EAN University와 University of La Laguna에 감사드립니다.

1. 재고 및 작업 용액의 준비
알림: 안전상의 이유로 프로토콜 전반에 걸쳐 니트릴 장갑, 실험실 가운 및 보안경을 착용하는 것이 좋습니다.
<ol><li>45가지 상업용 살충제 표준물질( 재료 표 참조) 각각의 개별 원액을 10mL 용량 플라스크의 아세토니트릴에서 약 1,000mg/L로 준비합니다.</li>
	<li>위의 개별 스톡 용액을 결합하여 25mL 용량 플라스크의 아세토니트릴에 400mg/L 스톡 용액을 준비합니다. 참고: 이 혼합 솔루션은 복구 및 보정 실험을 위한 작업 솔루션을 준비하는 데 사용됩니다.</li>
	<li>10mL 용량 플라스크의 아세토니트릴에서 각각 750mg/L 및 1,050mg/L 농도의 atrazine-d5 및 triphenyl phosphate(TPP) 원액을 준비합니다. atrazine-d5 를 절차적 내부 표준물질(P-IS)로, TPP를 주입 내부 표준물질(I-IS)로 활용합니다. 참고: 이상적인 시나리오는 각 특정 표적 분석물질에 대해 동위원소로 표지된 내부 표준물질을 활용하는 것입니다.</li>
	<li>10mL 용량 플라스크에 포름산(분해 방지용) 0.05%(v/v)를 함유한 아세토니트릴로 스톡 회수 용액을 준비하여 살충제의 경우 10, 100 및 400μg/kg 샘플 등가물을, P-IS의 경우 200μg/kg을 별도로 수득합니다. 이 용액을 -20 °C의 어두운 곳에서 호박색 유리 바이알에 보관하십시오.</li>
	<li>살충제와 P-IS의 보정 용액을 10mL 용량 플라스크에 0.05%(v/v)의 포름산과 함께 아세토니트릴에 준비하여 각각 5, 10, 25, 75, 200, 400 및 600μg/kg 및 200ng/ng를 수득하고 -20°C의 어둠 속에서 호박색 유리 바이알에 보관합니다. 알림: 실험 작업 전반에 걸쳐 동일한 솔루션을 사용할 수 있지만 각 사용 직후 지정된 조건에서 보관하는 것이 필수적입니다.</li>
	<li>3-에톡시-1,2-프로판디올 100g/L, L-굴론산 γ-락톤 10g/L, D-소르비톨 10g/L, 시키믹산 5g/L를 함유한 분석물 보호제의 혼합물을 0.5%(v/v)의 포름산과 함께 물에 대한 아세토니트릴의 4/1(v/v) 비율로 준비합니다. 참고: 이 분석물 보호제 혼합물은 ME를 완화하기 위해 주입 직전에 첨가해야 합니다.</li>
</ol>2. 시료 채취
<ol><li>슈퍼마켓에서 구할 수 있는 세 가지 아보카도 종(예: Criollo, Hass, Lorena)의 샘플을 수집합니다. 각 샘플의 무게는 약 1kg이며, 이는 모든 후속 연구를 수행하기에 충분하고 Directive 2002/63/CE21에 부합하는지 확인합니다. 참고: 살충제 잔류물의 존재 가능성을 최소화하기 위해 유기 샘플을 우선적으로 선택했습니다.</li>
	<li>수집된 아보카도 샘플을 실험실로 운반하고 다지퍼를 사용하여 파이프 없이 개별적으로 균질화합니다( 재료 표 참조). 균질화된 시료를 분석할 때까지 4°C의 호박색 유리 용기에 보관합니다. 참고: 전체 연구에서 동일한 아보카도 샘플이 사용됩니다. 따라서 매번 사용 직후 지정된 조건에서 보관하는 것이 중요합니다.</li>
</ol>3. 포름암모늄과 함께 QuEChERS 방법을 활용한 시료 전처리
참고: 그림 1 은 포름암모늄을 사용한 QuEChERS 분석법의 개략도를 보여줍니다.
<ol><li>50mL 원심분리기 튜브에서 각 아보카도 샘플 5g의 무게를 칭량합니다( 재료 표 참조).</li>
	<li>50μL의 P-IS 용액을 추가하여 200μg/kg의 농도를 생성합니다. 회수 평가를 위해 1.4단계에서 준비한 살충제 용액을 추가하여 10, 100 및 400μg/kg(각각 n = 5)의 농도를 생성합니다.</li>
	<li>스파이크가 샘플에 완전히 통합되도록 튜브를 30초 동안 소용돌이칩니다.</li>
	<li>원심분리기 튜브에 아세토니트릴 10mL를 추가합니다. 70rpm으로 튜브를 5분 동안 흔듭니다.</li>
	<li>포름산암모늄 2.5g을 넣고 70rpm에서 5분 동안 튜브를 다시 흔든 다음 1,800× g 에서 5분 동안 원심분리합니다.</li>
	<li>150mg의 무수MgSO4, 50mg의 1차-2차 아민(PSA) 50mg, 50mg의 옥타데실실란(C18), 10mg의 흑연화 카본 블랙(GCB) 및 60mg의 산화지르코늄 기반 흡착제 Z-Sep+를 함유한 2mL 원심분리기에 분산-고체상 추출(d-SPE)을 사용하여 정제하기 위해 추출물 1mL를 추가합니다. 튜브를 30초 동안 소용돌이치고 1,800× g 에서 5분 동안 원심분리합니다.</li>
	<li>추출물 200μL를 자동시료주입기 바이알에 옮기고, 1.6단계에서 준비한 분석물 보호제 용액 20μL를 추가하고, TPP 용액 50μL를 넣습니다.</li>
	<li>GC-MS/MS 시스템을 사용하여 기기 분석을 수행합니다(섹션 4 참조).</li>
	<li>d-SPE 단계(단계 3.6) 중에 15mL 튜브에서 상층액 5mL를 세척하는 경우를 제외하고 블랭크 추출물을 사용하여 위에서 설명한 것과 동일한 절차에 따라 매트릭스 일치 보정을 수행합니다. 3.7단계에서 스파이크 및 P-IS 솔루션을 추가합니다. 자동 시료 주입기 바이알에 보정 표준 용액을 추가하여 TPP와 함께 5, 10, 25, 50, 100, 200, 400 및 600 μg/kg을 수득하면 최종 부피는 270 μL가 됩니다. 참고: 전반적으로 각 아보카도 품종과 아세토니트릴 전용 보정에 대해 매트릭스 일치 보정 곡선을 구성해야 합니다.</li>
