Planarian Locomotor 속도 테스트는 운동성에 영향을 미칠 수 있는 다양한 생물학적 수정 제에 대한 자극제 및 가능한 철수 효과를 신속하게 평가하기위한 수단입니다. 이 에세이는 쉽게 제어되며 가장 기본적인 연구 환경에서도 신뢰할 수 있는 행동 데이터를 생성하는 간단하고 접근 가능한 방법을 제공합니다. planarian 신경계는 중앙 집중식 초보적 인 뇌, 양측 대칭 및 유사 신경 전달 물질 시스템을 가지고 있기 때문에, 이러한 유기체를 사용하여 행동 연구는 가능한 척추 동물 반응에 전임상 통찰력을 제공합니다.
실험은 생리학적 경로 수정자, 약물 또는 유전자 변형 된 planarians에 의해 더 영향을 받아 관련 생물학적 메커니즘에 대한 통찰력을 제공 할 수 있습니다. 컨테이너 간의 전송이 스트레스를 받지 않도록 평면을 가지고 실험실 구성원 간의 그리드 라인 곡선을 표준화하는 것이 중요합니다. 이 동작 에세이 실험에서 일관된 결과를 얻을 수 있는 가장 좋은 방법은 숙련된 사용자가 이를 수행하는 방법을 보는 것입니다.
평면 문화를 설정 한 후, 다진 유기농 삶은 계란 또는 혼합 유기농 쇠고기 간의 정기적 인 일주일에 두 번 정기적으로 벌레 광고 리비타를 공급 1 ~ 2 시간 동안. 먹이후, 용기에서 더러운 물을 제거하고 평평한 수채화 페인트 브러시를 사용하여 음식 파편과 점액을 용기에 따라 종이 타월로 옮겼습니다. 신선한 샘물과 부드러운 소용돌이 또는 동요를 사용하여 평면을 빼내고 벌레를 깨끗한 용기로 제거하십시오.
새로운 접시로 의전을 용이하게하고 조심스럽게 전송 물을 decant 이전하기 위해 이전 용기에 부착 남아있는 모든 평면도아래에 넓은 보어 파이펫 팁을 밀어 넣습니다. 그런 다음 새로운 용기에 새 용기에 있는 평면을 신선한 샘물로 덮습니다. Planarian Locomotor 속도 테스트를 수행하기 위해 먼저 5~10일 의 굶주려 있는 평면도가 완전하고 색소된 머리와 꼬리로 완전히 형성되도록 하십시오.
플래너가 준비되면 10센티미터 직경의 페트리 접시를 실험군당 0.5센티미터 곱으로 미리 적층된 격자 용지 한 장에 넣고 대조군에 대한 순수하지 않은 샘물 20밀리리터 또는 각 요리에 적합한 천연물을 함유한 20밀리리터의 봄물을 첨가한다. 준비된 운동 속도 자극 접시 위에 카메라를 배치하고 실험 화합물의 적절한 농도를 포함하는 순수한 샘물 또는 샘물의 5~10밀리리터를 적절히 크기의 습관용기에 넣습니다. 다음으로, 작은 깨끗한 수채화 페인트 브러시를 사용하여 양문화 용기에서 준비된 습관 용기로 한 마리의 평면을 부드럽게 옮기고 planarian이 용기의 용액에 2 분 동안 습관화 할 수 있도록합니다.
연구를 통해 기획자들은 브러시로 이동하고 동물을 강요하지 않고 조심스럽게 들어올릴 수 있습니다. 습관기간이 끝나면 브러시를 사용하여 기획관을 상습 용기와 동일한 용액을 포함하는 준비된 운동 속도 자극 접시의 중심으로 평면을 조심스럽게 옮기고 카메라를 시작하여 10~11분의 무브먼트를 기록한다. 습관 기간이 끝날 때 철수의 효과를 테스트하려면, 만 샘물을 포함하는 5 센티미터 접시에 평면을 헹구는다.
웜을 신선한 샘물이 들어있는 준비된 운동 속도 접시의 중심으로 옮기기 전에 카메라를 시작하여 10~11분의 움직임을 기록합니다. 카메라 설정을 사용하면 평면 및 그리드 용지를 명확하게 볼 수 있으며 실험 기간 동안 동물의 진행 상황을 정확하게 평가할 수 있습니다. 데이터 컬렉션에는 교차된 총 그리드 선 수와 실험의 분당 누적 총 선 수가 포함되어야 합니다.
각 시험의 결과를 표준화하기 위해, 플라나리안 운동 속도 실행은 일치하는 제어 웜의 진행률에 따라 상자의 수가 교차함에 따라 계산하고 플롯할 수 있습니다. 벤치마크로, 샘물에서 플래너리는 일반적으로 3 분 안에 약 25 상자를 커버합니다. 다양한 시험 시약 농도를 검사하여 관심 있는 시험 화합물에 대응하여 평면 운동성을 결정할 수 있다.
금단 데이터는 동물이 검사되는 바이오 변조 생성물에 습관화된 후 샘물 제어에 비해 샘물에서 교차하는 그리드 라인의 수를 정량화함으로써 평가될 수 있다. 스프링 워터 제어 평면은 실험 기간 동안 그리드 라인을 통해 이동합니다. 그러나 때때로, 시험 계획자는 테스트되는 제품에 대한 특징적인 행동으로 에세이 동안 그리드 라인을 교차 중지합니다.
이는 다른 분석 방법이 필요할 수 있음을 시사합니다. 이러한 인스턴스는 추적될 수 있고 데이터는 특정 시약 농도에 노출된 총 동물 수의 백분율로 설명될 수 있다. 접시 간 이동 중에 손상되지 않도록 planarian을 처리하는 것이 필수적입니다.
천연 제품의 다른 농도의 효과를 결정 한 후, 생물학적 경로 수정자는 초기 결과에 어떤 동적 변화를 관찰하기 위해 추가 될 수있다. Planarian Locomotor 속도 테스트는 알려진 약리학 에이전트를 사용하여 자극과 철수를 위해 테스트하는 데 사용되었습니다. 우리는 천연 제품으로 이러한 동일한 개념을 연구하기 위해 시스템을 조정했습니다.
