Ligadura da Artéria Coronária Descendente Anterior para Pesquisa de Isquemia-Reperfusão: Aprimoramento do Modelo via Modificações Técnicas e Controle de Qualidade

Resumo

Neste trabalho, apresentamos um protocolo com foco no controle de qualidade da ligadura da artéria coronária descendente anterior, modificando tecnicamente o procedimento tradicional em ratos para pesquisa de isquemia-reperfusão miocárdica aguda.

Resumo

A doença coronariana é a principal causa de morte no mundo. A cessação completa do fluxo sanguíneo nas artérias coronárias causa infarto agudo do miocárdio com supradesnivelamento do segmento ST (IAMCSST), resultando em choque cardiogênico e arritmia fatal, que estão associados a alta mortalidade. A intervenção coronária primária (ICP) para recanalização da artéria coronária melhora significativamente os desfechos do IAMCSST, mas os avanços obtidos na redução do tempo porta-balão não conseguiram reduzir a mortalidade hospitalar, sugerindo que estratégias terapêuticas adicionais são necessárias. A ligadura da artéria coronária descendente anterior (DA) em ratos é um modelo animal para pesquisa de IR miocárdica aguda comparável ao cenário clínico em que a recanalização coronariana rápida por ICP é usada para IAMCSST; no entanto, o IAMCSST induzido por ICP é uma operação tecnicamente desafiadora e complicada, associada a alta mortalidade e grande variação no tamanho do infarto. Identificamos a posição ideal para a ligadura da ADA, criamos um gadget para controlar uma alça de laço e apoiamos uma manobra cirúrgica modificada, reduzindo o dano tecidual, para estabelecer um protocolo de pesquisa de isquemia-reperfusão (RI) miocárdica aguda confiável e reprodutível para ratos. Trata-se de uma cirurgia sem sobrevida. Também propomos um método para validar a qualidade dos resultados dos estudos, que é uma etapa crítica para determinar a acurácia de análises bioquímicas subsequentes.

Introdução

A doença isquêmica do coração é uma das principais causas de morte no^mundo1,2. Além do controle dos fatores de risco modificáveis para prevenir o desenvolvimento da doença coronariana, estratégias terapêuticas são crucialmente necessárias para a síndrome coronariana^aguda3,4. Choque cardiogênico e arritmia fatal no infarto agudo do miocárdio com supradesnivelamento do segmento ST (IAMCSST) aumentam a probabilidade de mortalidade hospitalar 5,6,7,8.

Protocolo

Todos os experimentos com animais foram conduzidos de acordo com o Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, publicado pelo National Institutes of Health dos EUA (publicação NIH no. 85-23, revisada em 1996). O protocolo do estudo foi aprovado e de acordo com as diretrizes do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Católica de Fu-Jen.

1. Preparo antes da cirurgia

1. Preparo de bolas de algodão úmidas salinas
   1. Coloque uma máscara cirúrgica e luvas.
   2. Aperte uma pequena porção de algodão estéril e enrole-o para formar uma bola. Repita este procedimento.
   3. Mergulh....

Resultados

Ao final da isquemia e reperfusão miocárdica, a qualidade da ligadura da DAE deve ser avaliada antes de análises bioquímicas ou moleculares adicionais.

A suficiência da oclusão da DAE através da ligadura foi determinada injetando-se 1 mL de corante azul de Evan a 2% através do cateter venoso central. Em seguida, o miocárdio com perfusão coronariana foi corado de azul em relação à região não perfundida, que permaneceu vermelha (Figura 1A). A região .......

Discussão

O protocolo proposto tem várias características distintas, como identificar a posição exata para a ligadura da ADA, criar um dispositivo para controlar uma alça de laço em uma única sutura e apoiar uma manobra cirúrgica modificada para reduzir o dano tecidual, permitindo que os pesquisadores liguem a LAD com precisão, segurança e consistência, bem como controlem o estado da alça de laço instantaneamente para pesquisa de IR miocárdica aguda.

A localização da ligadura da DA influ.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
Evan’s blue	Sigma Aldrich	E2129
Forceps	Shinva
Pentobarbital	Sigma Aldrich	1507002
Scalpel blades	Shinva	s2646
Scalpel handles	Shinva
Silk sutures	SharpointTM	DC-2150N
Surgical needle	AnchorTM
Triphenyltetrazolium chloride (TTC) solution	Solarbio	T8170-1
Ventilator	Harvard Rodent Ventilator