryptic 간장 국물 (TSB)에 41 37 ° C에서 incubated 200 rpm에서 떨고 있고 UV에 노출에 의해 0.2 µ m 기 공 크기와 폴 리 카보 네이트 멤브레인 필터를 소독 사이드 당 15 분에 대 한 생물 안전 후드에 빛.</li>
		<li>수술 전에 1 일 원심 20000 x g 2 분에 대 한 야간 문화 그리고 Dulbelcco의 1 mL로 3 번 세척 &#39; s 인산 아래로 pipetting으로 식 염 수 (DPBS) 버퍼링.</li>
		<li>0.05 600에서의 흡 광도를 DPBS에 현 탁 액 희석 nm.</li>
		<li>Tryptic 간장 agar (TSA) 접시에 각 막에 희석된 문화의 피 펫 10 µ L. 건조를 허용 후 모든 24 h. 신선한 TSA 격판덮개 전송 biofilms 성장 72 h 35 ° C에서 막 품 어</li>
	</ol></li> <li>표준 곡선 <ol><li>실험의 시작 이전에 게 생물 발광 및 세균 수를 연결 하는 표준 곡선.</li>
		<li>3.1에 설명 된 대로 biofilms 준비.</li>
		<li>는 시각적으로 균질 해결책은 생성 될 때까지 vortexing와 DPBS biofilm를 혼합 하 여 1/24 ½에서 배열 하는 biofilms의 직렬 희석 확인 합니다. 피 펫 200µL 블랙 96 잘 접시에 vivo에서 이미징 시스템 이미지 희석 솔루션.</li>
		<li>TSA 격판덮개에 격판덮개 dilutions와 24 h. 35 ° C에서 품 어</li>
		<li>접시에 콜로 니 형성 단위 (CFU)를 계산 하 고 생물 발광 및 세균 수를 연결 하는 표준 곡선을 만듭니다.</li>
	</ol></li></ol> 4. 수술 상처 <ol><li>1 L/min의 유량에서 isoflurane에에서 사용 95% oxygen/5% CO 2 (ketoacidosis에서 죽음을 방지) 전신 마 취 유도 및 유지 사용 하 여 1-3 %isoflurane 마 취. 수술 하는 동안 열 매트에 동물 유지.</li>
	<li>마우스의 깊은 페달 반사는 핀셋으로 발을 곤란 하 게 하 여 억제 하 고 발생 하기 쉬운 위치에 마우스를 놓습니다.</li>
	<li>Meloxicam (0.2 mg/kg) 통증 관리에 대 한 하위 피부 주입 (30 μ)을 통해 관리.</li>
	<li>10 %povidone-요오드 세 번 다시와 소 프로 파 놀 패드의 피부를 닦아.</li>
	<li>살 균 4mm 생 검 펀치를 마우스의 1 개의 측에 상처에 대 한 하나의 원형 패턴 개요을 사용 하 여 &#39; s 중간 어깨의 수준에서. 영구 표시와 함께 패턴 개요.</li>
	<li>톱니 모양의 집게를 사용 하 여 panniculus carnosus를 포함 하 여 피하 조직을 통해 확장 하는 전체 두께 상처를 만들고 조직의 원형 조각을 소비 세 개요와 아이리스가 위 중간 피부.</li>
	<li>의료 방수 피부 접착제 접착제 쥐의 피부에 적용 하 고 가벼운 압력 실리콘 부를 배치 합니다. 투명 한 폐색 하는 드레싱으로 상처를 커버. 수술 후, 개별적으로 동물 케이지.</li>
</ol> 5. 수술 후 관리 <ol><li>meloxicam (0.2 mg/kg) 다음 2 일에 대 한 수술 후 통증에 대 한 하위 피부 주입을 통해 하루에 한 번씩 관리.</li>
	<li>매일 통증 및 체중 감소의 발현에 대 한 모니터 동물. 그들은 몸 무게의 15% 이상을 잃었을 때 당뇨병 동물 인슐린 주사 필요.</li>
</ol> 6. Biofilm Inoculum 준비 및 감염 <ol><li>다음 단계에 설명 된 대로 마우스 48 h 수술 후 예방.</li>
	<li>긁어 72 h biofilms 메 마른 주걱을 사용 하 여 막에서 그것 microcentrifuge 튜브에 놓고 DPBS에 1:2 희석 합니다. 짧게 위아래로 pipetting으로 믹스.</li>
	<li>확산 판 inoculum TSA 접시 총 CFU 계산 하에. 초음파 세탁 기술자에서 40 kHz에서 2 분 쥡니다 단계에 의해 삽입 된 두 개의 1 분 vortexing 단계 시리즈로 biofilm inoculum 더 뜨 개수 정확 하도록.</li>
	<li>상처와 실리콘 부 목 및 참조에 대 한 눈금자를 사용 하 여 연결 된 카메라와 현미경으로 상처의 현미경 사진 걸릴 드레싱 덮 음을 제거.</li>
	<li>200 µ L 피 펫 팁의 팁을 잘라내어 각 상처에 biofilm inoculum의 10 µ L 플라스틱.</li>
	<li>는 vivo에서 자동 설정을 사용 하 여 시스템 이미지를 사용 하 여 이미지 마우스: 노출 시간 5-300 s, 중간 binning, 1 f/정지 및 오픈 필터 및 보기의 필드 C (12.9 c m x 12.9 cm).</li>
	<li>커버 신선한 드레싱 상처.</li>
</ol> 7. 상처 측정 및 이미징 <ol><li>동물 일일 9의 임상 증상을 평가.</li>
	<li>음식을 제공, 물 및 필요에 따라 새 장 변경.</li>
	<li>확인 매일 드레싱의 무결성입니다. 드레싱 있으면, 상처의 폐색으로 인해 생물 발광만을 측정할 수 있습니다. 8 날, 드레싱 제거 되 고 상처 폐쇄의 허용 측정 바뀌지.</li>
	<li>무게 동물 매일.</li>
