Immunostimulatory 에이전트 평가: 림프 조직 추출 및 주입 경로-종속 수지상 세포 활성화

이 절차의 전반적인 목표는 마우스에서 내선 림프절을 격리하는 데 필요한 독특한 기술을 숙지하는 것입니다. 수술은 마우스의 6개의 다른 경로에 면역 자극제 물질을 주입한 후에 수행되었습니다. 이 연구에서는 나노 크기의 구조를 형성하는 새로운 종류의 물질을 사용했습니다.

계면활성제는 친성모성 헤드 그룹과 소수성 꼬리로 구성됩니다. 그 형태 구형 미셀 또는 microphage 분리로 인해 다른 이차 구조. 우리는 DNA인 생체 거대 분자에 이 속성을 이용했습니다.

여기에 나타난 DNA 수륙양용은, A, C, G, T와 같은 일반 뉴클레오티드로서, 지질 변형 신경세포 뉴클레오베이스가 소수성 단위로 작용하는 동안 소수성 블록을 가지고 있다. 수정된 올리고는 대규모 옥토그램에서 DNA 신디사이저에 의해 합성되었다. 양용성 지질 DNA는 나노 크기의 구형 미켈을 자발적으로 형성한다.

미셀이 형성되면 DNA는 직경이 약 10 나노미터인 빈 운반체로 단일 좌초 상태로 유지됩니다. 면역 자극제를 가진 담체를 장착하기 위하여는, 전화와 같은 수용체 9 부관 즉 eCpG로 DNA 순서를 확장하는 간단한 문제입니다. 지질 DNA 및 eCpG 염기는 여기에 그러므로 미셀의 외부 표면은 CpG 서열로 저하됩니다.

그런 다음 이 면역 자극 나노 입자를 INP로 지정합니다. 면역 반응을 위한 INP의 적절한 방법을 결정하기 위해 우리는 64개의 주사 경로에서 마우스에 INP를 주입하고 결과적으로 적절한 림프절 조직을 분석하였다. 자세한 주입 지침은 2012년 찰스 리버가 발행한 JOB 기사를 찾아보시기 바랍니다.

이 비디오의 주요 장점은 심강절을 얻는 방법을 시각적으로 보여주는 것입니다. 비디오는 많은 사람들이 장기를 고립시키는 데 어려움을 발견하는 중질 림프절의 위치를 명시적으로 보여줍니다. 모든 실험은 상하이 공중 보건 임상 센터 또는 울산 의과 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 지침에 따라 수행되었습니다.

이 부분은 면역 분석에 중요한 기관 또는 조직의 특정 위치를 보여줍니다. 비장과 두 개의 림프절이 격리됩니다. 우선, 생쥐는 이산화탄소 흡입 안락사에 의해 희생되었고, 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 지도에 따라 고통을 최소화하기 위한 모든 노력이 이루어졌습니다.

지금부터 장기를 찾아 그들을 격리합시다. 먼저 작동 데스크의 마우스를 마우스 손바닥에 4개의 핀으로 올바르게 고정합니다. 해부 부위를 알코올로 살균합니다.

마우스 복부의 바닥을 큰 크기의 가위로 바깥쪽 덮개를 해부합니다. 집게를 사용하여 부착의 양면을 열고 작동 테이블에 핀으로 고정합니다. 잉구인 림프절의 위치는 왼쪽 다리를 향해 내려가는 혈관의 결합을 찾아서 노출됩니다.

혈관의 모양은 기울어진 알파벳 문자 Y.가 집게로 층을 발견하고 피부에서 당겨 처럼 보입니다. 내부 장기를 노출하기 위해 작은 가위로 회중을 잘라냅니다. 집게를 사용하여 창자를 오른쪽으로 이동한 다음 복부의 왼쪽, 왼쪽 상단에 표시되는 모양의 비장으로 감쌉니다.

비장은 쉽게 방해하기 쉽기 때문에 시술 중에 추가주의가 필요합니다. 마지막으로이 비디오의 핵심 포인트 : 중간 림프절을 수확. 그것은 그것의 작은 크기와 다소 숨겨진 위치 때문에 보기 어려운 폐의 상부 아래에 위치 하 고 있습니다.

작은 가위와 집게를 사용하여 부위를 조심스럽게 노출시합니다. 갈비뼈와 다이어프램의 양면을 잘라냅니다. 가슴 위에 갈비뼈를 잘라.

절차 도중 반투명 한 중질 림프절을 찾아 사이트를 장님수 있기 때문에 손상 심장과 혈관을 피하십시오. 우연히 혈관이 터지면 거즈로 혈액을 부드럽게 닦아냅니다. 폐의 왼쪽을 잡고 부드럽게 폐 아래를 볼 수있는 다른 쪽으로 뒤집어.

집게를 사용하여 중간 림프절을 당깁니다. 중간 림프절을 수확 한 후 원치 않는 조직이 분석에 영향을 줄 수 있기 때문에 림프절을 둘러싼 모든 지방과 혈액을 완벽하게 제거해야합니다. 마지막으로, 미디어로 가득 페트리 접시에 있는 모든 고립된 장기.

총 0.1배 10에서 제6세포까지 이 흐름 세포측정에 대해 분석하였다. 힘 게터와 크기 게터 백혈구 인구에 기초하여 문이 있었고 그 세포는 어두운 염색에 의해 배제되었다. INP 주입 후 24시간 후 64개의 사출 경로, 비장, 잉구인림프절 및 중질 림프절은 유동 세포측정에 의한 DC 활성화를 수확하고 분석했다.

유동 세포측정 DC 모집단의 전략에 기초하여 살아있는 백혈구에서 CD11C 양성 및 계보 음성 세포로 정의하였다. 특히, INP의 비강 내 분사는 대조군PBS에 비해 중간 림프절에서 CD40, 80, 86 발현에서 상당한 증가를 촉진시켰다. 따라서, 이 데이터는 INP의 비강 내 주입이 폐내 면역의 향상을 위한 점막 보조로 사용될 수 있다는 것을 건의했습니다.