Carbon-11은 유기 분자의 풍부와 20 분의 짧은 반감기 때문에 양전자 방출 단층 촬영에서 가장 널리 사용되는 방사성 동위원소 중 하나입니다. 이 비디오에서는 고체 위상 추출 카트리지를 사용하여 효율적인 탄소-11 방사성 라벨링 기술을 보여줍니다. 기존의 방법에 비해 카트리지 기반 기술은 HPLC의 사용을 없애고, 방사능 시간을 단축하고, 합성 신뢰성을 향상시키고, 자동화 프로세스를 단순화하며, 좋은 제조 관행인 GMP를 준수합니다.
카트리지 기반 기술은 알츠하이머 병으로 고통받는 환자의 뇌에서 아밀로이드 플라크의 생체 내 이미징에 사용되는 PET 추적자 인 C11 PiB의 방사선 합성에서 여기에서 입증됩니다. 최근에는 대사트로피 글루타민산체 수용체 5형뿐만 아니라 다른 탄소-11 라벨 트레이서의 이미징을 위한 PET 트레이서인 C11 ABP688의 방사합성에 3-in-1 기술을 적용했습니다. 아세트산의 0.2-어금니 450밀리리터를 0.2-해저 용액의 50밀리리터와 아세테이트 나트륨의 0.2-어금니 를 결합하여 pH 3.7에서 아세테이트 버퍼를 완충제로 준비합니다.
pH 스트립 또는 pH 미터로 버퍼의 pH를 확인합니다. 그런 다음 절대 에탄올 12.5 밀리리터와 아세테이트 버퍼 87.5 밀리리터를 100밀리리터 병에 결합하여 12.5%의 수성 에탄올 용액을 세척용으로 만듭니다. 절대 에탄올 15밀리리터와 아세테이트 버퍼 85밀리리터를 100밀리리터 병에 담아 세척 2개로 15%의 수성 에탄올 용액을 만듭니다.
절대 에탄올 5밀리리터와 아세테이트 버퍼 5밀리리터를 결합하여 50%의 수성 에탄올 용액을 최종 용액으로 만들고 이 솔루션의 2.5 밀리리터를 10밀리리터 주사기로 그립니다. tC18 카트리지를 조건부로 삼기위해 주사기를 사용하여 10 밀리리터의 물을 전달하고 5밀리리터의 아세톤이 카트리지를 통과합니다. 1분 동안 분당 50 밀리리터에서 질소 스트림으로 카트리지를 건조시다.
Eppendorf 튜브에서, 전구체 6-OH-BTA-0의 2 밀리그램을 무수아 아세톤의 1 밀리리터에 녹입니다. Luer-tip, 250 마이크로리터, 정밀 유리 주사기를 아래쪽으로 잡고 전구체 용액의 100 마이크로리터를 철회한 다음 50 마이크로리터의 에어 쿠션을 인출합니다. 바늘을 제거하고 주사기를 눌러 주사기의 용액 위에 공기 쿠션이 있는지 확인합니다.
전구체 용액을 여성 끝에서 tC18 카트리지에 천천히 플런저를 아래로 밀어 내립니다. 더 이상 공기를 밀어하지 마십시오. 합성 모듈에서 표준 5포트 일회용 매니폴드 매니폴드를 안전하고 조립합니다.
포트 1에는 두 개의 위치가 있습니다. 수평 입구를 20밀리리터 주사기가 장착된 자동 디스펜서에 연결합니다. 수직 입구를 병에 연결하여 세척합니다.
C11 메틸 트리플랫을 생성하는 모듈의 출력을 매니폴드 2개를 포트합니다. 포트 3과 4 사이에 전구체 6-OH-BTA-0으로로드된 tC18 카트리지를 설치합니다. 포트 5에는 두 개의 위치가 있습니다.
수평 콘센트를 폐병과 수직 콘센트에 연결하여 멸균 필터를 통해 트레이서 수집을 위한 멸균 바이알에 연결합니다. 납 차폐 된 핫 셀에서 Teflon 라인을 사용하여 포트 2를 통해 매니폴드에 C11 메틸 트리플랫을 전달하고 분당 출력 흐름 20 밀리리터에서로드 된 tC18 카트리지를 통과하십시오. C11 메틸 트리플랫 모듈은 포트 3및 4를 통해 폐기물 병으로의 흐름을 조절합니다.