	<li>모든 일에 대 한 배치 마우스 개별적으로 고립 약 실에 HEPA 필터와는 vivo에서 매일 또는 하루 걸러 발광 값 배경 수준 이하로 떨어질 때까지 시스템 이미징 사용 하 여 이미지.</li>
	<li>8 일 후 전신 마 취를 유도 하 고 카메라로 현미경 현미경으로 상처의 연결 된 통치자를 참조 하 여 상처 치유 될 때까지 매일.</li>
</ol> 8. 조직학 분석 <ol><li>는 안락사에서 CO 2의 2 l/min의 흐름으로 쥐 발광 배경 수준 아래로 떨어지면 상처가 완전히 나 았 후 챔버 Euthanize. 안락사의 두 번째 방법으로 자 궁 경부 전위에 의해 죽음을 확인 하십시오.</li>
	<li>아이리스가 위 사용 하 여 만들고 주위와 아래 상처 영역 (직경 약 1 c m) 넓은, 전체 절단 조직학 분석을 위한 4 %paraformaldehyde 조직 보존.</li>
	<li>다른 분석: Cytokine 감지 <ol><li>복고풍 orbitally 유리 모 세관 튜브를 사용 하 여 마 취 동물에서 혈액을 수집 하 고 EDTA 대우 관에 그것을 전송.</li>
		<li>4 ° C에서 20 분 2000 rpm에서 혈액을 원심와 플라스마 cytokine 탐지에 대 한 동결.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>James, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilms+in+chronic+wounds.">Biofilms in chronic wounds.</a> Wound Repair Regen. 16 (1), 37-44 (2008).</li><li>Gordois, A., Scuffham, P., Shearer, A., Oglesby, A., Tobian, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+health+care+costs+of+diabetic+peripheral+neuropathy+in+the+US.">The health care costs of diabetic peripheral neuropathy in the US.</a> Diabetes Care. 26 (6), 1790-1795 (2003).</li><li>Reiber, G. E., McDonell, M. B., Schleyer, A. M., Fihn, S. D., Reda, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+system+for+quality+improvement+in+ambulatory+care:+assessing+the+quality+of+diabetes+care.">A comprehensive system for quality improvement in ambulatory care: assessing the quality of diabetes care.</a> Patient Educ Couns. 26 (1-3), 337-341 (1995).</li><li>Driver, V. R., Fabbi, M., Lavery, L. A., Gibbons, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+costs+of+diabetic+foot:+The+economic+case+for+the+limb+salvage+team.">The costs of diabetic foot: The economic case for the limb salvage team.</a> J Vasc Surg. 52 (Suppl 3), 17S-22S (2010).</li><li>Contag, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photonic+detection+of+bacterial+pathogens+in+living+hosts.">Photonic detection of bacterial pathogens in living hosts.</a> Mol Microbiol. 18 (4), 593-603 (1995).</li><li>Rocchetta, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+noninvasive,+real-time+imaging+technology+using+bioluminescent+Escherichia+coli+in+the+neutropenic+mouse+thigh+model+of+infection.">Validation of a noninvasive, real-time imaging technology using bioluminescent Escherichia coli in the neutropenic mouse thigh model of infection.</a> Antimicrob Agents Chemother. 45 (1), 129-137 (2001).</li><li>Kadurugamuwa, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+direct+method+for+monitoring+antibiotics+in+a+mouse+model+of+bacterial+biofilm+infection.">Rapid direct method for monitoring antibiotics in a mouse model of bacterial biofilm infection.