</ol>4. GC-MS/MS를 이용한 기기 분석
<ol><li>전자 이온화 인터페이스(−70eV) 및 자동 시료 주입기( 재료 표 참조)가 장착된 삼중 사중극자(TQ)가 있는 GC-MS/MS 시스템을 사용하여 분석을 수행합니다.</li>
	<li>MS GC 컬럼(길이 30m, 내경 0.25mm, 필름 두께 0.25μm의 실리카 본드)과 초고순도 헬륨 을 1.2mL/분의 일정한 유속으로 운반 가스로 사용합니다.</li>
	<li>장비 작업을 진행하기 전에 다음 매개변수를 확인하십시오.<ol><li>가스 압력이 올바른지 확인하십시오: 헬륨 은 140psi , 아르곤 은 65psi입니다.</li>
		<li>로터리 펌프 오일의 상태를 점검하여 깨끗하고 적절한 수준인지 확인하십시오.</li>
		<li>주입 주사기에 이전 주입으로 인한 장애물이 없는지 확인하십시오.</li>
		<li>세척 바이알에 각 용매가 충분한 부피로 들어 있는지 확인합니다.</li>
		<li>소모품 카운터(격막, 라이너)가 한계에 도달하지 않았는지 확인하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>전면 패널에 있는 메인 GC 스위치를 켜고 후면에 있는 MS 스위치를 켭니다.</li>
	<li>GC-MS/MS 시스템의 모든 파라미터를 제어하는 GCMS 실시간 분석 소프트웨어를 엽니다. 참고: 기기 시스템에는 기본적으로 GCMS 실시간 분석 소프트웨어가 포함되어 있습니다.</li>
	<li>Vacuum Control(진공 제어) | 고급 | 로터리 펌프 1을 사용하여 진공 시스템을 시작합니다. 알림: 이 창에서 압력을 모니터링하여 9.0Pa보다 낮아야 하는 최적의 진공 값을 결정합니다. 약 12 시간 정도 소요됩니다.</li>
	<li>시작을 클릭하여 터보 분자 펌프 1과 터보 분자 펌프 2를 켭니다.</li>
	<li>Ion Source Heater 옵션에 대해 Start(시작)를 클릭합니다. 알림: 권장 시간인 1시간 후에 시스템의 진공을 확인하여 권장 값이 1.6e-3Pa보다 낮은지 확인하십시오.</li>
	<li>MS 인터페이스 온도 를 250°C 로 설정하고 이온 소스 온도 를 300°C로 설정합니다.</li>
	<li>GC 오븐을 초기 온도 50°C에서 1분 동안 유지한 다음 ramp 25°C/min의 속도로 180°C까지 올립니다. 그런 다음 온도를 230°C/min에서 5°C로 높인 다음 25°C/min에서 290°C로 높입니다. 마지막으로 290분 동안 온도를 6°C로 일정하게 유지합니다. 총 분석 시간은 24.6분입니다.</li>
	<li>이 모든 시스템이 켜지면 닫기를 클릭하십시오.</li>
	<li>분석 소프트웨어에서 Tuning 옵션을 클릭하고 Peak Monitor View 를 클릭하여 질량분석기 조건의 초기 검증을 수행합니다. 참고: 필요한 경우 자동 조정을 수행합니다.</li>
	<li>Acquisition( 획득)을 클릭하고 표시된 창에서 Download Initial Parameters(초기 파라미터 다운로드)를 클릭합니다. 장비가 준비 GC 및 준비 MS인지 확인합니다.</li>
</ol>5. 데이터 수집
<ol><li>소프트웨어에서 새 배치 파일을 클릭하고 샘플 이름, 샘플 ID, 분석법 파일, 데이터 파일, 주입 볼륨 및 튜닝 파일과 같은 정보가 포함된 시퀀스를 생성합니다. 필요에 따라 행을 추가하고 저장을 클릭합니다.</li>
	<li>Batch Start를 클릭하고 주입 프로세스를 시작합니다.</li>
	<li>비분할 모드에서 250°C에서 주입을 수행하여 주입 부피를 1μL로 유지합니다. 주입 후 1분 후에 분할을 엽니다. 참고: 주입 사이에 각 용매로 한 번의 헹굼을 사용하여 메탄올, 에틸 아세테이트 및 아세토니트릴로 10μL 주사기를 세척해야 합니다. 모든 주사는 삼중으로 수행됩니다.</li>
	<li>TQ가 있는 MS/MS 시스템에서 사용되는 표준 모드인 MRM(Multiple Reaction Monitoring) 모드를 사용하여 분석물을 분석합니다. 참고: 표 1 은 멀티클래스 살충제, P-IS 및 I-IS에 대한 머무름 시간(분)과 정량자 및 한정자 전이를 제공합니다. 정량 분석은 P-IS 이온에 대한 정량 이온의 피크 면적 비율에 의존합니다. I-IS는 사출 중 품질 관리를 위해 사용됩니다. 보충 파일 1 에는 분석된 45가지 살충제 모두에 대한 크로마토그램이 포함되어 있습니다.</li>
	<li>데이터 분석을 위해 Postrun Analysis 소프트웨어를 엽니다. 참고: 기기 시스템에는 기본적으로 GCMS Postrun Analysis 소프트웨어가 포함되어 있습니다.</li>
	<li>분석할 주입을 클릭하고, 분석물질이 포함된 표를 탐색하고, 관심 피크를 선택합니다.</li>
	<li>피크 또는 관심 영역을 클릭하여 크로마토그램을 시각화합니다. 피크 적분을 검토하고 필요한 경우 수동 적분을 수행합니다. 필요한 계산 및 분석법 평가를 수행하기 위해 모든 분석물의 영역을 확인합니다.</li>
</ol>

