SAA는 정교한 뇌와 방대한 행동 레퍼토리를 부여받은 무척추 동물 모델 유기체에서 휘발성 물질의 약리학을 조사하기 위한 고처리량 처리를 허용합니다. Drosophila melanogaster에서 사용할 수 있는 유전 도구 상자와 함께 이 기술을 사용하면 휘발성 물질의 약리유전학을 빠르고 저렴하게 연구할 수 있습니다. 많은 사람들이 오염 물질이나 치료제로 휘발성 물질에 노출됩니다.
마취 외에도 휘발성 마취제는 수많은 독성 및 유익한 부수적 효과가 있습니다. 효과의 정도는 부분적으로 유전학에 의해 결정되며, 유전학은 대부분 미개척 상태로 남아 있습니다. 나무 프레임을 만든 후 50/9인치 드릴 비트로 각 캡에 두 개의 구멍을 뚫어 32밀리리터 크로니클 튜브 캡을 수정합니다.
울퉁불퉁 한 플라스틱을 청소하기 위해 구멍을 샌딩하십시오. 또한 표면을 거칠게 하기 위해 캡 상단을 샌딩합니다. 그런 다음 5밀리리터 혈청학적 피펫을 크기에 맞게 자르고 플라스틱에 점수를 매기고 점수가 매겨진 라인에서 깨끗하게 부수십시오.
절단되거나 부러진 피펫의 끝을 샌딩하십시오. 그런 다음 그물을 튜브에 붙이고 접착제가 마르면 그물을 튜브 크기로 자릅니다. 두 튜브가 캡 위로 뻗어 있는 원뿔형 캡의 구멍에 튜브를 삽입합니다.
유입 튜브가 유출 튜브보다 튜브 안으로 더 오래 연장되는지 확인하십시오. 튜브 주위의 캡 상단에 접착제를 바르고 부품을 함께 고정하고 건조시킵니다. 접착 케이블 타이 다운을 프레임에 부착합니다.
지퍼 타이를 사용하여 캡을 프레임에 부착하고 지퍼 타이 태그 끝을 짧게 자릅니다. 타이곤 튜브의 길이를 절단하여 수정된 각 캡의 유입 및 유출 튜브에 연결합니다. 상류 끝에서 시작하여 튜브를 먼저 유입에 부착 한 다음 유출에서 후속 위치의 유입으로 연결합니다.
다음으로, 가장 다운스트림 유입에 흐름 표시기를 추가합니다. 50밀리리터의 원추형 튜브를 첫 번째 위치에 놓고 물 채우기 표시를 표시합니다. 튜브를 제거합니다.
유입 튜브 아래에 물을 채우고 제자리에 다시 놓습니다. 기화기의 인터페이스를 준비합니다. 플런저를 제거하고 두 개의 10밀리리터 분배 주사기에서 노치를 잘라낸 다음 노치가 기화기 전면을 향하도록 하여 구멍에 맞춰 기화기 유입 및 유출에 삽입합니다.
전체 시스템을 연결합니다. 타이곤 튜브를 사용하여 캐리어 가스 탱크를 레귤레이터, 가스비유량계, 기화기 및 SAA와 부착합니다. 어레이의 빈 위치를 빈 50밀리리터 크로니클 튜브로 채웁니다.
이제 가스 탱크를 켭니다. 유량계를 분당 2리터로 열고 기화기를 켜서 0%기화기 상류의 유량계와 SAA의 마지막 챔버 하류의 유량 표시기를 확인하여 시스템을 통한 가스 흐름을 확인합니다. 또는 다운스트림 튜브 끝을 물에 삽입하고 기포가 있는지 확인합니다.
마취 노출 24시간 이상에 바람직한 방법을 사용하여 실험에 필요한 파리 코호트를 분류한다. 식품 바이알에서 파리를 빈 50 밀리리터 원추형 튜브로 옮깁니다. 노출되기 전에 죽은 파리를 세고 기록하십시오.
파리가 있는 50밀리리터 원뿔형 튜브의 캡을 풀고 SAA에 나사로 고정합니다. 운반 가스를 켜고 원하는 유량으로 설정하십시오. 마취 기화기를 원하는 농도로 설정하고 원하는 시간 동안 파리를 노출시킵니다.
노출이 끝나면 총 SAA 부피의 약 10배에 해당하는 5분 동안 분당 1.5리터의 신선한 가스 흐름으로 시스템을 세척합니다. 고압 조절기를 완전히 연 다음 반 바퀴 돌려 닫아 캐리어 가스 흐름을 보장합니다. 유량계와 기화기까지 각 라인의 튜브를 따라 기화기의 마취 수준을 확인하십시오.
가스가 흐를 때 유량계와 다운스트림 유량 표시기에 흐름이 표시되는지 확인하십시오. 실험이 끝나면 4-5 분 동안 공기 흐름으로 마취제를 씻어 내십시오. 단일 쌍 회의를 통해 단일 개체군으로부터 분리된 7개 라인은 ND23 60114 파리에서 진화적 압력으로 인한 이소불소 독성 유발 사망률의 변화를 보여주었습니다.
외상성 뇌 손상 전에 15분 동안 2% iso 불소로 사전 컨디셔닝 비행을 하면 흰색 1118 및 노란색/흰색 균주에서 24시간 사망률이 감소했습니다. 24시간째의 사망률 지수는 사전 조절된 Oregon R 및 Canton S 라인에서 유의하게 낮지 않았습니다. 조립하는 동안 수정된 주사기의 노치는 기화기 포트의 구멍과 정렬되어야 합니다.
노출하는 동안 시스템을 통해 흐름이 있는지 주기적으로 확인하십시오. 이 절차는 휘발성 물질의 약리학에 대한 통찰력으로 이어질 수 있는 다양한 행동, 생존 및 분자 연구를 위해 따를 수 있습니다.