</a> Antimicrob Agents Chemother. 47 (0066-4804), 3130-3137 (2003).</li><li>Anderl, J. N., Franklin, M. J., Stewart, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+antibiotic+penetration+limitation+in+Klebsiella+pneumoniae+biofilm+resistance+to+ampicillin+and+ciprofloxacin.">Role of antibiotic penetration limitation in Klebsiella pneumoniae biofilm resistance to ampicillin and ciprofloxacin.</a> Antimicrob Agents Chemother. 44 (7), 1818-1824 (2000).</li><li>Morton, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+approach+for+establishing+humane+endpoints.">A systematic approach for establishing humane endpoints.</a> ILAR J. 41 (2), 80-86 (2000).</li><li>Dunn, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+wound+healing.">Murine model of wound healing.</a> J Vis Exp. (75), e50265 (2013).</li><li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+wound+healing+in+diabetic+(db/db)+mice+with+Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+challenge+-+a+model+for+the+study+of+chronic+wounds.">Delayed wound healing in diabetic (db/db) mice with Pseudomonas aeruginosa biofilm challenge - a model for the study of chronic wounds.</a> Wound Repair Regen. 18 (5), 467-477 (2010).</li><li>Holley, A. K., Xu, Y., Noel, T., Bakthavatchalu, V., Batinic-Haberle, I., St. Clair, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manganese+superoxide+dismutase-mediated+inside-out+signaling+in+HaCaT+human+keratinocytes+and+SKH-1+mouse+skin.">Manganese superoxide dismutase-mediated inside-out signaling in HaCaT human keratinocytes and SKH-1 mouse skin.</a> Antioxid Redox Signal. 20 (15), 2347-2360 (2014).</li><li>Abbas, S., Alam, S., Pal, A., Kumar, M., Singh, D., Ansari, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=UVB+exposure+enhanced+benzanthrone-induced+inflammatory+responses+in+SKH-1+mouse+skin+by+activating+the+expression+of+COX-2+and+iNOS+through+MAP+kinases/NF-&#312;B/AP-1+signalling+pathways.">UVB exposure enhanced benzanthrone-induced inflammatory responses in SKH-1 mouse skin by activating the expression of COX-2 and iNOS through MAP kinases/NF-&#312;B/AP-1 signalling pathways.</a> Food Chem Toxicol. 96, 183-190 (2016).</li><li>Watters, C., Everett, J. A., Haley, C., Clinton, A., Rumbaugh, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+treatment+modulates+the+host+immune+system+to+enhance+Pseudomonas+aeruginosa+wound+biofilms.">Insulin treatment modulates the host immune system to enhance Pseudomonas aeruginosa wound biofilms.</a> Infect Immun. 82 (1), 92-100 (2014).</li></ol>

