Homogeneizar o tecido dissecado da estria vascular da orelha de camundongo em homogeneizador Dounce de dois mililitros, com 10 a 20 golpes de gelo. Lise o tecido no gelo por 25 minutos. Em seguida, filtre o tecido através de um filtro de 30 mícrons e gire o filtrado a 500G por cinco minutos a quatro graus Celsius.
Retire o sobrenadante e ressuspenda o pellet de células em um mililitro de lavagem de núcleos e tampão de ressuspensão. Em seguida, filtre as células através de um filtro de 10 mícrons e centrífuga a 500G por cinco minutos a quatro graus Celsius. Retire o sobrenadante e ressuspenda em 50 microlitros de núcleo de lavagem e tampão de ressuspensão.
Após a coloração com Azul de Tripano, diluir cinco microlitros da suspensão celular em 50 microlitros de PBS 1X e contar as células. Para preparar capturas de núcleo único, carregue a amostra com a densidade nuclear desejada no chip.
