마우스에서 Diaphyseal 대퇴골 골절 모델 확립

여기에 표시된 대퇴골 골절 모델은 길고 저렴한 쥐 모델로, 장골 골절 치유의 기초 및 전임상 연구에 적합합니다. 개복 수술 기법은 복잡한 수술 기구와 고정 장치가 필요하지 않습니다. 이를 통해 생성되는 골절을 육안으로 검사할 수 있습니다.

이 모델은 경피적 또는 전신 주사로 전달할 수 없는 줄기 세포, 약물 및 생체 재료를 포함한 치료 구성 요소의 국소 이식 및 생체 내 테스트에 사용할 수 있습니다. 수술 프로토콜은 중요한 단계를 수행하기 위해 기본 수술 기술과 마우스 해부학에 대한 약간의 지식이 필요합니다. 이 작품의 시각적 시연은 동물 수술 경험이 없는 사람들에게도 도움이 될 수 있습니다.

레오나르도 뮐러(Leonardo Muller)와 비앙카 프레이드(Bianca Frade)가 이 시술을 시연할 예정이며, 두 사람 모두 줄기 세포 및 뼈 복구 연구소(Laboratory of Stem Cells and Bone Repair)의 석사 과정 학생입니다. 마취된 동물을 수술대로 옮긴 후 10%포비돈 요오드 스폰지로 피부를 문질러 절개 부위를 소독합니다. 그런 다음 멸균 거즈 패드로 문지른 부위를 말리고 70% 에탄올로 세척한 다음 멸균 거즈 패드로 다시 건조시킵니다.

그런 다음 마우스를 오른쪽 측면 욕창 위치에 놓고 절개 부위만 보이도록 마우스를 드레이프합니다. 수술 전에 쥐의 눈에 안약을 넣어 건조함을 방지하고 수술 중 쥐의 호흡을 지속적으로 확인하십시오. 메스 블레이드 번호 11로 경골 결절 수준에서 시작하여 슬개골 수준까지 확장 한 다음 원위 대퇴골쪽으로 동일한 거리로 1cm 피부 측면 슬개골 절개를 만듭니다.

끝이 뭉툭한 가위로 절개선 주변의 피하 근막을 절개하여 근막, 외광대, 대퇴골 이두근을 노출시킵니다. 11번 메스를 사용하여 경골 결절 수준에서 시작하여 이두박근 대퇴골 아포뉴로시스를 따라 대퇴골 원위 수준까지 이두근 대퇴골 아포뉴로시스를 따라 관절낭을 열고 무릎 관절에 접근합니다. 슬개골의 내측 탈구를 수행하여 직선 톱니 모양의 정밀 팁 핀셋의 끝을 그 아래에 놓고 슬개골 및 대퇴사두근 인대와 함께 옆으로 밀어 대퇴골의 과두를 노출시킵니다.

톱니 모양의 팁 핀셋으로 대퇴골을 잡고 무릎을 90도로 구부리고 26게이지 피하 주사 바늘로 과두간 포사를 통해 대퇴골의 골수내 운하를 수동으로 천공합니다. 무릎을 90도로 구부린 상태에서 1.0cm의 세그먼트, 0.016인치 스테인리스 스틸 막대 와이어를 개구부를 통해 대퇴골의 수질관으로 삽입합니다. 직선 톱니 모양의 팁 핀셋으로 와이어의 말단 방지 단자를 조정하여 측면 과두에 단단히 고정합니다.

다음으로, 톱니 모양의 팁 핀셋으로 둔한 끝 절개를 통해 외측 광대근과 대퇴골 이두근을 분리하여 대퇴골의 원위 단부에 접근합니다. 대퇴골 골격 주위에 약 90도 각도로 절개 가위를 삽입하고 전체 피질 절골술을 부드럽게 수행합니다. 직선 톱니 모양의 정밀 팁 핀셋의 끝을 과두 부위 위로 밀어 근육과 슬개골의 위치를 변경합니다.

6-0 재흡수성 봉합사로 근육 근막을 닫은 다음 6-0 나일론 봉합사를 사용하여 피부를 닫습니다. 허용 가능한 골절 패턴의 방사선 사진은 골절 선이 뼈 축에 대해 90도 각도를 이루는 횡방향 골절, 골절 선이 뼈 축에 대해 30도 미만인 짧은 경사 골절, 몇 개의 작은 뼈 조각이 보이는 축소 가능한 단편 골절, 그러나 뼈의 해부학적 정렬은 남아 있습니다. 잘못 배치된 와이어의 대표적인 방사선 사진은 와이어가 근위 대퇴골 조각의 수수 운하 내부에 있지 않아 골절된 뼈가 잘못 고정된 경우와 와이어가 골절된 부분을 통과하지 못하고 골절된 뼈가 완전히 정렬되지 않은 경우입니다.

수술 후 14일째와 21일째에 골절 부위에 보이는 굳은살은 모델의 재생 과정을 나타냅니다. 조직학적 분석은 골절 부위의 굳은살 평가를 보여줍니다. 굳은살은 7일째 되는 날에 처음 나타나며, 골절선 주변에 광범위한 하이라인 연골 부위를 나타냅니다.

14일째에는 연골 부위 주변에 골화 전선이 관찰되어 섬유주 뼈와 재구성된 골수로 채워진 공동을 형성합니다. 마지막으로, 21일째에는 연골 부위가 섬유주 뼈로 거의 완전히 대체되어 성공적인 뼈 가교를 나타냅니다. 모델의 성공은 와이어의 올바른 삽입에 달려 있습니다.

따라서 이 단계에서 무릎을 90도 각도로 구부리는 것이 중요하다. 또한 미시적으로 계산된 인구 통계학을 사용하여 세포의 진화와 형성되는 뼈의 특성을 3차원 및 정량적 규모로 평가할 수 있습니다.