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

여기는 재현, 번역, 그리고 유연한 모델을 만드는 많은 이점이 당뇨 만성 상처에 biofilms의 연구에 대 한 새로운 마우스 모델에 설명 합니다.
첫 번째 혁신은 털이 없는 쥐의 사용 이다. 모든 왁 싱 또는 머리 클리핑 함께 포함 하는 프로세스에 의해 모피의 제거를 요구 하는 발 마우스의 사용에 의존 해야 하지만 다른 마우스 모델 당뇨병 만성 상처 치유10,</...

Biofilms 만성 상처1의 불 쌍 한 해상도 대 한 기여 요인으로 강조 된 고분자 물질의 매트릭스에 포함 된 미생물의 복잡 한 지역 사회는. 이 매우 조직적이 고 지속적인 미생물 인구의 연구는 특히 당뇨병 환자는 사지 및 변경 된 주변 감각 메커니즘에 냉 들 키 지 않고 병 변2이어질 중요 합니다. 미국에서는, 그것은 당뇨병 환자의 15% 그들의 생활의 과정 동안 적어도 하나의 궤를 개발할 것입니다 추정. 이 치료3,4, 약 28 십억 달러의 경제 비용 immensurable 정서적 및 사회적 부담을 언급 하지 않기 위하여 변환 됩니다. 상처 침대와 이러한 biofilms 치유 행사에 미칠 영향에 유지 하기 위해 미생물 커뮤니티를 허용 하는 요소를 이해 하는 것은 영향을 받는 환자에 대 한 더 나은 관리를 운전 하 고 새로운 치료 방법의 개발을 추진 하는 것이 필수적. 따라서, 재현할 수 및 번역 vivo에서 박테리아-호스트 상호 작용을 탐구에 대 한 모델의 설립은 최고 이다.
Murine 모델 biofilms 만성 상처에의 영향을 공부를 성공적으로 개발 되었습니다. 그러나이 모델,, 종종 머리 종 그리고 활용 biofilm 정리 삭제 조직의 희생된 동물, 시간이 소모 및 비용이 많이 드는 그들을 만들기에서 실행 가능한 박테리아 세포에 대 한 판 수에 의해 평가.
Biophotonic 대안 평가 감염 동물의 끝점 샘플링을 Contag 외에의해 처음 제안 했다. (1995) 5 , constitutively 발광 살 모 넬 라 typhimurium 항생제 치료 효능 측정 하에서 발광을 캡처하는 방법 개발. 생물 발광-발광 박테리아를 활용 하는 다른 연구 뒤. 예를 들어 Rochetta은 외. (2001 년) 6 발광 한 강화 전 하 결합 소자를 사용 하 여 측정 하 여 대장균 허벅지 감염 마우스에서 공부 하는 감염 모델 검증 및 나중에, Kadurugamuwa 외. (2003) 7 쥐에서 카 테 터 상처 모델에서 여러 가지 항생제의 효능을 조사 하기 위해 포도 상 구 균 의 설계 긴장의 방출 광자의 이용을 했다.
여기 특징 방법 선물 털이 없는 쥐에 있는 당뇨병을 유도, 생산 및 상처와 미리 형성한 발광 biofilms P. 녹 농 균 의 접종 및 biophotonic 감염의 모니터링을 실시 하는 간단한 프로토콜 사용 하는 비보에 이미징 시스템. 그것은 제공 하는 직접, 급속, 제자리에서비-침략 적, 양적 프로세스 biofilms 만성 상처에 평가 하 고 현미경 이미징 치유의 상처, 간헐적인 혈액 컬렉션에 대 한와 같은 또한 추가 분석에 대 한 수 cytokine 측정, 그리고 조직학에 대 한 터미널 조직 컬렉션.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Opsite</td>
			<td>Smith &#38; Nephew</td>
			<td>Model 66000041</td>
			<td>Smith &#38; Nephew Flexfix Opsite Transparent Adhesive Film Roll 4&#34; x 11yards</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SKH-1 mice Crl:SKH1-Hrhr</td>
			<td>Charles River Breeding Laboratories</td>
			<td>SKH1</td>
			<td>Hairless mice, 8 weeks old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptozotocin (STZ)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S0130-1G</td>
			<td>Streptozocin powder, 1g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AccuChek glucometer</td>
			<td>Accu-Chek Roche</td>
			<td>Art No. 05046025001</td>
			<td>ACCU-CHEK CompactPlus Diabetes Monitoring Care Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudomonas aeruginosa Xen 41</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>119229</td>
			<td>Bioluminescent Pseudomonas aeruginosa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate membrane filters</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P9199</td>
			<td>Millipore polycarbonate membrane filters with 0.2 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbelcco phosphate buffer saline (DPBS)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soy agar</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>22091</td>
			<td>Culture agar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>49755</td>
			<td>Eloxiject (Meloxicam) 5mg/mL, solution for injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% povidone-iodine (Betadine)</td>
			<td>Purdue Products LP</td>
			<td>301879-OA</td>
			<td>Swabstick, Betadine Solution. Antiseptic. Individ. Wrapped, 200/case</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAJ61899AK</td>
			<td>Alfa Aesar Paraformaldehyde, 4% in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capillary glass tube</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-362-566</td>
			<td>Heparinized Micro-Hematocrit Capillary Tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone to make splints</td>
			<td>Invitrogen Life Technologies Corp</td>
			<td>P-18178</td>
			<td>Press-to-Seal Silicone Sheet, 13cm x 18cm, 0.5mm thick, set of 5 sheets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soy broth</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>22092</td>
			<td>Culture broth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Spectrum</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>124262</td>
			<td>In vivo imaging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Spectrum Isolation chamber</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>123997</td>
			<td>XIC-3 animal isolation chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPA filter</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>28022</td>
			<td>Gibeck ISO-Gard HEPA Light number 28022</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy punches</td>
			<td>VWR International Inc</td>
			<td>21909-142</td>
			<td>Disposable Biopsy Punch, 5mm, Sterile, pack of 50.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy punches</td>
			<td>VWR International Inc</td>
			<td>21909-140</td>
			<td>Disposable Biopsy Punch, 4mm, Sterile, pack of 50.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>J.T.Baker</td>
			<td>1916-01</td>
			<td>Dextrose, Anhydrous, Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C2404-100G</td>
			<td>Citric Acid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mastisol</td>
			<td>Eloquest Healthcare</td>
			<td>HRI 0496-0523-48</td>
			<td>Mastisol Medical Liquid Adhesive 2/3 mL vial, box of 48</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 96-well black plates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>07-200-567</td>
			<td>96-well clear bottom black polysterene microplates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 gauge 5/8 inch needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305122</td>
			<td>Regular bevel needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bransonic M Ultrasonic Cleaning Bath</td>
			<td>Branson Ultrasonics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Ultrasonic Cleaner</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

come to the light side: in vivo monitoring of pseudomonas aeruginosa biofilm infections in chronic wounds in a diabetic hairless murine model

