우심실은 왼쪽 심실보다 허혈에 더 강합니다. 우리는 우심실 경색의 발달 동안 병리 생리학 적 메커니즘을 명확히 할 수있는 우심실 감염 모델을 생성하는 기술을 도입했습니다. 우리는 혈관 원가 계산을 통해 오른쪽 관상 동맥을 찾고 마우스 우심실 경색 모델을 성공적으로 생성하는 데 중요한 결찰 영역을 정의했습니다.
절차를 시연하는 것은 내 실험실의 포스터 의사 인 Linhai Ruo가 될 것입니다. 마우스 수핀을 패드에 놓고 발가락 금단 반응이없는 것으로 마취의 깊이를 확인하십시오. 봉합사로 절치를 고정시키고 접착 테이프로 팔다리를 고정시킵니다.
탈모 크림으로 목에서 xiphoid까지 머리카락을 제거하십시오. 핀셋으로 혀를 약간 당기고 혀를 누르기로 하악골을 들어 올려 글로티스를 노출시킵니다. 그리고 22 게이지 캐뉼라를 글로티스 내로 삽입하여 기관내 삽관을 수행한다.
심전도 전극을 마우스 팔다리에 올바르게 연결하고 심전도를 기록하십시오. 가슴을 열려면 안과 가위로 세 번째 오른쪽 갈비뼈와 평행하게 피부에 한 센티미터 길이의 절개를 만드십시오. 세 번째 늑간 공간을 다시 결정하고 흉골 각도에 따라 적절한 공간을 확보하십시오.
세 번째 늑간 공간 위에 가위와 마이크로 포셉으로 가슴 주요와 가슴 근육을 분리하고 절단하십시오. 그 후, 팔꿈치 포셉으로 늑간 근육을 뻔뻔스럽게 분리하여 수술 현장을 노출 한 다음 심낭을 절개하십시오. 멸균 면으로 오른쪽 아트리움을 들어 올리고 멸균 된 8-0으로 오른쪽 관상 동맥을 리게이트하십시오. 나일론 실, 세 ~ 다섯 밀리미터의 결찰 범위.
오른쪽 관상동맥을 결찰한 후, ST 세그먼트 상승을 보여주는 ECG 리드 3을 모니터링한다. 멸균 된 5-0 나일론 실로 면화와 봉합사 근육과 피부를 제거하십시오. 그런 다음 마우스를 가열 패드에 올려 놓고 회복을 촉진하십시오.
마우스를 동물 고정 및 초음파 작동을위한 초음파 플랫폼의 수핀 위치에 놓습니다. 초음파 기계에 부착 된 시스템을 통해 ECG 기록을 얻기 위해 발톱을 전극에 테이프로 붙입니다. 탈모 크림으로 마우스의 가슴에서 머리카락을 제거하고 가슴 피부에 초음파 젤을 바르십시오.
플랫폼을 수평 위치로 설정합니다. 트랜스듀서를 왼쪽 다리에 평행하게 배치하고 좌심실 장축 이미지를 얻습니다. 프로브를 시계 방향으로 90도 회전하여 좌심실 짧은 액세스 뷰를 얻습니다.
시네 저장소 버튼을 눌러 이미지를 저장합니다. 플랫폼의 왼쪽 위를 가장 낮은 지점에서 기울입니다. 트랜스듀서를 수직으로 아래로 내려가 B-모드에서 상복부와 마우스의 횡격막 아래에 위치합니다.
화면에 우심실, 우심방, 좌심방, 좌심실이 보일 때까지 X축과 Y축을 회전시켜 플랫폼 위치를 약간 조정합니다. 그리고 cine store 또는 프레임 버튼을 눌러 이미지를 저장하십시오. M 모드를 누릅니다.
두 개의 X 인디케이터 라인이 나타난 후 트리쿠스피드 밸브 오리피스에서 인디케이터 라인을 위치시키고, 트리쿠스피드 연간면의 움직임을 구한다. M 모드를 다시 누릅니다. cine 저장소 또는 프레임 저장소 단추를 눌러 데이터와 이미지를 저장합니다.