방사능 검출기에 의해 모니터링되는 모든 방사능이 tC18 카트리지에 옮겨지고 갇히면 포트 2를 닫아 가스의 흐름을 중지하십시오. 카트리지가 2분 동안 앉아서 반응을 완성하게 합니다. 그런 다음 포트 1을 통해 100 밀리리터 병에서 분당 100 밀리리터로 19 밀리리터의 세척용액을 인출합니다.
18.5 밀리리터의 세척용 액액을 디스펜서에서 tC18 카트리지를 통해 포트 3과 4개를 통해 분당 50밀리리터로 폐기물 병에 넣습니다. 분리 효율을 떨어뜨릴 수 있기 때문에 매니폴드에 기포가 없는지 확인합니다. 철회 및 디스펜싱을 매번 18.5 밀리리터의 세척한 용액과 총 92.5밀리리터가 tC18을 통과하여 4회 반복합니다.
포트 1의 입력 라인을 세척 1개에서 2개로 전환합니다. 인출 및 디스펜싱을 18.5 밀리리터의 세척 2개의 용액과 tC18을 통과하는 총 55.5 밀리리터의 총 부피를 반복합니다. 최종 바이알을 향해 밸브 5를 토글.
디스펜서에서 라인을 분리하고 최종 용광액의 2.5 밀리리터와 7.5 밀리리터의 공기가 포함된 10밀리리터 주사기에 연결합니다. 주사기를 아래쪽으로 잡고, 최종 용액을 수동으로 밀어 내고, 최종 용액을 수동으로 밀어 내고, 3번과 4번 포트를 통해 tC18 카트리지를 통해 공기를 밀어내고 멸균 필터를 통해 트레이서 수집을 위한 멸균 바이알로 밀어 넣습니다. 주사기를 멸균 인산염 버퍼의 10 밀리리터를 포함하는 것으로 전환하고 tC18 카트리지를 통해 전체 부피를 멸균 바이알로 밀어 넣습니다.
주사기를 분리하고 동일한 주사기를 사용하여 10 밀리리터의 공기로 라인을 플러시합니다. 1 밀리리터 주사기를 사용하여, 시험 판상 품질 관리 절차, 세균 성 내독소 테스트 및 불임 검사를 위한 견본을 철회하십시오. 시험방출 품질 관리 절차를 수행하기 위해 먼저 UV 방사능 검출기 및 반전 상열이 장착된 분석 HPLC 시스템에 의해 추적자의 방사성 화학적 정체성, 방사성 화학 순도, 화학 순도 및 어금니 활성을 결정합니다.
6-OH-BTA-0 및 6-OH-BTA-1의 보존 시간을 결정하고, 각 화합물의 함량을 정량화하기 위해 계측기를 보정한다. 모세관 기둥이 장착된 분석 가스 크로마토그래피 시스템에 의해 잔류 용매 함량을 결정한다. 아세톤 및 에탄올의 보존 시간을 결정하고 계측기를 보정하여 각 용매의 함량을 정량화합니다.
이 연구는 C11 메틸 트리플랫을 가진 6-OH-BTA-0 전구체의 C11-메틸화에 의한 C11 PiB의 방사선 합성을 수행하였다. C11 PiB의 품질 관리 분석 HPLC는 방사성 화학 순도가 98%였으며 UV 크로마토그램의 6-OH-BTA-0 전구체 및 6-OH-BTA-1 트레이서 피크의 보유 시간은 각각 3.6 분 과 5.9 분이었다. UV 미량의 분석은 다른 비방사성 불순물이 없는 경우 허용 가능한 1.3 마이크로그램 의 허용 한계 보다 낮은 잔류 전구체 농도를 나타낸다.
이는 추적자의 방사성 화학적 및 화학적 순도가 임상 PET 연구에 허용된다는 것을 나타냅니다. 6-OH-BTA-0 전구체 양을 0.1 밀리그램에서 0.3 밀리그램으로 증가시켜 방사성 화학적 수율은 18.1%에서 32.1%로 개선되어 최종 제품에서 전구체의 약간 높은 양을 희생하였다. 이 기술은 전구체와 방사성 라벨이 부착된 제품 간의 극성에 적합한 차이를 가진 많은 다른 시스템에 적용되어야 합니다.
방사성 동위원소와 관련된 모든 조작은 방사성 물질을 처리하기에 충분한 훈련을 가진 인력에 의해 납 차폐 된 뜨거운 세포에서 수행되어야합니다.