당뇨병 환자, 특히 만성 상처에 구조적된 biofilms 박테리아의 존재는 상처 치유 및 해상도 방지 하기 위해 생각 된다. 만성 마우스 상처 모델 미생물와 호스트 간의 기본 상호 작용 이해에 사용 되었습니다. 최신 개발 모델 머리 동물의 사용 및 실행 가능한 박테리아의 결정에 대 한 상처 조직의 터미널 컬렉션에 의존 합니다. 이러한 모델 인 사이트를 얻고,이 실험적인 절차 필요 동물의 많은 수 및 샘플링 시간이 소모 되는 중요 한 동안. 우리는 만성 상처에 biofilm 진행을 평가 하기 위해 몇 가지 최적의 혁신을 통합 하는 소설 murine 모델 개발: 한) 털 쥐, 머리 제거;에 대 한 필요성을 제거 사용 b) 지 속성의 즉각적인 평가 호스트;에이 커뮤니티의 효과 대 한 수 있도록 상처에 미리 형성 된 biofilms 적용 c) 녹 농 균, 따라서 연구 당 필요한 동물의 수를 줄이고 감염의 실시간 감시를 허용의 유전자 조작된 발광 변형에 의해 빛 생산 측정 모니터링 biofilm 진행 합니다. 이 모델에서 단일 전체 깊이 상처는 STZ 유도 당뇨병 털 쥐의 뒷면에 생산과 P. 농 균 발광 스트레인 젠 41의 biofilms와 주사. 상처에서 광 출력을 vivo에서 이미징 시스템, vivo에서 그리고 제자리에서 빠른 biofilm 시각화 및 상처 내 biofilm 박테리아의 지역화에 대 한 허용에 매일 기록 됩니다. 이 새로운 메서드는 유연한 유전자 조작된 종 등 여러 종 biofilms, 다른 미생물을 연구 하는 데 사용할 수 있습니다 하 고 항균 성 폐색 드레싱을 포함 한 안티 biofilm 전략 테스트에 특별 한 가치가 있을 수 있습니다.

이 새로운 모델을 개발, C57BL/6J 쥐, 우리가 과거에 사용 되는 동안 털 SKH-1을 활용에 많은 이점이 관찰 합니다. 동물 STZ 주사를 정상적으로 받게; 당뇨병의 발병과 점진적 체중 감소 경험 그러나, 상처 치유 실험 이전 실시 던 외제시한 모델을 재현 하는 우리의 실험실에 의해. (2012 년) 9 C57BL/6J, 급격 한 체중 감소를 사용 하 여 (그림 1</...

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Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

라이트 사이드에와 서: Vivo에서 당뇨병 털 Murine 모델에 만성 상처에서 녹 농 균 Biofilm 감염의 모니터링

여기는 실시간, 비-침략 적, 발광 녹 농 균의 biofilm 상처 감염의 모니터링을 위한 털 쥐를 활용 하 여 새로운 당뇨병 murine 모델에 설명 합니다. 이 메서드는 다른 세균성 종 및 다 종 biofilms를 포함 하 여 유전자 변형된 미생물의 감염을 평가 하 고 antibiofilm 전략의 효능 테스트에 적용할 수 있습니다.

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

13.1K 조회수.  Michigan State University. 여기는 실시간, 비-침략 적, 발광 녹 농 균의 biofilm 상처 감염의 모니터링을 위한 털 쥐를 활용 하 여 새로운 당뇨병 murine 모델에 설명 합니다. 이 메서드는 다른 세균성 종 및 다 종 biofilms를 포함 하 여 유전자 변형된 미생물의 감염을 평가 하 고 antibiofilm 전략의 효능 테스트에 적용할 수 있습니다.

비디오: Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Many microbial cells have the ability to form sessile microbial communities defined as biofilms that have altered physiological and pathological properties compared to free living microorganisms. Biofilms in nature are often difficult to investigate and reside under poorly defined conditions1. Using a transparent substratum it is possible to device a system where simple biofilms can be examined in a non-destructive way in real-time: here we demonstrate the assembly and operation of a flow cell model system, for in vitro 3D studies of microbial biofilms generating high reproducibility under well-defined conditions2,3.
The system consists of a flow cell that serves as growth chamber for the biofilm. The flow cell is supplied with nutrients and oxygen from a medium flask via a peristaltic pump and spent medium is collected in a waste container. This construction of the flow system allows a continuous supply of nutrients and administration of e.g. antibiotics with minimal disturbance of the cells grown in the flow chamber. Moreover, the flow conditions within the flow cell allow studies of biofilm exposed to shear stress. A bubble trapping device confines air bubbles from the tubing which otherwise could disrupt the biofilm structure in the flow cell.
The flow cell system is compatible with Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM) and can thereby provide highly detailed 3D information about developing microbial biofilms. Cells in the biofilm can be labeled with fluorescent probes or proteins compatible with CLSM analysis. This enables online visualization and allows investigation of niches in the developing biofilm. Microbial interrelationship, investigation of antimicrobial agents or the expression of specific genes, are of the many experimental setups that can be investigated in the flow cell system.

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Protocol describing the application of a flow cell system for growing and analyzing microbial biofilms for Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM).

흐름 세포 녹농균 및 Saccharomyces cerevisiae의의 Biofilm

Many microbial cells have the ability to form sessile microbial communities defined as biofilms that have altered physiological and pathological ...