QuEChERS 분석법 및 CG-MS/MS를 사용한 아보카도의 살충제 분석

<ol>
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J., Hern&#225;ndez-Borges, J., Rodr&#237;guez Delgado, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ammonium+formate+buffer+in+QuEChERS+for+high+throughput+analysis+of+pesticides+in+food+by+fast,+low-pressure+GC-MS/MS+and+LC-MS/MS.">Ammonium formate buffer in QuEChERS for high throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure GC-MS/MS and LC-MS/MS.</a> Abstracts of Papers of the American Chemical Society. 248, (2014).</li><li>Gonz&#225;lez-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hern&#225;ndez-Borges, J., Rodr&#237;guez-Delgado, M. &. #. 1. 9. 3. ;. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+ammonium+formate+in+QuEChERS+for+high-throughput+analysis+of+pesticides+in+food+by+fast,+low-pressure+gas+chromatography+and+liquid+chromatography+tandem+mass+spectrometry.">Use of ammonium formate in QuEChERS for high-throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure gas chromatography and liquid chromatography tandem mass spectrometry.</a> J Chromatogr A. 1358, 75-84 (2014).</li><li>Varela-Mart&#237;nez, D. A., Gonz&#225;lez-S&#225;lamo, J., Gonz&#225;lez-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Quick Hern&#225;ndez-Borges, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quick,+easy,+cheap,+effective,+rugged,+and+safe+(QuEChERS)+extraction.">Quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe (QuEChERS) extraction.</a> Handbooks in Separation Science. , 399-437 (2020).</li><li>Gonz&#225;lez-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+organochlorine+pesticides+in+a+soil+sample+by+a+modified+QuEChERS+approach+using+ammonium+formate.">Analysis of organochlorine pesticides in a soil sample by a modified QuEChERS approach using ammonium formate.</a> J Vis Exp. 191, e64901 (2023).</li><li>Gonz&#225;lez-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Dionis-Delgado, S., Asensio-Ramos, M., Hern&#225;ndez-Borges, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pesticide+analysis+in+toasted+barley+and+chickpea+flours.">Pesticide analysis in toasted barley and chickpea flours.</a> J Sep Sci. 35 (2), 299-307 (2012).</li><li>Varela-Mart&#237;nez, D. A., Gonz&#225;lez-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Gonz&#225;lez-S&#225;lamo, J., Hern&#225;ndez-Borges, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+analysis+of+pesticides+in+minor+tropical+fruits+from+Colombia.">High-throughput analysis of pesticides in minor tropical fruits from Colombia.</a> Food Chem. 280, 221-230 (2019).</li><li>Li, L., Li, W., Qin, D. M., Jiang, S. R., Liu, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+graphitized+carbon+black+to+the+QuEChERS+method+for+pesticide+multiresidue+analysis+in+spinach.">Application of graphitized carbon black to the QuEChERS method for pesticide multiresidue analysis in spinach.</a> J AOAC Int. 92 (2), 538-547 (2009).</li></ol>

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

매트릭스 정합 교정과 관련된 주요 제한 사항은 블랭크 샘플을 교정 표준으로 사용하는 데서 발생합니다. 이로 인해 분석을 위해 처리해야 할 샘플의 수가 증가하고 각 분석 시퀀스에서 매트릭스 성분의 주입이 증가하여 잠재적으로 기기 유지 관리 요구가 높아질 수 있습니다. 그럼에도 불구하고 이 전략은 각 샘플에 대해 보정 곡선을 수행해야 하기 때문에 주입할 샘플의 수가 훨씬 더 많은 표준...

