생물 재료와 세포 외 소포 조합은 재생 의학 연구에 대 한 바람직한 접근. 따라서, 이 연구는 정형 외과 및 뼈 재생을위한 실용적인 도구로 전기 EV와 티타늄 기능화를보고합니다. 낙하 주조 기능화는 중합체 함정 또는 생화학 적 결합과 같은 다른 전략에 비해 쉽고 저렴한 방법입니다.
유리 비커에 산화된 물로 티타늄 디스크를 세척하여 티타늄 표면 기능화를 시작합니다. 그런 다음 70 %의 에탄올로 디스크를 세척하기 전에 물을 버립니다. 50°C에서 5분간 세척된 임플란트를 분해하는 용액을 탈온화된 물에서 5분간 초음파 처리합니다.
수중 나트륨 용액을 50C에서 10분 동안 50C의 40% 나트륨 용액에 물을 인큐베이션한 후, 소화된 물에 임플란트를 초음파 처리한 후 입증된 바와 같이 분해된 물에 임플란트를 초음파 처리합니다. 다음으로, 산화된 물로 임플란트의 적어도 5개의 세동을 수행합니다. pH가 pH 표시기에서 중립적일 때까지.
앞서 설명한 바와 같이 수산화나트륨을 50%의 질산으로 대체하여 초음파 처리 및 배양 과정을 반복합니다. 임플란트를 70% 에탄올 용액에 저장하기 전에 분해된 물로 세척 및 초음파 처리를 수행합니다. 티타늄 임플란트를 30% 질산 용액에 30% 생동감있는 반교로 실내 온도에서 30분간 배양합니다.
배양 후 pH가 pH 지표에서 중립적일 때까지 탈온화된 물로 적어도 5개의 세하를 수행합니다. 그런 다음 티타늄 임플란트를 탈온화 된 물의 실온에서 하룻밤 동안 배양하십시오. 다음 날, 10 분 동안 40 C에서 진공 상태에서 임플란트를 건조시.
세포 배양 캐비닛 에서 작업, 기계 측을 향하고 96 잘 접시에 티타늄 임플란트를 배치합니다. 해빙 EV 솔루션에 의한 세포외 소포 EV 드롭 주조, 3초 의 펄스에서 소용돌이 용액을 준비합니다. 혼합 후, 나노 입자 추적 분석에 의해 결정된 농도에 따라, 임플란트 당 최대 4 x 10^11 EV를 고정하기 위해 티타늄 표면에 전기 용액40 마이크로리터를 증착한다.
다음으로, 플레이트를 진공 상태 인 37 C에서 약 2 시간 동안 또는 방울이 완전히 건조 할 때까지 놓습니다. 진공 챔버에 존재하는 티타늄 임플란트의 수와 물에 따라 건조 시간을 조정합니다. 티타늄 디스크에서 방출되는 전기 의 양은 나노 입자 추적 분석에 의해 측정되었다.
2일에는 약 10^9대의 EV가 출시되었고, 6일, 10일, 14일에는 지속적인 출시가 진행되었습니다. 티타늄 EV의 체외 세포 생체 적합성은 젖산 탈수소 효소 또는 LDH 방출 분석으로 평가되었으며, 세포가 임플란트에 파종된 후 48시간 후에. 티타늄 전기자동차는 최대 허용된 세포독성 값보다 LDH의 양이 더 낮았다.
반면, 티타늄 대조군은 LDH 활동 수준을 높게 나타냈다. 가장 중요한 단계는 코팅 된 임플란트의 진공 건조입니다. 최적의 물리 흡수를 얻기 위해 모든 물이 증발되는지 확인하는 것이 중요합니다.