꿀 꿀벌 (Apis mellifera) 노동자의 Hypopharyngeal 동맥 Acinus 크기 측정

이 방법은 가난한 영양과 hypoinineal 성장 및 발달 사이 링크에 관하여 꿀벌 영양 분야의 중요한 질문에 대답하는 것을 도울 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 꿀벌 저반신샘을 쉽게 염색하고 시각화하고 측정하는 데 사용할 수 있다는 것입니다. 일반적으로, 이 방법에 새로운 개별은 저인두 땀샘이 시각적 지도 없이 찾아내고 해부하기 어려울 수 있기 때문에 투쟁할 것입니다.

절차를 시작하기 전에, 유리 페트리 접시에 녹은 시원한 설정 왁스를 부어. 갓 준비된 Giemsa 얼룩 20개, 식염수 50~100마이크로리터를 간호사 비원당 1개의 현미경 슬라이드의 인접한 우물에 넣습니다. 왁스가 설정되면 10mm 마이크로 스프링 가위를 사용하여 첫 번째 꿀벌에서 머리를 제거하고 집게, 해부 현미경 및 왁스 조각 펜을 사용하여 왁스 해부 플레이트에 헤드 프론트 사이드업을 포함시합니다.

눈과 입에 핀을 삽입하여 머리를 플레이트에 고정시키고 핀 비스에 고정된 날카롭고 부서질 수 있는 면도날을 사용하여 얼굴 판의 양쪽에 눈과 하악을 2~3mm 절개합니다. 얼굴 플레이트 아래에 마이크로 가위를 부드럽게 실행하고 안테나와 뇌 사이에 실행되는 안테나 신경을 잘라냅니다. 미세한 집게를 사용하여 입으로 얼굴 판을 잡고 미세 한 포인트 집게와 핀으로 왁스에 티슈 페이스 사이드 다운을 고정하십시오.

다음으로, 머리의 열린 섹션에 PBS의 파이펫 20 마이크로 리터. hypo반인두 땀샘은 진주의 끈처럼 보이며 그대로 있는 경우 뇌 위에 있습니다. 매우 미세한 포인트 포셉을 사용하여, 미세 한 슬라이드에 Giemsa 얼룩에 즉각적인 침지 에 땀샘 중 하나를 부드럽게 수확.

5 분 잠복 후, 같은 슬라이드에 식염수의 수영장에 동맥을 전송, 필요에 따라 마이크로 가위와 현미경아래 작은 조각으로 선을 절단. 땀샘을 측정하려면 광 현미경에 대한 측정 프로그램을 열고 10 배율을 선택합니다. 슬라이드를 현미경 단계에 놓고 눈조각을 통해 땀샘을 수동으로 찾습니다.

배율을 60~80배로 늘리고 새로운 배율에서 땀샘의 초점을 수동으로 조정합니다. 또한 모니터의 라이브 이미지에 땀샘의 초점을 조정하고 이미지 이름과 샘플 설명을 이미지 이름 상자에 입력합니다. 이미지 획득을 클릭하여 땀샘과 분석 탭 아래에서 이미지를 얻고 영역 도구를 선택하고 디스플레이 탭에서 값을 선택 취소합니다.

단위도 선택 취소됩니다. 다른 모든 설정을 기본값으로 설정합니다. acini를 측정하려면 가능한 한 신중하게 한 번에 하나의 acinus 둘레를 추적하면서 왼쪽 마우스 버튼을 계속 클릭하거나 누를 수 있습니다.

단일 이미지의 모든 acini가 측정되면 보고서 만들기를 선택하고 적절한 옵션이 선택되었는지 확인하고 내보내기를 클릭합니다. 그런 다음 보고서를 적절한 형식으로 저장하고 작업 영역과 자료를 적절하게 정리합니다. 스테인드 조직에서 아시니의 적절한 대조와 정의 된 가장자리를 찾기가 어렵습니다.

얼룩진 hypoinineal 땀샘에서, 아시니의 가장자리는 얼룩진 조직과 백색 배경 사이 향상된 대비 때문에 날카롭습니다. 저인두 땀샘은 꿀을 단독으로 먹이는 꿀벌에 비해 꽃가루와 혼합 된 꿀을 먹이는 꿀벌에서 시간이 지남에 따라 자랍니다. 저인두 선 크기는 또한 제공된 꽃가루의 종류에 민감합니다.

예를 들어, 사막이나 아몬드 꽃가루를 먹이는 꿀벌은 동등한 크기의 땀샘을 보여주고, 남동부 꽃가루 식단을 먹이는 꿀벌은 꿀만 먹이는 꿀벌보다 크지만 아몬드 나 사막 꽃가루를 먹이는 꿀벌의 땀샘보다 작은 땀샘을 나타낸다. 이 절차를 시도하는 동안, 조심스럽게 땀샘을 해부하고 그들을 과도하게 또는 과소 얼룩하지 않는 것을 기억하는 것이 중요합니다. Giemsa 얼룩으로 일하는 것은 위험할 수 있으며 얼룩을 불길에서 멀리 유지하고 적절한 폐기를 사용하고 장갑과 눈 보호를 착용하는 것과 같은 예방 조치는 항상 이 절차를 수행하는 동안 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.