화학 분석에서 매트릭스 효과(ME)는 다양한 방법으로 정의할 수 있지만, 널리 받아들여지는 일반적인 정의는 다음과 같습니다: 신호의 변화, 특히 특정 분석물의 분석 중에 샘플 매트릭스 또는 그 일부가 존재할 때 검량선의 기울기 변화를 나타냅니다. 중요한 측면으로, ME는 표적 분석물1에 대한 정량 측정의 정확도에 직접적인 영향을 미치기 때문에 모든 분석 방법의 검증 과정에서 철저한 조사가 필요합니다. 이상적으로, 시료 전처리 절차는 시료 매트릭스에서 성분을 추출하지 않도록 충분히 선택적이어야 합니다. 그러나 상당한 노력에도 불구하고 이러한 매트릭스 구성 요소 중 다수는 대부분의 경우 여전히 최종 결정 시스템으로 끝납니다. 결과적으로, 이러한 매트릭스 구성 요소는 종종 복구 및 정밀도 값을 손상시키고, 추가 노이즈를 유발하며, 방법과 관련된 전체 비용과 노동력을 증가시킵니다.
가스 크로마토그래피(GC)에서 ME는 GC 시스템 내에 다양한 메커니즘을 통해 표적 분석물과 상호 작용하는 활성 부위의 존재로 인해 발생합니다. 한편으로, 매트릭스 성분은 표적 분석물과 상호 작용할 수 있는 이러한 활성 부위를 차단하거나 마스킹하여 빈번한 신호 향상을 초래합니다2. 반면에, 장애물이 없는 활성 부위는 강한 상호 작용으로 인해 피크 테일링 또는 분석물 분해를 유발하여 음의 ME로 이어질 수 있습니다. 그러나 이는 특정 경우에 잠재적인 이점을 제공할 수 있습니다2. GC 시스템에서 완전한 불활성 상태를 달성하는 것은 매우 불활성인 구성 요소를 사용하고 적절한 유지 관리를 수행함에도 불구하고 매우 어렵다는 점을 강조하는 것이 중요합니다. 지속적인 사용으로 GC 시스템에서 매트릭스 구성 요소의 축적이 더욱 두드러져 ME가 증가합니다. 오늘날에는 산소, 질소, 인, 황 및 이와 유사한 원소를 포함하는 분석물이 이러한 활성 부위와 쉽게 상호 작용하기 때문에 더 큰 ME를 나타낸다는 것이 널리 알려져 있습니다. 반대로, 탄화수소 또는 유기 할로겐과 같은 매우 안정적인 화합물은 이러한 상호 작용을 겪지 않으며 분석 중에 관찰 가능한 ME를 나타내지 않습니다 2,3.
전반적으로 ME는 완전히 제거할 수 없으므로 매트릭스 구성 요소를 완전히 제거할 수 없는 경우 보정 또는 수정을 위한 여러 전략을 개발하게 됩니다. 이러한 전략 중 중수소화 내부 표준물질(IS), 분석물 보호제, 매트릭스 정합 보정, 표준물질 첨가 방법 또는 주입 기술의 수정의 활용이 과학 문헌 1,2,4,5에 문서화되어 있습니다. SANTE/11312/2021 가이드라인도 이러한 전략을 권장하고있습니다 6.
ME를 보상하기 위한 매트릭스 매칭 보정의 적용과 관련하여, 실제 상황에서의 시료 염기서열은 다양한 유형의 식품 또는 동일한 상품의 다양한 시료를 포함합니다. 이 경우, 동일한 상품의 샘플을 사용하면 모든 샘플에서 ME를 효과적으로 보상할 수 있다고 가정합니다. 그러나 기존 문헌에는 이 문제를 구체적으로 조사하는 충분한 연구가 부족하다7.
상당한 비율의 지방과 색소를 함유한 매트릭스에서 살충제의 다중 잔류물을 측정하는 것은 어려운 작업입니다. 상당한 양의 공발추출된 물질은 추출 효율에 상당한 영향을 미치고 후속 크로마토그래피 측정을 방해하여 컬럼, 소스 및 검출기를 손상시킬 수 있으며 상당한 MEs 8,9,10을 초래할 수 있습니다. 결과적으로, 이러한 매트릭스에서 미량 수준의 살충제를 분석하려면 분석 전에 매트릭스 성분을 크게 줄이면서 높은 회수율을 보장해야 한다7. 높은 회수율을 얻는 것은 농약 분석이 신뢰할 수 있고 정확하며 규제 표준을 준수하도록 하는 데 매우 중요합니다. 이는 농업 및 관련 분야에서 식품 안전, 환경 보호 및 정보에 입각한 의사 결정을 보장하는 데 매우 중요합니다.
아보카도는 전 세계적으로 열대 및 지중해성 기후에서 재배되는 상업적 가치가 높은 과일로 원산지와 수많은 수출 시장에서 널리 소비됩니다. 분석적 관점에서 아보카도는 견과류와 유사한 상당한 수의 지방산(즉, 올레산, 팔미트산, 리놀레산)을 포함하는 복잡한 매트릭스이며, 녹색 잎과 같은 중요한 색소 함량, 다른 과일에서 발견되는 것과 유사한 당 및 유기산을 함유하고 있습니다11. 지방이 많은 특성으로 인해 분석을 위해 분석 방법을 사용할 때 특별한 주의를 기울여야 합니다. GC-MS를 사용하여 아보카도에 대한 잔류 농약 분석이 수행되었지만 일부 사례에서 8,12,13,14,15,16,17,18,19,20에 비해 상대적으로 빈도가 낮았습니다. 대부분의 경우, Qu ick-Easy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe(QuEChERS) 방법의버전이 적용되었다 8,12,13,14,15,16,17,18. 이러한 연구 중 어느 것도 다양한 아보카도 품종 간의 ME의 일관성을 조사하지 않았습니다.
따라서 이 연구의 목적은 포름암모늄 및 GC-MS/MS와 함께 QuEChERS 방법을 사용하여 다양한 종류의 아보카도(예: Criollo, Hass 및 Lorena)에서 45가지 대표적인 살충제에 대한 ME의 일관성과 회수 값을 연구하는 것이었습니다. 우리가 아는 한, 이러한 유형의 연구가 이러한 지방 매트릭스 샘플에 대해 수행된 것은 이번이 처음입니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-Ethoxy-1,2-propanediol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>260428-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Merk</td>
			<td>1006652500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium formate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>156264-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AOAC 20i/s autosampler</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td>221-723115-58</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic shaker MX-T6-PRO</td>
			<td>SCILOGEX</td>
			<td>8.23222E+11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance</td>
			<td>OHAUS</td>
			<td>PA224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 15 mL</td>
			<td>Nest</td>
			<td>601002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 2 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4610-1815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 50 mL</td>
			<td>Nest</td>
			<td>602002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Z206A</td>
			<td>MERMLE</td>
			<td>6019500118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Choper 2L</td>
			<td>Oster</td>
			<td>2114111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Column SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0.25 mm, 0.25 &#181;m</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td>221-75954-30</td>
			<td>MS GC column&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispensette 5-50 mL</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>4600361</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DSC-18</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>52600-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Sorbitol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>240850-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Merk</td>
			<td>1313181212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GCMS-TQ8040&#160;</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td>211552</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphitized carbon black</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>57210-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection syringe</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td>LC2213461800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Gulonic acid &#947;-lactone</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>310301-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Linner splitless</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td>221-4887-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate anhydrus</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M7506-2KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>131091.12.12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milli-Q ultrapure (type 1) water</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>F4H4783518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips 10 - 100 &#181;L</td>
			<td>Biologix</td>
			<td>200010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips 100 - 1000 &#181;L</td>
			<td>Brand</td>
			<td>541287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips 20 - 200 &#181;L</td>
			<td>Brand</td>
			<td>732028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes Pasteur</td>
			<td>NORMAX</td>
			<td>5426023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pippette Transferpette S variabel 10 - 100 &#181;L</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>704774</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pippette Transferpette S variabel 100 - 1000 &#181;L</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>704780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pippette Transferpette S variabel 20 - 200 &#181;L</td>
			<td>SCILOGEX</td>
			<td>7.12111E+11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary-secondary amine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>52738-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shikimic acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5375-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Filter PTFE/L 25 mm, 0.45 &#181;m</td>
			<td>NORMAX</td>
			<td>FE2545I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyl phosphate (QC)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>241288-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vials with fused-in insert</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>29398-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Z-SEP+</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>55299-U</td>