연구

면역학 및 감염병학

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

Pseudomonas aeruginosa (PA) infections result in significant morbidity and mortality in hosts with compromised immune systems, such as patients with leukemia, severe burn wounds, or organ transplants1. In patients at high-risk for developing PA bloodstream infections, the gastrointestinal (GI) tract is the main reservoir for colonization2, but the mechanisms by which PA transitions from an asymptomatic colonizing microbe to an invasive, and often deadly, pathogen are unclear. Previously, we performed in vivo transcription profiling experiments by recovering PA mRNA from bacterial cells residing in the cecums of colonized mice 3 in order to identify changes in bacterial gene expression during alterations to the host&#x2019;s immune status.
As with any transcription profiling experiment, the rate-limiting step is in the isolation of sufficient amounts of high quality mRNA. Given the abundance of enzymes, debris, food residues, and particulate matter in the GI tract, the challenge of RNA isolation is daunting. Here, we present a method for reliable and reproducible isolation of bacterial RNA recovered from the murine GI tract. This method utilizes a well-established murine model of PA GI colonization and neutropenia-induced dissemination4. Once GI colonization with PA is confirmed, mice are euthanized and cecal contents are recovered and flash frozen. RNA is then extracted using a combination of mechanical disruption, boiling, phenol/chloroform extractions, DNase treatment, and affinity chromatography. Quantity and purity are confirmed by spectrophotometry (Nanodrop Technologies) and bioanalyzer (Agilent Technologies) (Fig 1). This method of GI microbial RNA isolation can easily be adapted to other bacteria and fungi as well.

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

A reliable method for the RNA isolation of Pseudomonas aeruginosa recovered from murine cecums is described. The RNA recovered is of sufficient quantity and quality for subsequent qPCR, transcription profiling, and RNA Seq experiments. This technique can be adapted for RNA isolation of other intestinal microbes.

의 RNA 격리 녹농균 Murine 위장관을 Colonizing

Pseudomonas aeruginosa (PA) infections result in significant morbidity and mortality in hosts with compromised immune systems, such as patients with ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological deficiencies. GVHD is caused by mature alloreactive T cells present in the bone marrow graft that are infused into the recipient and cause damage to host organs. However, in mice, T cells must be added to the bone marrow inoculum to cause GVHD. Although extensive work has been done to characterize T cell responses post transplant, bioluminescent imaging technology is a non-invasive method to monitor T cell trafficking patterns in vivo. 
Following lethal irradiation, recipient mice are transplanted with bone marrow cells and splenocytes from donor mice. T cell subsets from L2G85.B6 (transgenic mice that constitutively express luciferase) are included in the transplant. By only transplanting certain T cell subsets, one is able to track specific T cell subsets in vivo, and based on their location, develop hypotheses regarding the role of specific T cell subsets in promoting GVHD at various time points. At predetermined intervals post transplant, recipient mice are imaged using a Xenogen IVIS CCD camera. Light intensity can be quantified using Living Image software to generate a pseudo-color image based on photon intensity (red = high intensity, violet = low intensity). 
Between 4-7 days post transplant, recipient mice begin to show clinical signs of GVHD. Cooke et al.1 developed a scoring system to quantitate disease progression based on the recipient mice fur texture, skin integrity, activity, weight loss, and posture. Mice are scored daily, and euthanized when they become moribund. Recipient mice generally become moribund 20-30 days post transplant. 
Murine models are valuable tools for studying the immunology of GVHD. Selectively transplanting particular T cell subsets allows for careful identification of the roles each subset plays. Non-invasively tracking T cell responses in vivo adds another layer of value to murine GVHD models.

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Murine bone marrow transplantation is a widely used technique to study immunological mechanisms governing graft-versus-host disease in humans. The ability to monitor T cell trafficking patterns in vivo allows for detailed analysis of the development and perpetuation of T cell responses during graft-versus-host disease.

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및<em&gt; 생체 내</emMHC 검색 손쥐 모델을 사용&gt; T 셀 모니터링

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

There is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from cystic fibrosis (CF) patients. Existing methods rely on single or a few isolates grown aerobically and planktonically. Predetermined cut-offs are used to define whether the bacteria are sensitive or resistant to any given antibiotic1. However, during chronic lung infections in CF, P. aeruginosa populations exist in biofilms and there is evidence that the environment is largely microaerophilic2. The stark difference in conditions between bacteria in the lung and those during diagnostic testing has called into question the reliability and even relevance of these tests3.
 Artificial sputum medium (ASM) is a culture medium containing the components of CF patient sputum, including amino acids, mucin and free DNA. P. aeruginosa growth in ASM mimics growth during CF infections, with the formation of self-aggregating biofilm structures and population divergence4,5,6. The aim of this study was to develop a microtitre-plate assay to study antimicrobial susceptibility of P. aeruginosa based on growth in ASM, which is applicable to both microaerophilic and aerobic conditions.
 An ASM assay was developed in a microtitre plate format. P. aeruginosa biofilms were allowed to develop for 3 days prior to incubation with antimicrobial agents at different concentrations for 24 hours. After biofilm disruption, cell viability was measured by staining with resazurin. This assay was used to ascertain the sessile cell minimum inhibitory concentration (SMIC) of tobramycin for 15 different P. aeruginosa isolates under aerobic and microaerophilic conditions and SMIC values were compared to those obtained with standard broth growth. Whilst there was some evidence for increased MIC values for isolates grown in ASM when compared to their planktonic counterparts, the biggest differences were found with bacteria tested in microaerophilic conditions, which showed a much increased resistance up to a &gt;128 fold, towards tobramycin in the ASM system when compared to assays carried out in aerobic conditions.
 The lack of association between current susceptibility testing methods and clinical outcome has questioned the validity of current methods3. Several in vitro models have been used previously to study P. aeruginosa biofilms7, 8. However, these methods rely on surface attached biofilms, whereas the ASM biofilms resemble those observed in the CF lung9 . In addition, reduced oxygen concentration in the mucus has been shown to alter the behavior of P. aeruginosa2 and affect antibiotic susceptibility10. Therefore using ASM under microaerophilic conditions may provide a more realistic environment in which to study antimicrobial susceptibility.

