Dissolva as alíquotas de Fura-2 AM na Solução de Tyrode para obter uma concentração final de 1 Fura-2 AM micromolar para adicionar às células. Aspirar o meio e substituí-lo por Solução de Tyrode, contendo Fura-2 AM. Incubar por 15 minutos a 37 graus Celsius em uma incubadora ou no sistema de medição baseado em ótica. Retire a Solução de Tyrode contendo Fura-2 AM e lave os poços duas vezes com a Solução de Tyrode fresca.
Finalmente, incube as células na Solução de Tyrode por mais cinco minutos a 37 graus Celsius para permitir a desesterificação do Fura-2 AM. Coloque a placa dentro do sistema de medição baseado em óptica para prosseguir com as medições de contratilidade. Selecione um poço, escolha uma área dentro do poço para observar a contração e o relaxamento sincronizados e, em seguida, clique em Iniciar e adicione medição. Além dos traços de contratilidade, o transiente de cálcio ratiométrico em tempo real aparece na tela.