			<td>zirconium oxide-based sorbent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pesticides</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>CAS registry number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,4&#180;-DDD</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>35486-250MG</td>
			<td>72-54-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,4&#180;-DDE</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>35487-100MG</td>
			<td>72-55-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,4&#180;-DDT</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>31041-100MG</td>
			<td>50-29-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alachlor</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45316-250MG</td>
			<td>15972-60-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldrin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36666-25MG</td>
			<td>309-00-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atrazine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45330-250MG-R</td>
			<td>1912-24-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atrazine-d5 (IS)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>34053-10MG-R</td>
			<td>163165-75-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprofezin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>37886-100MG</td>
			<td>69327-76-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbofuran</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32056-250-MG</td>
			<td>1563-66-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorpropham</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45393-250MG</td>
			<td>101-21-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorpyrifos</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45395-100MG</td>
			<td>2921-88-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorpyrifos-methyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45396-250MG</td>
			<td>5598-13-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltamethrin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45423-250MG</td>
			<td>52918-63-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloran</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45435-250MG</td>
			<td>99-30-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichlorvos</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45441-250MG</td>
			<td>62-73-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dieldrin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>33491-100MG-R</td>
			<td>60-57-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diphenylamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45456-250MG</td>
			<td>122-39--4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endosulfan A</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32015-250MG</td>
			<td>115-29-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endrin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32014-250MG</td>
			<td>72-20-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EPN</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36503-100MG</td>
			<td>2104-64-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Esfenvalerate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>46277-100MG</td>
			<td>66230-04-4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethion</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45477-250MG</td>
			<td>563-12-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fenamiphos</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45483-250MG</td>
			<td>22224-92-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fenitrothion</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45487-250MG</td>
			<td>122-14-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fenthion</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36552-250MG</td>
			<td>55-38-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fenvalerate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45495-250MG</td>
			<td>51630-58-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCB</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45522-250MG</td>
			<td>118-74-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iprodione</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36132-100MG</td>
			<td>36734-19-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lindane</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45548-250MG</td>
			<td>58-89-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Malathion</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36143-100MG</td>
			<td>121-75-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metalaxyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32012-100MG</td>
			<td>57837-19-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methidathion</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36158-100MG</td>
			<td>950-37-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Myclobutanil</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>34360-100MG</td>
			<td>88671-89-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxyfluorfen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>35031-100MG</td>
			<td>42874-03-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parathion-methyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36187-100MG</td>
			<td>298-00-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penconazol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>36189-100MG</td>
			<td>66246-88-6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pirimiphos-methyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32058-250MG</td>
			<td>29232-93-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propiconazole</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45642-250MG</td>
			<td>60207-90-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propoxur</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45644-250MG</td>
			<td>114-26-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propyzamide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45645-250MG</td>
			<td>23850-58-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyriproxifen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>34174-100MG</td>
			<td>95737-68-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tolclofos-methyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>31209-250MG</td>
			<td>5701804-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triadimefon</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>45693-250MG</td>
			<td>43121-43-3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triflumizole</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32611-100MG</td>
			<td>68694-11-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-HCH</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>33377-50MG</td>
			<td>319-86-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-HCH</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>33376-100MG</td>
			<td>319-85-7</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