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Current diagnostic antimicrobial susceptibility testing relies on the planktonic growth of isolates in nutrient rich, aerobic conditions. Here, we employ an alternative artificial sputum medium to study antimicrobial susceptibility of Pseudomonas aeruginosa biofilms under both aerobic and microaerophilic conditions more representative of the cystic fibrosis lung.

위반 항생제 효능을 테스트하는 인공 가래 매체의 사용<em&gt; 녹농균</em&gt; 낭성 섬유증의 폐 관련성이 높은 조건에서

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model itself. Early phases of inflammation and infection have been widely studied by using the Pseudomonas aeruginosa agar-beads mouse model, while only few reports have focused on the long-term chronic infection in vivo. The main challenge for long term chronic infection remains the low bacterial burden by P. aeruginosa and the low percentage of infected mice weeks after challenge, indicating that bacterial cells are progressively cleared by the host.
This paper presents a method for obtaining efficient long-term chronic infection in mice. This method is based on the embedding of the P. aeruginosa clinical strains in the agar-beads in vitro, followed by intratracheal instillation in C57Bl/6NCrl mice. Bilateral lung infection is associated with several measurable read-outs including weight loss, mortality, chronic infection, and inflammatory response. The P. aeruginosa RP73 clinical strain was preferred over the PAO1 reference laboratory strain since it resulted in a comparatively lower mortality, more severe lesions, and higher chronic infection. P. aeruginosa colonization may persist in the lung for over three months. Murine lung pathology resembles that of CF patients with advanced chronic pulmonary disease.
This murine model most closely mimics the course of the human disease and can be used both for studies on the pathogenesis and for the evaluation of novel therapies.

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

We describe the agar-beads method to establish persistent long-term chronic Pseudomonas aeruginosa airway infection in the mouse model.

장기 만성<em&gt; 녹농균</em마우스의&gt;기도 감염

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. Here we have developed a mouse lung injury model by intra-tracheal injection of bacteria Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa or PA). Using this model, we were able to show lung inflammation at the early phase of injury. In addition, alveolar epithelial barrier leakiness was observed by analyzing bronchoalveolar lavage (BAL); and alveolar cell death was observed by Tunel assay using tissue prepared from injured lungs. At a later phase following injury, we observed cell proliferation required for the repair process. The injury was resolved 7 days from the initiation of P. aeruginosa injection. This model mimics the sequential course of lung inflammation, injury and repair during pneumonia. This clinically relevant animal model is suitable for studying pathology, mechanism of repair, following acute lung injury, and also can be used to test potential therapeutic agents for this disease.

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

We have developed a mouse lung injury model by intra-tracheal injection of bacteria Pseudomonas aeruginosa. This model mimics lung injury during pneumonia and is clinically relevant.

녹농균 유발 폐 손상 모델

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. ...

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

Studying host-pathogen interaction enables us to understand the underlying mechanisms of the pathogenicity during microbial infection. The prognosis of the host depends on the involvement of an adapted immune response against the pathogen1. Immune response is complex and results from interaction of the pathogens and several immune or non-immune cellular types2. In vitro studies cannot characterise these interactions and focus on cell-pathogen interactions. Moreover, in the airway3, particularly in patients with suppurative chronic lung disease or in mechanically ventilated patients, polymicrobial communities are present and complicate host-pathogen interaction. Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans are both problem pathogens4, frequently isolated from tracheobronchial samples, and associated to severe infections, especially in intensive care unit5. Microbial interactions have been reported between these pathogens in vitro but the clinical impact of these interactions remains unclear6. To study the interactions between C. albicans and P. aeruginosa, a murine model of C. albicans airways colonization, followed by a P. aeruginosa-mediated acute lung infection was performed.

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

While in vitro study of host-pathogen interactions allow the characterization of specific immune responses, in vivo models are required to observe the effects of complex responses. Using Candida albicans exposure followed by Pseudomonas aeruginosa-mediated lung infection, we established a murine model of microbial interactions involved in ventilator-associated pneumonia pathogenicity.

