Após dissecar a medula espinhal e separar o alargamento lombar, colocar o alargamento lombar em uma inclinação de 35 graus com o lado dorsal para cima e o lado caudal para baixo. Absorva qualquer excesso de água na superfície do tecido usando um papel de filtro absorvente. Despeje cuidadosamente o gel de agarose derretido na placa de Petri contendo o aumento lombar.
Posicione a placa de Petri na mistura de água gelada para garantir um resfriamento rápido do gel. Molde o gel em um cubo de 15 por 10 por 10 milímetros e monte-o no disco da amostra usando super cola. Ajuste as configurações do vibratomo para uma espessura de 350 micrômetros, uma velocidade de 0,14 a 0,16 milímetros por segundo, uma amplitude de um milímetro e uma frequência de vibração de 85 hertz.
Agora, use a pinça deslizante de tampa para prender uma fatia e colocá-la na câmara de incubação, preenchida com líquido cefalorraquidiano artificial continuamente oxigenado.