determination of 45 pesticides in avocado varieties by the quechers method and gas chromatography-tandem mass spectrometry

가스 크로마토그래피(GC) 탠덤 질량분석법(MS/MS)은 식품의 잔류 농약 모니터링에 광범위하게 사용되는 탁월한 분석 기기입니다. 그럼에도 불구하고 이러한 분석법은 매트릭스 효과(ME)에 취약하며, 이는 분석물과 매트릭스의 특정 조합에 따라 정확한 정량화에 잠재적으로 영향을 미칠 수 있습니다. ME를 완화하기 위한 다양한 전략 중에서 매트릭스 일치 보정은 비용 효율성과 간단한 구현으로 인해 농약 잔류물 응용 분야에서 널리 사용되는 접근 방식을 나타냅니다. 이 연구에서는 포름암모늄 및 GC-MS/MS와 함께 Qu ick-E asy-Cheap-E ffective-R ugged-S afe(QuEChERS) 방법을 사용하여 세 가지 종류의 아보카도(즉, Criollo, Hass 및 Lorena)에서 총 45개의 대표적인 살충제를 분석했습니다.
이를 위해 아보카도 샘플 5g을 10mL의 아세토니트릴로 추출한 후 포름산암모늄 2.5g을 첨가하여 상 분리를 유도했습니다. 그 후, 상층액은 150mg의 무수 MgSO4, 50mg의 1차-2차 아민, 50mg의 옥타데실실란, 10mg의 흑연화 카본 블랙 및 60mg의 지르코늄 산화물 기반 흡착제(Z-Sep+)를 사용하여 분산형 고체상 추출을 통해 세척 공정을 거쳤습니다. GC-MS/MS 분석은 25분 이내에 성공적으로 수행되었습니다. 방법의 성능을 평가하기 위해 엄격한 검증 실험이 수행되었습니다. 각 아보카도 품종에 대한 매트릭스 일치 보정 곡선을 검사한 결과, ME는 상대적으로 일관되게 유지되었으며 대부분의 살충제/품종 조합에서 20% 미만(부드러운 ME로 간주됨)으로 나타났습니다. 또한, 이 방법의 정량화 한계는 세 가지 품종 모두에 대해 5μg/kg 미만이었습니다. 마지막으로, 대부분의 살충제에 대한 회수 값은 허용 범위인 70-120% 내에 있었고 상대 표준 편차 값은 20% 미만이었습니다.