플랫폼의 왼쪽을 가장 낮은 지점에서 기울입니다. 프로브를 오른쪽 전방 액와선을 따라 수평축에 대해 30도 각도로 배치합니다. 플랫폼의 X 및 Y 축을 회전하여 우심실을 표시합니다.
M 모드 버튼을 누르고 중격 과반향 지점에서 표시기 라인을 찾아 우심실 인터페이스의 M 모드 이미지를 얻으십시오. M 모드 버튼을 다시 누릅니다. 시네 저장소 버튼을 눌러 사진을 저장하십시오.
기관 삽관을 수행하고 동물 인공 호흡기의 매개 변수를 설정하십시오. xiphoid 과정 위의 피부에 한 센티미터의 양측 절개를 만들고 안과 가위로 횡격막과 갈비뼈를 횡단하여 심장을 노출시킵니다. 32 게이지 바늘로 오른쪽 심실 자유 벽에 구멍을 뚫습니다.
바늘을 제거하고 면화로 상처를 눌러 출혈을 막으십시오. 카테터의 끝을 펑크 부위를 통해 우심실에 삽입하고 카테터를 천천히 앞으로 밀어 넣으십시오. 팁의 위치를 조정하여 모니터 및 기록 시스템에 표시된 일반적인 RV 압력파 형태를 얻습니다.
안정화 10분 후, RV 수축기 혈압, RV 및 이완기 혈압, 및 RV 최대 우심실 압력 상승 감소율의 데이터를 기록한다. 선택 버튼을 클릭하여 계산을 위해 심장 사이클을 선택하십시오. 그런 다음 분석 버튼을 클릭하여 선택한 사이클의 평균값을 계산합니다.
동물 수핀을 패드에 놓고 인공 환기를 위해 삽관하십시오. 외과 용 가위로 가슴을 열고 심장을 노출시킵니다. 오른쪽 심방에 안과 가위로 3 밀리미터 노치를 만들고 인젝터로 심장 정점을 통해 5mL의 정상 식염수로 심장을 관류하십시오.
대동맥 클램프로 대동맥에서 혈액을 차단하십시오. 그리고 0.1mL의 1 mg / mL 니트로 글리세린을 인젝터로 심장 정점을 통해 관상 동맥을 확장시킵니다. 심장 정점을 통해 1mL 캐스트 시약으로 심장을 관류하고 두세 시간을 기다리십시오.
이틀에서 사흘 동안 50 % 수산화 나트륨으로 심장을 침식하십시오. 정상 식염수로 헹구어 근육 조직 또는 결합 조직을 제거한다. RCA 라이게이션 후, ST-세그먼트 상승은 ECG의 리드 3에서 관찰되었다.
2, 3, 5-트리페닐테트라졸륨 클로리드 염색은 수술 후 24시간 동안 RV 유리벽의 경색 면적이 45%를 차지하는 것으로 나타났다. 심 초음파 검사는 디아스톨의 끝에서 RV 내부 치수가 RV1에서 증가한다는 것을 보여주었습니다. 그리고 그것은 Sham 그룹에서 두 번 이상이었습니다.
RV 분획 단축, RV 토출 분율, 및 트리쿠스피드 환형 평면 수축기 소풍은 RVI에서 상당히 작았다. LV 면적비에 의한 RV가 대략 50%RV 혈류역학적 측정에 의해 증가된 RVI 군에서, 우심실 수축기 혈압, RV 압력의 최대 및 최소 상승률, RV 수축성이 유의하게 더 작았다는 것을 보여주었다. 우심실 및 이완기 압력 및 RV 이완 지수의 지수 시간 상수는 샴 그룹의 그것보다 상당히 더 유의하였다.
경색 부위에서 RV 동맥류가 보였다. RVI 그룹에서 심장 중량 대 체중비 및 경골 길이 비율에 대한 심장 중량비는 약간 더 컸다. 마손 염색은 RV 유리벽에서 유의한 섬유증을 나타내었다.
그리고 드물게 RVI 그룹의 중격에서 섬유증이 발생하였다. 대조적으로, 살아남은 몇 개의 심근 세포는 경색 영역에있었습니다. 결찰 영역을 노출시키고 삽입 된 바늘의 깊이와 범위를 파악하여 성공과 생존율을 높이는 것이 중요합니다.