미생물 커뮤니티를 공부<em&gt; 생체</em&gt; 사이에 호스트 매개 상호 작용의 모델<em&gt; 칸디다 알비 칸스</em&gt; 및<em&gt; 녹농균</em&gt; 항공에

Studying host-pathogen interaction enables us to understand the underlying mechanisms of the pathogenicity during microbial infection. The prognosis of ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is imperative to design experiments using human cells and tissues. An advantage of organ culture is maintenance of three-dimensional (3D) structural organization and extracellular matrix. The goal of the method described here is successful establishment of ex vivo human gestational tissue organ cultures and their healthy culture maintenance for 72-96 hr. The protocol details the immediate processing of research-consented, placental and decidual specimens fresh from the operating suite. These are abundant specimens that would otherwise be discarded. Detailed instructions on the sterile collection of these samples, including morphologic details on how to select appropriate tissues to establish 3D organ cultures, is provided. Placental villous and decidual tissues are microdissected into 2-3 mm3 pieces and placed separately on matrix-lined transwell filters and cultured for several days. Villous and decidual organ cultures are well suited for the study of human host-pathogen interaction. As compared to other model organisms, these human cultures are particularly advantageous to examine mechanism of infection for pathogens that demonstrate variable patterns of host specificity. As an example, we demonstrate infection of placental and decidual organ cultures with the clinically relevant, facultative intracellular bacterial pathogen Listeria monocytogenes.

A simple method to establish primary human placental (villous) and decidual organ cultures is described. Villous and decidual organ cultures are invaluable tools for studying pathogenesis at the human maternal-fetal interface. Infection with the facultative intracellular bacterium Listeria monocytogenes is demonstrated.

인간의 태반과 탈락 오르간 문화는 산모 - 태아 인터페이스에서 감염을 연구하는

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Visualizing the Effects of Sputum on Biofilm Development Using a Chambered Coverglass Model

Biofilms consist of groups of bacteria encased in a self-secreted matrix. They play an important role in industrial contamination as well as in the development and persistence of many health related infections. One of the most well described and studied biofilms in human disease occurs in chronic pulmonary infection of cystic fibrosis patients. When studying biofilms in the context of the host, many factors can impact biofilm formation and development. In order to identify how host factors may affect biofilm formation and development, we used a static chambered coverglass method to grow biofilms in the presence of host-derived factors in the form of sputum supernatants. Bacteria are seeded into chambers and exposed to sputum filtrates. Following 48 hr of growth, biofilms are stained with a commercial biofilm viability kit prior to confocal microscopy and analysis. Following image acquisition, biofilm properties can be assessed using different software platforms. This method allows us to visualize key properties of biofilm growth in presence of different substances including antibiotics.

This protocol describes the visualization of biofilm development following exposure to host-factors using a slide chamber model. This model allows for direct visualization of biofilm development as well as analysis of biofilm parameters using computer software programs.

챔버의 coverglass 모델을 사용하여 바이오 필름 개발에 객담의 효과를 시각화

Biofilms consist of groups of bacteria encased in a self-secreted matrix. They play an important role in industrial contamination as well as in the ...

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a major nosocomial pathogen of increasing relevance to human health and disease, particularly in the setting of chronic wound infections in diabetic and hospitalized patients. There is an urgent need for chronic infection models to aid in the investigation of wound pathogenesis and the development of new therapies against this pathogen. Here, we describe a protocol that uses delayed inoculation 24 hours after full-thickness excisional wounding. The infection of the provisional wound matrix present at this time forestalls either rapid clearance or dissemination of infection and instead establishes chronic infection lasting 7&#8211;10 days without the need for implantation of foreign materials or immune suppression. This protocol mimics a typical temporal course of post-operative infection in humans. The use of a luminescent P. aeruginosa strain (PAO1:lux) allows for quantitative daily assessment of bacterial burden for P. aeruginosa wound infections. This novel model may be a useful tool in the investigation of bacterial pathogenesis and the development of new therapies for chronic P. aeruginosa wound infections.

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

We describe a delayed inoculation protocol for generating chronic wound infections in immunocompetent mice.

만성 슈도모나스 녹농증 상처 감염의 지연 접종 모델

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a major nosocomial pathogen of increasing relevance to human health and disease, particularly in the setting of ...

라이트 사이드에와 서: Vivo에서 당뇨병 털 Murine 모델에 만성 상처에서 녹 농 균 Biofilm 감염의 모니터링

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흐름 세포 녹농균 및 Saccharomyces cerevisiae의의 Biofilm

의 RNA 격리 녹농균 Murine 위장관을 Colonizing

이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및

위반 항생제 효능을 테스트하는 인공 가래 매체의 사용

장기 만성

녹농균 유발 폐 손상 모델

미생물 커뮤니티를 공부

인간의 태반과 탈락 오르간 문화는 산모 - 태아 인터페이스에서 감염을 연구하는

챔버의 coverglass 모델을 사용하여 바이오 필름 개발에 객담의 효과를 시각화

만성 슈도모나스 녹농증 상처 감염의 지연 접종 모델