In chemical analysis, the matrix effect (ME) can be defined in various ways, but a widely accepted general definition is as follows: it refers to the change in the signal, particularly a change in the slope of the calibration curve when the sample matrix or portion of it is present during the analysis of a specific analyte. As a critical aspect, ME necessitates thorough investigation during the validation process of any analytical method, as it directly affects the accuracy of quantitative measurement for the target analytes1. Ideally, a sample pretreatment procedure should be selective enough to avoid extracting any components from the sample matrix. However, despite significant efforts, many of these matrix components still end up in the final determination systems in most cases. Consequently, such matrix components often compromise the recovery and precision values, introduce additional noise, and escalate the overall cost and labor involved in the method.
In gas chromatography (GC), ME arises due to the presence of active sites within the GC system, which interact with the target analytes through various mechanisms. On the one hand, the matrix constituents block or mask these active sites that would otherwise interact with the target analytes, resulting in frequent signal enhancement2. On the other hand, active sites that remain unobstructed may cause peak tailing or analyte decomposition due to strong interactions, leading to a negative ME. However, this can offer potential benefits in certain cases2. It is crucial to emphasize that achieving complete inertness in a GC system is exceedingly challenging, despite using highly inert components and proper maintenance. With continuous use, the accumulation of matrix components in the GC system becomes more pronounced, causing an increased ME. Nowadays, it is widely recognized that analytes containing oxygen, nitrogen, phosphorus, sulfur, and similar elements, exhibit a greater ME as they readily interact with these active sites. Conversely, highly stable compounds such as hydrocarbons or organohalogens do not undergo such interactions and do not show observable ME during analysis2,3.
Overall, ME cannot be fully eliminated, leading to the development of several strategies for compensation or correction when complete removal of matrix components is not feasible. Among these strategies, the utilization of deuterated internal standards (ISs), analyte protectants, matrix-matched calibration, the standard addition method, or the modification of injection techniques have been documented in scientific literature1,2,4,5. The SANTE/11312/2021 guidelines have also recommended these strategies6.
Regarding the application of matrix-matched calibration to compensate for MEs, sample sequences in practical situations encompass diverse types of foods or various samples from the same commodity. In this case, the assumption is made that employing any sample from the same commodity will effectively compensate for ME in all samples. However, there is a lack of sufficient studies in the existing literature that specifically investigate this issue7.
The multiresidue determination of pesticides in matrices containing an appreciable percentage of fat and pigments constitutes a challenging task. The considerable amount of coextracted material can significantly affect the extraction efficiency and interfere with the subsequent chromatographic determination, potentially damaging the column, source, and detector, and resulting in significant MEs8,9,10. Consequently, the analysis of pesticides at trace levels in such matrices necessitates a significant reduction of matrix components before analysis while ensuring high recovery values7. Obtaining high recovery values is crucial to ensure that pesticide analyses remain reliable, accurate, and compliant with regulatory standards. This is vital for ensuring food safety, environmental protection, and informed decision-making in agriculture and related fields.
Avocado is a fruit of high commercial value cultivated in tropical and Mediterranean climates worldwide and widely consumed both in its regions of origin and in the numerous export markets. From the analytical point of view, avocado is a complex matrix containing a significant number of fatty acids (i.e., oleic, palmitic, and linoleic), similar to nuts, a significant pigment content, as in green leaves, as well as sugars and organic acids, similar to those found in other fruits11. Due to its fatty nature, special attention must be given when employing any analytical method for analysis. While pesticide residue analysis has been conducted on avocados using GC-MS in some instances8,12,13,14,15,16,17,18,19,20, it has been relatively less frequent compared to other matrices. In most cases, a version of the Quick-Easy-Cheap-Effective-Rugged-Safe (QuEChERS) method has been applied8,12,13,14,15,16,17,18. None of these studies have investigated the consistency of MEs among different avocado varieties.
Therefore, the aim of this work was to study the consistency of MEs and recovery values for 45 representative pesticides across different varieties of avocado (i.e., Criollo, Hass, and Lorena) using the QuEChERS method with ammonium formate and GC-MS/MS. To the best of our knowledge, this is the first time that this type of study has been conducted on such fatty matrix samples.

살충제 분석을 위해 포름산암모늄과 함께 QuEChERS 분석법을 사용한 아보카도 시료 전처리

QuEChERS 분석법 및 가스 크로마토그래피-탠덤 질량분석법을 이용한 아보카도 품종의 45가지 살충제 측정

To begin the sample preparation using the QuEChERS method, weigh five grams of an avocado sample of interest in a 50 milliliter centrifuge tube. Add 50 microliters of the procedural internal standard or P-IS solution to the tube. Add 10 milliliters of aceto nitrile to the centrifuge tube and shake the tube at 70 RPM for five minutes.Then add 2.5 grams of ammonium formate to it and shake the tube again at 70 RPM for five minutes. Subsequently, centrifuge the tube at 1, 800 G for five minutes. Next, in a two milliliter centrifuge tube, take the appropriate amounts of the reagents displayed on the screen.Then add one milliliter of the extract into the tube for purification using dispersive solid phase extraction. Vortex the tube for 30 seconds before centrifuging it at 1, 800 G for five minutes. Transfer 200 microliters of the purified extract to an auto-sampler vial, and add 20 microliters of the analyte protectant solution, followed by adding 50 microliters of a pre-prepared triphenyl phosphate solution.Finally, perform instrumental analysis using a GC-MS/MS system.

SANTE/11312/2021 가이드라인6에 따라 분석 방법의 포괄적인 검증이 수행되었으며, 여기에는 선형성, ME, 회수 및 반복성 평가가 포함됩니다.
선형성 평가를 위해 여러 농도 수준(5 - 600 μg/kg 범위)에서 스파이크된 블랭크 샘플을 사용하여 매트릭스 일치 보정 곡선을 구성했습니다. 선택된 대부분의 살충제에 대한 결정 계수(R2)는 0.99 이상인 것으로 나타났?...

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본 프로토콜은 포름암모늄을 사용한 Qu ick-E asy-Cheap-E ffective-R ugged-S afe(QuEChERS) 분석법을 사용하여 아보카도 품종의 다등급 살충제 잔류물을 분석한 후 가스 크로마토그래피-탠덤 질량분석법을 설명합니다.

Gas chromatography (GC) tandem mass spectrometry (MS/MS) stands as a preeminent analytical instrument extensively employed for the surveillance of ...

QuEChERS 방법을 사용하여 시료 전처리를 시작하려면 50밀리리터 원심분리기 튜브에서 관심 아보카도 시료 5g의 칭량합니다. 50 마이크로리터의 절차적 내부 표준물질 또는 P-IS 용액을 튜브에 추가합니다. 원심분리기 튜브에 아세토 니트릴 10mL를 넣고 70RPM으로 5분 동안 튜브를 흔듭니다.그런 다음 2.5g의 포름암모늄을 넣고 70RPM에서 5분 동안 튜브를 다시 흔듭니다. 이어서, 5 분 동안 1, 800 G에 관을 분리하십시오. 다음으로, 2 밀리리터 원심 분리기 튜브에서 화면에 표시된 시약을 적당량 복용합니다.그런 다음 분산 고체상 추출을 사용하여 정제하기 위해 추출물 1m리터를 튜브에 추가합니다. 5 분 동안 1, 800 G에 그것을 분리하기 전에 30 초 동안 관을 와동하십시오. 정제된 추출물 200마이크로리터를 자동 샘플러 바이알에 옮기고 분석물 보호제 용액 20마이크로리터를 첨가한 다음 사전 준비된 트리페닐 포스페이트 용액 50마이크로리터를 첨가합니다.마지막으로 GC-MS/MS 시스템을 사용하여 기기 분석을 수행합니다.

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Chemistry

Determination of 45 Pesticides in Avocado Varieties by the QuEChERS Method and Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

408 조회수.  Universidad EAN. QuEChERS 방법을 사용하여 시료 전처리를 시작하려면 50밀리리터 원심분리기 튜브에서 관심 아보카도 시료 5g의 칭량합니다. 50 마이크로리터의 절차적 내부 표준물질 또는 P-IS 용액을 튜브에 추가합니다. 원심분리기 튜브에 아세토 니트릴 10mL를 넣고 70RPM으로 5분 동안 튜브를 흔듭니다.그런 다음 2.5g의 포름암모늄을 넣고 70RPM에서 5분 동안 튜브를 다시 흔듭니다. 이어서, 5 ...

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Gas chromatography (GC) tandem mass spectrometry (MS/MS) stands as a preeminent analytical instrument extensively employed for the surveillance of pesticide residues in food. Nevertheless, these methods are vulnerable to matrix effects (MEs), which can potentially affect accurate quantification depending on the specific combination of analyte and matrix. Among the various strategies to mitigate MEs, matrix-matched calibration represents the prevailing approach in pesticide residue applications due to its cost-effectiveness and straightforward implementation. In this study, a total of 45 representative pesticides were analyzed in three different varieties of avocado (i.e., Criollo, Hass, and Lorena) using the Quick-Easy-Cheap-Effective-Rugged-Safe (QuEChERS) method with ammonium formate and GC-MS/MS. 
For this purpose, 5 g of the avocado sample was extracted with 10 mL of acetonitrile, and then 2.5 g of ammonium formate was added to induce phase separation. Subsequently, the supernatant underwent a cleanup process via dispersive solid-phase extraction employing 150 mg of anhydrous MgSO4, 50 mg of primary-secondary amine, 50 mg of octadecylsilane, 10 mg of graphitized carbon black, and 60 mg of a zirconium oxide-based sorbent (Z-Sep+). The GC-MS/MS analysis was successfully performed in less than 25 min. Rigorous validation experiments were carried out to assess the performance of the method. The examination of a matrix-matched calibration curve for each variety of avocado revealed that the ME remained relatively consistent and less than 20% (considered as a soft ME) for most pesticide/variety combinations. Furthermore, the method&#180;s limits of quantification were lower than 5 &#181;g/kg for all three varieties. Finally, the recovery values for most pesticides fell within the acceptable range of 70-120%, with relative standard deviation values below 20%.

The present protocol describes the analysis of multiclass pesticide residues in avocado varieties using the Quick-Easy-Cheap-Effective-Rugged-Safe (QuEChERS) method with ammonium formate, followed by gas chromatography-tandem mass spectrometry.